单标准微板速率法检测ALT活力

为适应血液筛查的批量、快速、自动化及数据处理网络化的要求,以微板为载体的各种ALT测定方法目前已在许多采供血机构应用.本中心自1999年开始采用微板速率法进行ALT筛查,在实践中笔者发现该方法存在两个问题:①由于使用低、中、高3个标准品形成标准曲线,任何一个标准品偏离真值过多都会影响整个微板的实验结果,日常工作中实验重复性较差;②酶标准品一般均为水溶液,反复冻融影响酶活力,使酶标准品较不稳定.为此,笔者采用血站专用ALT微板速率法检测试剂,应用单个以甘油为溶介的酶标准品进行ALT微板速率法检测,降低了上述因素的影响.     

保证Genesis RSP高智能样本处理系统加样准确性的措施探讨

GenesisRSP高智能样本处理系统是瑞士TECAN公司制造 ,广泛适用于 96孔板、384孔微孔板、非标准微孔板、试管、试纸乃至用户自定义容器的样本处理。在使用该样本处理系统的过程中笔者深切体会到标本的正确处理、仪器参数的正确设置、加强工作人员的培训以及按时正确的仪器维护对保证加样的准确性非常重要 ,现报告如下。1　标本的正确处理从标本的采集、抗凝 (孵育 )、存放、离心直到加样的每一步都要认真仔细 ,形成一套标准化标本处理模式 ,保证标本的可靠性。1 .1　加入适量抗凝剂　抗凝血标本可以在采血后马上进行检测 ,所需时间短。要…     

赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小的选择

目的　探讨赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小选择的依据。方法　利用赖氏微板法 ,采用正交试验的方法进行优选。结果　液体总量由赖氏试管法的 6 1 0 0 μl缩小为微板法的 2 70 μl,其中样本、基质、2 ,4 二硝苯肼加液量依次为 1 0、5 0、5 0 μl,NaOH(0 .72mol/L)加液量为 1 6 0 μl,结果判断 :Cutoff =[32×Mw(B) +2 5×Mw(Q) ]/5 7。利用微板赖氏法分别检测 2 0 0 3年卫生部临检中心和上海血液中心的ALT质控品 ,准确率均为 1 0 0 %。结论　 0 .1倍试管的加液量 (除NaOH外 )是微板赖氏法的最佳缩小量 ,选择 1 0 μl丙酮酸标准品作为结果判断标准的换算公式     

双波长微孔板赖氏法测ALT含量

献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定,目前多采用赖氏试管法,费工、费时.随着血站自动化加样系统的使用,国内一些血站采用单波长微孔板赖氏法测定ALT含量,但该法检测结果受脂血、板孔差异、板底划痕等因素干扰.     

加样仪与酶标仪在梅毒TRUST法检测中的应用

梅毒是一种性传播疾病 ,根据 (血站管理办法 )规定 ,血样标本保存期应在全血有效期满后 0 .5年 ,原始记录资料保存 10年以上。然而在实际工作中 ,梅毒TRUST试验结果是无法保存的。为解决这一问题 ,笔者利用全自动加样仪及酶标仪在微孔上进行检测 ,意在寻求一种统一的判断标准 ,以减少人为因素造成的误差 ,又便于数据自动传输和微机管理 ,最终实现TRUST判断结果的标准化、自动化。材料与方法1　仪器　RSP15 0全自动加样仪、TECAN酶标仪和TITRAMAX振荡仪、SLT读数软件、96孔U型微板。2　试剂　TRUST试剂购自上海荣盛有限公司 ,…     

加样后放置时间对ALT微板速率法检测结果的影响

血液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定目前仍是采供血机构筛选献血者的项目之一。在肝炎早期，检测ALT有一定的实际意义。本中心引进全自动加样系统，采用微板速率法测定ALT，快速准确，避免了手工操作的误差。加样品后间隔不同时间进行检测，现将结果报告如下。     

微板速率法检测ALT的参数选择

目的优化微板速率法检测ALT的参数。方法采用动力学法,利用全自动加样器,结合微板、酶标仪以及局域网实现自动化检测。结果微板速率法检测ALT的标本量为50μl,基质液为200μl;RSP分配样品离孔底3mm距离同时以240μl/s速度分配,RSP吸液和分配基质液速度依次为100、220μl/s,附加体积为70μl;基质液预热温度为33℃±1℃,酶标仪测定温度设定30℃,室温控制在25℃±3℃;检测主波长340nm,参比波长无;延迟时间为120s,测定时间120-360s,每隔60s读1次板;校正因数为2100;初始吸光度值下限OD值为0.700;中值血清加液时差前后ALT相差3U/L,批内和批间变异系数依次为1.77%、3.24%,卫生部临检中心PT得分100%。结论优化参数后,实现ALT速率法自动化检测,而且加样加液不产生气泡,同时降低了加样时差、边缘效应对结果的影响以及测定温度较易控制等优点。     

微板速率法检测ALT的探讨

速率法检测ALT已在血站系统使用[1],但全自动的生化分析仪尚未普及,一般多采用微板速率法检测ALT[2],但该法尚无统一的标准,各实验室的检测结果差异较大。尽管一些实验室采用带标准品的动力学法检测,但存在标准品不易获得或标准品检测的线性不能满足实验要求等缺陷,我们采用微板标准动力学法,并结合试剂和仪器的特点,探讨了微板速率法检测ALT的各项参数,现介绍如下。1对象和方法1.1对象郑州市无偿献血标本,卫生部临检中心ALT室间质控品。1.2试剂与仪器STAR全自动加样器,瑞士H am lton公司产;HT 3温控酶标仪,奥地利产。1.3方法参考试…     

两种方法检测ALT的比较

目前，随着全自动加样系统在血站的应用，ALT的测定多采用微板速率法。但其在实验温度、反应时间和读板条件等方面所规定的实验检测状态受到手工操作的限制，不能达到全自动生化仪所具备的良好反应环境．使实验结果的重复性、特异性差，影响了检测的准确性。为寻求一个稳定可靠的批量测定ALT的检测方法，笔者尝试应用微板赖     

自动加样仪及酶标仪快速、简便检测脂肪血

脂肪血输入病人体内,轻则引起荨麻疹等过敏反应,重则发生血管神经性水肿,常常来不及抢救而造成病人窒息死亡[1].脂肪血的判定由血站检验科、血库、成分血科共同作出,由于多采用目测法判断,主观性较大,常造成血液分类管理困难以及与献血者之间的矛盾.笔者利用自动加样仪及酶标仪在微孔板上进行检测,意在寻求一种统一的判断标准,以减少人为因素造成的差别又便于数据自动传输及电脑管理,最终实现脂肪血判断的标准化、自动化. 1 材料与方法 1.1 仪器 RSP100自动加样仪,TECAN酶标仪,ROTINA平板离心机,SLT读数软件,96孔可拆圆底微板. 1.2 方法用自动加样仪在96孔圆底微板上加入100μl血浆,在平板离心机上以2000r/min离心1min 30s消除血浆微粒的影响,然后在酶标仪上以Easy-agl软件进行测定.     

厦门市无偿献血者ALT检测结果分析

丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)是临床诊断肝功能指标之一,同时也是血站基本标准中献血者健康检查的必检项目之一.目前各地血站ALT检测大多采用赖氏法,在部分引进全自动加样分析仪及恒温酶标仪的实验室,也有采用微板法检测[1],对献血者ALT检测的可行性及意义时有报道[2].本站引进自动生化分析仪用连续监测法作ALT检测,同时用赖氏法复检,笔者对2种方法检测的结果进行了分析比较.     

加样后室温停留时间对自动化检测抗-HCV的影响

目前 ,血站检验自动化仪器代替过去传统的手工操作 ,省工、安全。但仪器也有不足之处 ,当检测样品量大时 ,抗 - HCV加完样品后 ,进入仪器内的微板操作自动编排 ,需在室温仓内停留一段时间 ,然后才进入 37℃孵育仓正式开始记时 ,而实际上抗 - HCV在室温就已开始进行抗原抗体反应 ,尤其是在夏季 ,仪器做的抗 - HCV假阳性率比手工偏高。为了解决遇到的问题 ,我们通过 3个典型样品 ,探讨室温停留的时间对抗 - HCV测定结果的影响程度 ,现报告如下。1　材料和方法1 .1　材料　抗 - HCV EIA试剂盒 (北京万泰 ) ;RSP2 0 0全自动加样器 (瑞…     

BEPⅢ处理样品出现结果与加样不符问题的分析

目前,全自动酶标分析系统被越来越多地使用于血站血液标本检测中,我们把在使用过程中曾经遇到过的,因手工进板方向错误,造成比色结果与试验不符的这一问题与大家交流,希望能在以后的工作中得以借鉴。1材料与方法1.1试剂与仪器RSP全自动加样器(瑞士Tecan公司),BEPⅢ全自动酶标分     

全自动加样仪引起抗-HIV拖带阳性分析

目前 ,全国许多血站都使用微机控制的全自动加样器ML/AT进行血液标本加样 ,大大减少了劳动强度 ,避免了手工加样的人为误差 ,提高了血液检测的质量和水平。但偶尔在检测到HIV抗体强阳性标本时 ,可能会在加样、洗涤时污染到邻近标本。笔者在使用该仪器的过程中也遇到 2起共 4例标本 ,因ML/AT加样拖带而引起的抗 HIV阳性 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　仪器、软件　ML/AT plus2全自动加样仪和用户软件(瑞士 ) ;AWI自动洗板机 (奥地利 )。1.2　试剂　抗 HIV试剂 (北京金豪 ,批号 :2 0 0 1112 9;厦门新创 ,批号 :2 0 0 110 0 6 0 …     

改良速率法检测ALT的探讨

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性测定可以反映某些组织器官的病变，尤其在肝炎的窗口期及发病早期，ALT均有不同程度的增高，这对保证输血安全有重要意义。现行的赖氏法，手工加样繁琐费时，人为误差大，准确性差。笔参考国际临床化学联合会(IFCC)推荐的ALT检测的改良速率法，应用微板测定ALT活性，快速准确，值得推广。     

全自动酶免分析系统定量检测ALT的应用

手工赖氏试管法定量 AL T,首先要定期制定标准曲线 ,然后按标准曲线进行计算 ,手工计算时要减去空白管 ,费工费时。因此 ,我们利用全自动酶免分析系统 ,采用现有 Au S.L ab2 .0软件读板 ,建立了微板赖氏定量方法 ,以不同量的丙酮酸为标准 ,每次试验仪器均可自动建立标准曲线 ,然后仪器自动给出各样品的卡门单位 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　郑州市无偿献血者。1.2　试剂及厂家　 AL T赖氏法试剂盒 (上海生物制品研究所 ) ;96微孔平底板 (丹麦 Nunc公司 )。1.3　仪器及厂家　RSP2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan集团 ) ;BEP (…     

丙酮酸在微板赖氏法测定ALT酶活力中的应用

丙酮酸在丙氨酸氨基转氨酶 ( ALT)的测定中 ,主要用于绘制标准曲线 (赖氏法 )。测定 ALT的方法有速率法和赖氏法等。赖氏法又分为试管法和微板法两种 ,试管法费工、费时 ,不利于计算机对原始数据的网络化管理 ,而速率法受温度影响较大 ,为此 ,笔者在微板赖氏法中 ,利用丙酮酸为标准液 ,进行 ALT检测 ,并与试管法与速率法比较 ,现介绍如下。材料与方法1　仪器　 TECAN GENESIS RSP1 5 0全自动加样系统 (奥地利产 ) ,TECAN SPECTRA温控酶标仪 (奥地利产 ) ,Heidolph温控震荡器 (德国产 ) ,96孔微孔平底板 (天津开元公司提供 )…     

全自动加样器STAR加样编程的优化

我们根据采供血系统血液检测的特点[1],结合全自动加样器,对原有的加样程序进行了优化,在同一块微孔板上对HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP日常样本作单孔分配和再检样本的双孔分配,解决了长期以来再检标本手工加样的缺点,减少了单独检测再检标本造成的试剂浪费,且实现了条码的自     

STAR全自动加样器引起血液检测阳性拖带现象分析

随着无偿献血事业的深入发展,自动化检测程度得到了很大的提高.全自动加样器在检验科的工作中发挥着重要作用,与手工加样相比,它可以降低劳动强度,避免加样错误,但它自身也存在缺点,由于目前绝大多数单位使用的都是永久性加样针,洗针时不能彻底冲洗干净,难以避免样本的污染,容易产生阳性拖带现象.     

全自动加样器同时作ABO及RhD微板正定型的参数选择

微板法检测ABO、RhD血型改变了传统的手工操作,具有快速、自动化程度高等优点[1-3],但同时又存在部分缺点:加样器稀释每个标本血球浓度差异大以及弱凝集使Cut off设定值出现血型误判;预稀释板仅作为稀释血球使用,造成微板浪费以及检测时间延长;上机读板蓝色(抗-A)、脂血、溶血对620nm波长的干扰等问题。我们通过调整加样参数,重新筛选红细胞、抗血清浓度以及体积,采用平底板在血型微板观察仪上观察结果,取得较好效果,现报告如下。1材料与方法1.1检测对象本中心2006年5月—2007年5月的献血者样本62 700份。1.2仪器与试剂RSP全自动加样系…