外周血液中miRNA表达与老年性黄斑变性相关性研究

目的　检测微小核糖核酸（microribonucleicacids，miRNA）在老年性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）患者中的表达，并探讨miRNA的表达量与AMD病程之间的关系。方法　选取2014年1月至2016年11月于同济大学附属第十人民医院眼科门诊就诊的AMD患者6例为试验组，并选取同期6名正常人为对照组，通过基因芯片技术检测两组血液中miRNA的表达量。扩大样本的病例对照研究中共纳入126例AMD患者和140名正常人，检测其血液样本中miRNA的表达，比较两组人群间miRNA的表达量差异。结果　通过基因芯片技术，在试验组与对照组间共检测出216个miRNA存在表达差异（均为P<0.05），与对照组相比，试验组中111个miRNA表达量上升，105个miRNA表达量下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。扩大样本的病例对照研究结果表明，在AMD患者中，miR-27a-3p、miR-29b-3p、miR-195-5p的表达量显著上升，同时，湿性AMD患者血液中miR-27a-3p的表达量高于干性AMD患者，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　AMD患者外周血中miRNA表达量水平有明显变化，miR-27a-3p、miR-29b-3p、miR-195-5p可能成为AMD血清学诊断和预后的标志物。     

缓激肽对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导视网膜色素上皮细胞发生上皮间充质转化的影响

目的　制作增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transformation,EMT）细胞模型,研究缓激肽（bradykinin,BK）对视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞发生EMT的影响,并探讨BK对PVR的影响机制。方法　体外培养人RPE细胞株ARPE-19细胞,采用不同浓度转化生长因子-β1（transforming growth factor- β1,TGF- β1）分别作用于ARPE-19细胞24 h、48 h,于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用CCK-8检测细胞增殖情况,确定TGF-β1浓度及作用时间;利用Western blot和细胞免疫荧光检测EMT标志蛋白E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）和波形蛋白（Viminten）表达情况;细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移能力。同时采用Western blot检测TGF/Smad通路下游pSmad3和Smad7的表达。结果　TGF- β1刺激ARPE-19细胞后可以成功诱导EMT体外细胞模型。当TGF-β1浓度为10 μg·L^-1、作用时间为48 h时,细胞增殖最明显。BK在TGF- β1诱导的EMT中可以降低α-SMA、Viminten的表达,升高E-钙黏素的表达并且降低细胞迁移能力。这些影响能被BK-2受体拮抗剂HOE-140逆转。TGF-β1诱导ARPE-19细胞发生EMT时,pSmad3表达量升高;TGF-β1刺激前给予BK刺激,pSmad3表达量减少;加入BK前预敷HOE-140,然后给予TGF-β1刺激,BK作用减弱,pSmad3表达量升高。Smad7表达趋势与pSmad3表达趋势相反。结论　10 μg·L^-1 TGF-β1可导致ARPE-19细胞发生EMT。BK通过TGF-/Smad信号通路上调Smad 7的表达、下调pSmad 3的表达,从而逆转TGF-β1诱导的EMT。提示BK可能是一种新的、有效的治疗PVR的方法。     

角膜塑形镜对青少年中低度近视患者角膜厚度和角膜内皮的影响

目的 探讨角膜塑形镜对青少年中低度近视患者中央角膜厚度(central corneal thickness, CCT)和角膜内皮细胞的影响。方法 收集2010年3月至2013年8月58例(共109只眼)青少年中低度近视患者(其中男性24例,女性34例)的临床资料。平均等效球镜屈光度(-2.58±1.12)D,屈光度为-0.25～-5.25D。采用夜戴型角膜塑形镜进行近视矫正,每晚配戴7h,戴镜后1d,1、2周,1、3、6个月,使用A超和角膜内皮细胞计数分析仪收集中央角膜厚度、角膜内皮细胞数、平均细胞面积、细胞密度、细胞变异系数、六角形细胞比率等数据;用角膜荧光素染色法对角结膜并发症发生率进行统计。以后每隔6个月随访,复查上述指标。比较戴镜前及戴镜后6、12、24个月各参数变化。结果 中低度近视青少年患者戴镜前和戴镜后6、12、24个月的平均CCT值分别为(560.97±32.57)、(559.68±31.18)、(557±32.27)、(557.24±30)μm,差异无统计学意义(F=0.393,P=0.758)。戴镜前后,患者的角膜内皮细胞数、细胞密度、角膜内皮细胞平均面积、细胞变异系数和角膜内皮细胞六边形比率差异均无统计学意义(F值分别为1.643、0.808、1.436、0.017、0.029,P值均>0.05)。角结膜并发症发生率为20.18%,不伴有严重并发症。结论 青少年中低度近视患者长期科学配戴高透氧性角膜塑形镜对中央角膜厚度和角膜内皮细胞无明显影响,是一种相对安全的治疗方法。     

角膜塑形镜对不同屈光度青少年近视患者的疗效分析

目的 探索夜戴型角膜塑形镜（orthokeratology,OK镜）对不同屈光度青少年近视患者的临床效果及安全性。方法 收集眼科视光门诊162例（其中单眼佩戴患者23例,共301只眼）,按等效球镜度数分为3组,分别为A组（98眼,-0.50～-2.00D）、B组（155眼,-2.25～-4.00D）及C组（48眼,-4.25～-6.00D）。观察患者每晚配戴7.5～10h OK镜后临床效果,记录、分析戴镜前及戴镜6、12个月后3组裸眼视力、眼轴、角膜曲率、角膜中央厚度、角膜内皮细胞密度变化及裂隙灯检查眼部情况。结果 3组患者戴镜6、12个月后,裸眼视力均较戴镜前显著提高（P<0.001）。戴镜12个月后,3组间视力增加值差异有统计学意义（P<0.001）;戴镜后6、12个月后,各组中央角膜曲率平K值（flat kerotometry, FK）、陡K值(steep kerotometry, SK)较戴镜前差异均有统计学意义（P<0.001）。戴镜12个月后,A组中央角膜FK、SK值与B组及C组相比,差异有统计学意义（P<0.001）,而B组与C组间FK、SK值差异无统计学意义（P>0.05）;戴镜6、12个月后,A组眼轴与戴镜前比较,差异有统计学意义（P<0.001）,而B与C组眼轴与戴镜前比较,差异无统计学意义（P>0.05）。戴镜12个月后,B、C组眼轴增长值与A组差异均有统计学意义（P<0.001）,而B组与C组差异无统计学意义（P>0.05）。戴镜6、12个月后,3组患者角膜中央厚度、内皮细胞密度较戴镜前无明显变化（P>0.05）;A、B、C组轻度角膜点状着染分别为3例（3.06%）、21例（13.46%）、10例（20.83%）。结论 OK镜控制青少年近视发展是有效且安全的,对屈光度在-2D以上青少年患者近视发展控制效果较好。     

四川省南充市318名农村居民血压测量的结果分析

目的:了解四川省南充市农村常住居民高血压患病情况,并讨论其发病的特点,为该地高血压预防、治疗提供相关依据,并结合当地高血压情况对比分析全国农村目前的高血压发病情况。方法:采用随机抽样对四川省南充市3区农村进行问卷调查,主要了解总体人群高血压发病与年龄,性别,食盐摄入量及肥胖的关系。结果:高血压总患病率为28.62%,男女患病率分别为35.83%、24.24%。各年龄层之间的患病率大致随年龄的增加而增加,但较高年龄则患病率有所下降。食盐摄入量较高者及肥胖者病发高血压的风险有所加大。结论:四川省南充市农村居民的高血压患病率比较高。男性患病率较女性高,食盐量摄入量大致大于等于6g/天比小于6g/天的高血压患病率风险加大,肥胖者病发高血压的风险也有所加大,各年龄层之间的男女患病也具有差异。造成高血压的患病率较高及上述差别可能是由于该区域乡镇居民的生活习惯及高血压的防治不当有关。     

针刺治疗绝经后期干眼患者的疗效及其泪液蛋白质组学研究

目的　研究针刺疗法治疗绝经后期干眼患者的有效性及其分子机制。方法　选取28例（56眼）绝经后期干眼妇女,随机分成单纯人工泪液（artificial tears,AT）治疗组（AT组）14例28眼及针刺联合人工泪液 （acupuncture plus artificial tears,AC+AT） 治疗组（AC+AT组）14例28眼,每组均治疗2个月,并对治疗前后两组患者眼表疾病指数 （ocular surface disease index,OSDI）评分、症状评分、体征评分以及泪膜破裂时间（break-up time,BUT） 进行分析。同时采集治疗前后各组泪液样本,采用二维纳米液相色谱耦合串联质谱法 （two-dimensional nano-liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry,2D Nano-LC-MS/MS）对AC+AT组治疗前后泪液进行蛋白质组学分析,采用蛋白质印记法比较两组泪液蛋白差异。结果　两组治疗后OSDI评分、症状评分、体征评分和BUT,AT组分别为39.08±18.68、7.43±2.08、11.46±2.29、（4.75±1.74）s,AC+AT组分别为24.55±17.43、4.68±2.54、11.21±2.96、（4.57±2.71）s;与治疗前相比均明显改善,差异均有统计学意义（均为P=0.000）。与AT组相比,针刺治疗后AC+AT组的症状评分明显改善（P=0.000）。2D Nano-LC-MS/MS法分析了泪液中2411种蛋白,其中142种表达下调,169种表达上调。与AT组相比,针刺治疗后AC+AT组患者泪液中细胞质蛋白表达下调（P=0.000）,分泌蛋白表达上调（P=0.000）。在蛋白功能方面,与AT组相比,AC+AT组细胞组分蛋白表达下调 （P=0.000）,免疫蛋白表达上调 （P=0.040）。结论　AC+AT治疗增加了泪液蛋白质合成及分泌,改善临床绝经后期干眼患者症状。针刺治疗可能成为治疗该类干眼患者的有效辅助疗法。