人骨髓单个核细胞向肝细胞诱导分化的体外研究

目的 探讨在HGF、FGF_4诱导下骨髓单个核细胞能否向肝细胞分化。方法 找健康忐愿者,年龄4～50岁,胸骨抽取骨髓,用淋巴分离液分离出骨髓单个核细胞,用含2％胎牛血清和1×ITS的DMEM培养,分别用单独HGF、单独FGF_4、HGF和FGF_4联合刺激、无生长因子4种处理因素进行诱导培养,分别于诱导培养0、7、14、21、28天时,留取细胞,用免疫细胞化学法检测CK18、AFP、白蛋白,用PAS法进行糖元染色试验以验证诱导分化的结果。结果 0天时,AFP、白蛋白少数细胞阴性,CK18阴性,糖元未见阳性;加生长因子的三组AFP在7、14天时表达逐渐增高,21、28天减弱;糖元、CK18、白蛋白表达逐渐增高。无生长因子组,在7、14、21、28天时,这此指标均未见表达。结论 在HGF、FGR_4诱导下,骨髓单个核细胞可分化为具肝细胞表型和功能的细胞。     

Hsa-miR-93在肝癌中的作用机制研究

目的观察hsa-miR-93对肝癌细胞生长和细胞周期的影响，以分析其在肝癌中的作用机制。方法用real time RT-PCR法分析hsa-miR-93在人肝癌和癌旁肝组织的表达情况。此后构建hsa-miR-93过表达载体，同时合成二甲氧修饰的hsa-miR-93的反义核苷酸序列，二者转染肝癌细胞株观察它们对肝癌细胞生长及细胞周期的影响，分别以空载体和无关寡核苷酸序列为对照。转染后CCK-8法检测肝癌细胞生长情况，通过流式细胞仪分析细胞周期。结果hsa-miR-93在肝癌组织中表达明显高于癌旁肝组织。hsa-miR-93过表达载体可以促进肝癌细胞生长，促进细胞周期的G1／S期转换，而hsa-miR-93反义序列抑制肝癌细胞生长，使肝癌细胞阻滞于G1期（P〈0．05）。结论hsa-miR-93通过促进细胞周期的G1／S期转换而促进肝癌细胞生长，提示hsa-miR-93可能是肝癌的发病机制中一个重要分子。     

肝细胞癌差异表达基因P-02反义寡核苷酸抑瘤作用的体外实验研究

目的：通过全硫代修饰的肝细胞癌差异表达基因P-02反义寡核苷酸对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖活性的影响，探讨P-02基因的功能。方法：以脂质体为载体，采用MTT法、RT-PCR、流式细胞术检测P-02 AS-ODN(antisense oligonucleotide)对SMMC-7721细胞生长、增殖、细胞周期的作用。结果：脂质体介导的P-02基因反义寡核苷酸可抑制SMMC-7721增殖，RT-PCR结果显示P-02基因的扩增条带明显减弱，流式细胞术显示G1期细胞增多，M期及S期细胞数减少。结论：脂质体介导的AS-ODN可抑制SMMC-7721的恶性表型，证实P-02基因在肝细胞癌的发生发展中可能有重要作用。     

骨髓干细胞向肝系细胞分化的研究

干细胞是一类具有无限或较长的自我更新和增殖分化能力的细胞 ,且具不对称分化性 ,其子代可能是基因型、表现型与自身完全相同的细胞 ,也可能是向前分化了的细胞。因其巨大的增殖、分化潜能 ,目前对干细胞的研究已成为一个热点领域 ,生命科学领域的研究者对干细胞的应用寄予厚望。干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞 ,前者虽然具有更大的增殖、分化潜能 ,但因受来源和伦理因素的限制 ,近几年对成体干细胞的研究较多且成果显著 ,已在生物学特征、多能分化潜能、分化机制、临床应用方面取得较大的突破。骨髓干细胞是研究较多且较深入的一类成…     

肝细胞癌差异表达基因P-02反义寡核苷酸抑瘤作用的体外实验研究

目的 :通过全硫代修饰的肝细胞癌差异表达基因P 0 2反义寡核苷酸对人肝癌细胞系SMMC 772 1增殖活性的影响 ,探讨P 0 2基因的功能。方法 :以脂质体为载体 ,采用MTT法、RT PCR、流式细胞术检测P 0 2AS ODN(antisenseoligonucleotide)对SMMC 772 1细胞生长、增殖、细胞周期的作用。结果 :脂质体介导的P 0 2基因反义寡核苷酸可抑制SMMC 772 1增殖 ,RT PCR结果显示P 0 2基因的扩增条带明显减弱 ,流式细胞术显示G1期细胞增多 ,M期及S期细胞数减少。结论 :脂质体介导的AS ODN可抑制SMMC 772 1的恶性表型 ,证实P 0 2基因在肝细胞癌的发生发展中可能有重要作用     

COX—1和COX—2抑制剂与胃肠道疾病

ＣＯＸ(ｃｙｃｌｏ -ｏｘｙｇｅｎａｓｅ)有两种异构体 :ＣＯＸ -1和ＣＯＸ -2 ,阿斯匹林和其它ＮＳＡＩＤｓ既有消炎镇痛作用也有较多的副作用 ,主要是由于其抑制ＣＯＸ的非选择性 ,因而较少副作用的选择性ＣＯＸ抑制剂 (抑制ＣＯＸ异构体ＣＯＸ -2 )在近几年越来越受到人们重视 ,这些药物有ｍｅｌｏｘｉｃａｍ、ｎｉｍｅｓｕｌｉｎ、ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ、ｅｔｏｄｏｌａｃ、尼美舒利 (ｎｉｍｅｓｕｌｉｄｅ)等。　　ＣＯＸ -1产物的作用研究证明 ,经由环氧和酶 (ＣＯＸ -1)参与形成的内源性花生四烯酸、前列腺素的代谢产物被认为是胃粘膜…