全自动加样器作微板赖氏法ALT检测加样参数的选择

血站自动化检测仪器,可以自动化加样、孵育、读板,极大降低了检验者劳动强度.本站对ALT采用微板赖氏法检测,用TECAN加样,后续由 BEPⅢ孵育、加2,4-二硝基苯肼、加NaOH、读板.TECAN加血样准确,但在加ALT丙酮酸标准品(简称标准品)时,标准品OD值仪器比手工偏低.为此,笔者在TECAN加样编程上进行了一系列实验,找到了仪器最佳加样参数,手工和仪器加标准品无显著差异,现报告如下.     

两种方法检测ALT的比较

目前，随着全自动加样系统在血站的应用，ALT的测定多采用微板速率法。但其在实验温度、反应时间和读板条件等方面所规定的实验检测状态受到手工操作的限制，不能达到全自动生化仪所具备的良好反应环境．使实验结果的重复性、特异性差，影响了检测的准确性。为寻求一个稳定可靠的批量测定ALT的检测方法，笔者尝试应用微板赖     

微板速率法检测ALT的探讨

速率法检测ALT已在血站系统使用[1],但全自动的生化分析仪尚未普及,一般多采用微板速率法检测ALT[2],但该法尚无统一的标准,各实验室的检测结果差异较大。尽管一些实验室采用带标准品的动力学法检测,但存在标准品不易获得或标准品检测的线性不能满足实验要求等缺陷,我们采用微板标准动力学法,并结合试剂和仪器的特点,探讨了微板速率法检测ALT的各项参数,现介绍如下。1对象和方法1.1对象郑州市无偿献血标本,卫生部临检中心ALT室间质控品。1.2试剂与仪器STAR全自动加样器,瑞士H am lton公司产;HT 3温控酶标仪,奥地利产。1.3方法参考试…     

厦门市无偿献血者ALT检测结果分析

丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)是临床诊断肝功能指标之一,同时也是血站基本标准中献血者健康检查的必检项目之一.目前各地血站ALT检测大多采用赖氏法,在部分引进全自动加样分析仪及恒温酶标仪的实验室,也有采用微板法检测[1],对献血者ALT检测的可行性及意义时有报道[2].本站引进自动生化分析仪用连续监测法作ALT检测,同时用赖氏法复检,笔者对2种方法检测的结果进行了分析比较.     

全自动酶免分析仪用于ALT微板赖氏法检测

<中国输血技术操作规程>所规定的ALT的检测方法为:初检酮体酚法,复检赖氏法.以往试管赖氏法检测反应体积大,操作繁琐.已有不少血站将反应体积缩小若干倍采用微板法检测.大大减少了工作量,同时适应全自动加样设备的样本处理.全自动酶免分析仪有精确的温度控制系统,各组分试剂的分配精确,结果的判读较少受到外界的影响,笔者所在实验室将ALT的检测与其他检测项目进行组合同时检测,极大的方便了实验工作的安排,而且与传统的试管法及速率法检测结果一致.     

微板紫外速率法漏检高值ALT标本一例

谷丙氨基转移酶（Alanine asninotrasferase，ALT）检测是采供血机构血液必检项目之一，ALT检测作为早期肝病诊断的一项非特异性指标，有助于鉴别与输血相关肝炎病毒携带者，同时可以在一定程度上弥补某些肝炎病毒标志物未被检测及“窗口期”的缺陷，有助于预防输血相关肝炎的传播。我血站实验室采用微板为载体的方法进行血清ALT检测：微板紫外速率法为初检方法；微板丙酮酸氧化酶法为复检方法。在检测过程中一例高值ALT血样，微板紫外速率法检测结果为6．6U／L，出现假阴性结果造成漏检，现报告如下：     

两种方法测定血清ALT的比较

血清丙氨酸氨基转氨酶（ALT）的检测采用赖氏试管法，费时、操作繁琐，不适宜大批量标本的检测。随着全自动加样系统的应用以及新的《血站管理条例》的实施，本站以微孔赖氏法为初检方法，以微板丙酮酸氧化酶速率法为复检方法。笔者对2005年6月份的标本2373份进行检测，结果微孔赖氏法25卡门氏单位以上59例，阳性率为2．49％；微板丙酮酸氧化酶速率法25卡门氏单位以上52例，阳性率为2．19％。现将结果分析如下。     

赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小的选择

目的　探讨赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小选择的依据。方法　利用赖氏微板法 ,采用正交试验的方法进行优选。结果　液体总量由赖氏试管法的 6 1 0 0 μl缩小为微板法的 2 70 μl,其中样本、基质、2 ,4 二硝苯肼加液量依次为 1 0、5 0、5 0 μl,NaOH(0 .72mol/L)加液量为 1 6 0 μl,结果判断 :Cutoff =[32×Mw(B) +2 5×Mw(Q) ]/5 7。利用微板赖氏法分别检测 2 0 0 3年卫生部临检中心和上海血液中心的ALT质控品 ,准确率均为 1 0 0 %。结论　 0 .1倍试管的加液量 (除NaOH外 )是微板赖氏法的最佳缩小量 ,选择 1 0 μl丙酮酸标准品作为结果判断标准的换算公式     

ALT干式生化法在献血者初筛中的应用探讨

目的　探讨用ALT干式生化法对献血者进行初筛的可行性。方法　采用ALT梯度定值血清作为干式生化法的测定靶值 ,并分别用干式生化法与微板速率法对 114 1份无偿献血者血样进行ALT检测和比较。结果　干式生化法对ALT梯度定值血清检测 ,r=0 .9997,cv =2 .2 5 % ,114 1份标本的阳性检出率与微板速率法比较无显著性差异。结论　ALT干式生化法对全血ALT的检测具有方便、快速和准确度高的特点 ,适用于血站对无偿献血者的粗筛工作     

用丙酮酸标准品测定ALT

血清谷丙转氨酶(ALT)是献血者健康检查的项目之一,而赖氏法是血站基本标准中规定的ALT检测方法.为适应于血站检测ALT的特点,笔者沿用赖氏法的试验原理、步骤,并对结果的判定方法加以改进,即以丙酮酸作为标准品替代赖氏法标准曲线,由公式计算得出试验结果.该检测方法检测ALT,结果准确,操作简便,无需更新设备,适用于血站,现报告如下.     

1例ALT酶活性浓度过高致速率法漏检原因分析

随着检测要求的规范和提高，速率法在全国血站ALT检测中得到了较快的开展应用，目前一般血站(尤其是地市级以下血站)使用全自动带恒温孵育的酶标仪以速率法检测ALT，该法使用平底酶标板作为比色反应杯，操作简便，检测量大，结果准确，且利用了血站实验室普遍配置的酶标仪替代生化分析仪，节省了装备费用。但笔者在使用该法对献血者做ALT检测时发现了1例由于酶活力过高引起的漏检，报告如下。     

全自动酶免系统在血站微量赖氏法检测ATL中的应用

全自动酶免系统在血站血液检测中的应用日益广泛,为解决ALT检测的自动化,各血站作了不少探索,如速率法、微量赖氏法、氧化酶法,但结果均不稳定.笔者应用全自动酶免处理系统,建立了一套结果稳定的ALT检测方法.     

微板速率法与赖氏法测定ALT活性的对比分析

ALT活性检测是献血者初筛和血液复检的常规检测项目，目前已经有许多大中型血站采用微板速率法取代了赖氏法测定ALT活性，笔者对这两种方法进行比较分析，现报告如下。     

微板丙酮酸氧化酶动力学法检测献血者血清ALT应用评价

血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotrasferase ALT)检测是采供血机构献血者必查项目之一。目前检测ALT的方法不尽相同[1],笔者应用微板丙酮酸氧化酶动力学法试剂盒检测血清ALT,对其方法的线性、精密度、准确度、干扰实验等方面进行评价。并于2004年7月~2005年3月应用微板丙酮酸氧化酶动力学法检测49764名献血者的血清ALT,介绍如下。1材料与方法1.1试剂与仪器微板丙酮酸氧化酶动力学法检测ALT试剂(江西瑞华倍肯医学制剂有限公司,批号20040320);96孔微量反应板、RSP150全自动加样仪(瑞士Tecan公司);AnthosHT3酶标仪(奥地利);乳酸脱…     

采供血机构ALT的自动生化分析仪测定

采供血机构ALT检测方法不尽相同,选择一个既准确又适合要求的检测方法很有必要。笔者运用生化分析仪(速率法)检测ALT,比较了生化分析仪速率法与微板速率法,介绍如下。1材料与方法1.1材料CHEMIX-180全自动生化分析仪(日本SYS-MEX公司);Its Well检验设备控制和试验管理软件(版本2.2.2.6,烟台海深威科技有限公司);ALT酶测定试剂盒(澳斯邦生物工程有限公司,批号040802);ALT低、中、高值质控品(挪威SERO公司,批号AP3147)。1.2生化分析仪速率法在生化分析仪上全封闭检测,过程严格按试剂说明书要求进行。在检测样本的同时,分别对低、…     

微板丙酮酸氧化酶及赖氏法与速率法检测ALT的比较

ALT检测方法有酮体粉法、赖氏法、速率法、丙酮酸氧化酶法，干化学试纸条法。酮体粉法只能目测观察结果，干化学试纸条法不适合大批量自动化检测。目前，随着自动化仪器在血站的广泛应用，ALT的检测方法向微板法转变，笔者通过对微板赖氏法、速率法、丙酮酸氧化酶法检测ALT进行对比试验，为血站筛查ALT建立新的试验方法提供科学依据，现报告如下。     

微板速率法检测丙氨酸氨基转移酶的研究

目的探讨全自动酶联免疫分析系统微板速率法检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)的方法评价和临床应用。方法参照国际临床化学联合会(IFCC)的推荐方法,结合分析系统建立微板速率法,通过方法学试验,评价其线性、批内和批间重复性;比较823例体检者血清标本采用微板速率法与常规生化分析仪法检测ALT的结果,并评价方法的临床应用。结果微板速率法检测ALT,在活性303U/L以下具有良好的线性;批内和批间变异系数均小于1/5TEa,其检测结果与常规生化分析仪的相关性良好。结论全自动酶联免疫分析系统微板速率法检测ALT,为大批量标本同时检测ALT和ELISA项目提供了很好的选择,值得临床推广使用。     

全自动酶免系统在血站微量赖氏法检测ALT中的应用

全自动酶免系统在血站血液检测中的应用日益广泛，为解决ALT检测的自动化，各血站作了不少探索，如速率法、微量赖氏法、氧化酶法，但结果均不稳定。笔者应用全自动酶免处理系统，建立了一套结果稳定的ALT检测方法。     

丙氨酸氨基转移酶3种方法检验结果比较

根据献血者健康检查要求．献血者丙氨酸氨基转移酶（ALT）的合格标准．速率法为ALT≤40iU／L，赖氏法ALT≤25U。但由于传统赖氏法操作烦琐费时，因此很多血站．特别是基层血站用新的ALT检测方法（丙酮酸氧化酶法和赖氏法微板孔测定法）来测定献血者ALT。为此，我们把传统赖氏法的检测结果与丙酮酸氧化酶法和赖氏法微板孔测定法结果作了比较分析。     

佛山市南海区无偿献血者ALT不合格结果分析

丙氨酸氨基转移酶（ALT）是临床评价肝功能的指标之一，同时也是我国血站基本标准中献血者健康检查标准之一。ALT的检测方法目前在血站系统常用的方法主要有赖氏方、连续监测法、改良的微板速率法和快速干式生化法等。本站采用全自动生化分析仪，应用连续监测法做ALT的检测。针对ALT不合格及HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和梅毒抗体（TP）相关检测指标情况进行统计分析。