胶体金免疫层析法快速检测水产品中河豚毒素的研究

该文将特异性识别河豚毒素的单克隆抗体加以胶体金标记用作示踪物,建立了豚毒素的胶体金免疫层析技术快速检测方法。优化了胶体金体系的pH值、抗原抗体浓度、离子浓度、表面活性剂种类以及样品前处理方法。结果显示：在最优条件下,建立的胶体金免疫层析法对河豚毒素的定量检出限为0.5 ng/mL,线性范围为0.8～10.6 ng/mL,定性检出限（裸眼判别）为12.0 ng/mL。河豚、织纹螺等样品的加标回收率为70.5%～110%,相对标准偏差为3.7%～7.1%,检测结果与LC-MS/MS法一致。所建立的胶体金免疫层析技术在现场快速检测方面具有良好的可行性和实用性,可用于大量样品的快速筛查和河豚毒素中毒后的快速诊断。     

中性红分光光度法测定脱氧核糖核酸

研究了有机染料中性红与脱氧核糖核酸(DNA)的结合反应, 选择了实验的最佳条件: pH 5.0 的B-R缓冲溶液2.5 mL, 1.0×10-3 mol/L中性红溶液0.6 mL, 反应20 min后体系的吸光度很稳定, 在λ=530 nm处有最大吸收峰, 并且随着DNA的加入, 中性红的吸收峰显著下降. 因此以中性红为标记物, 根据其在波长530 nm处吸收峰下降的程度, 可用于定量测定DNA. 测量DNA的线性范围为0～10 μg/mL, 相关系数为0.998, 该方法具有较高的灵敏度和选择性, 已用于合成试样分析.     

表面增强拉曼光谱法快速检测西红花中5种酸性色素

建立表面增强拉曼光谱法快速检测西红花中诱惑红、日落黄、苋菜红、胭脂红、酸性橙Ⅱ5种酸性色素的方法,对于阳性样品采用液相色谱-串联质谱法确证。称取西红花样品0.1 g于15 mL离心管中,加入5 mL 50%甲醇水溶液,振荡30 min,以4 000 r/min离心10 min,用一次性吸管取出上清液于15 mL离心管中,于55℃氮吹至1 mL左右,加水至10 mL,涡旋混匀,作为样品溶液。取200μL胶体金表面增强试剂于拉曼样品池中,加入50μL凝聚剂Ⅰ（酸性色素试剂盒中试剂）混匀,再加入50μL样品溶液,混匀,于5 min内放入拉曼光谱仪检测。5种色素在西红花中的检出限：诱惑红、日落黄和苋菜红均为0.05 g/kg、胭脂红为0.5 g/kg、酸性橙Ⅱ为1 g/kg。该方法操作简单、快捷、准确,能够实现西红花中5种酸性色素的快速检测。     

荧光光度法测定饮料中的铅

对荧光光度法测定饮料中的铅进行实验研究,在3.0mol/L盐酸介质中,Pb2 与Cl-形成PbCl2-4配合物,此配合物在紫外光照射时发出蓝色荧光,应用荧光光度计检测出铅的含量.采用HNO3-HClO4混合酸体系(体积比为8:1)消化饮料样品.试验了盐酸用量、显色时间、干扰离子对铅测定的影响.该方法的检出限为9.0×10-3μg/mL,线性范围为0.3～9.0μg/mL,回收率为97.3%～100.2%.     

粮食中百草枯残留的金标免疫层析检测方法研究

采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,研究胶体金与抗体蛋白的作用过程,确定稳定标记1.0 mL胶体金需8.10μg抗体蛋白,标记体系的最佳pH值为8.5。以金标抗体为分析探针,PQ-h-OVA为竞争抗原,羊抗兔IgG为控制抗体,构建直接竞争胶体金标免疫层析检测体系(GICA)。确定膜上包被抗原的质量浓度为0.50 g/L,点样量为1.0μL/条;金标点样量:5.0μL/条;羊抗兔二抗的最佳包被质量浓度为0.11 g/L,点样量为1.0μL/条。金标试纸条的目测检出限为10μg/L,检测时间约5 min,交叉反应率小于0.10%。方法的重复性和稳定性较好,该试纸条在室温下至少可保存5个月。     

基于DNA双链取代策略免标记检测铅离子的研究

建立了一种基于DNA双链取代策略和SYBR GreenⅠ(SG)作为荧光染料插入剂进行免标记铅离子检测的荧光传感方法。SG作为一种染料分子,与单链DNA作用产生的荧光强度很弱,但可以插入双链DNA,使SG荧光强度明显增强。检测时铅离子适配体首先与其部分互补单链DNA杂交形成稳定的双链DNA结构,当溶液中存在铅离子时,铅离子与其适配体特异性结合,双链DNA的数量减少,加入SG可实现铅离子的免标记定量检测。此方法具有灵敏度高、特异性强、简便快速等优点。最低检测浓度为2 nmol/L,检出限(S/N=3)为1.6 nmol/L,实际样品检测结果良好。     

基于多孔碳固载离子液体修饰电极的叔丁基对苯二酚的检测研究

制备了多孔碳固载离子液体纳米材料修饰玻碳电极(GCE),用于抗氧化剂叔丁基对苯二酚(TBHQ)的检测研究。不同电极上的交流阻抗结果表明,经过多孔碳固载离子液体修饰后的玻碳电极阻抗显著减小。多孔碳固载离子液体修饰后电极的氧化峰电流为41.93μA,比修饰前增大约5.5倍,说明多孔碳固载离子液体可显著提高电极的导电性,促进电极表面的电子转移,提高检测灵敏度。用时间~电流曲线测得TBHQ的线性范围为1.00~120.00μg/mL,检出限为0.16μg/mL。     

卤代荧光素与西布曲明的荧光猝灭和褪色光谱及其分析应用

在弱酸性缓冲溶液中,乙基曙红(EE)、赤藓红(ET)和荧光桃红(PX)3种卤代荧光素与盐酸西布曲明(SH)形成离子缔合物,导致吸收光谱发生变化和荧光猝灭。研究了反应产物的吸收和荧光光谱特征,适宜的反应条件,据此建立了以卤代荧光素为光谱探针的灵敏、简便、快速测定SH的新方法。其中ET体系褪色反应灵敏度最高,对SH的线性范围为0.1～4.0μg/mL,检出限为0.06μg/mL;PX-SH体系的荧光猝灭法对SH的线性范围是0.2～4.6μg/mL(λex/λem=540nm/560nm),检出限为0.09μg/mL。讨论了离子缔合反应对荧光及吸收光谱的影响及卤代荧光素荧光猝灭和褪色的原因。     

荧光光谱法测定中成药中微量铅

基于二价铅离子在浓盐酸体系中所形成的PbCl42-配合物在紫外光的照射下发出蓝色荧光的原理,提出了一种测定中成药品中的微量铅的灵敏的荧光分析法。体系的荧光强度与Pb(Ⅱ)的质量浓度在0.02～2.00μg/mL范围内有良好的线性关系,检测下限为8.7×10-3μg/mL。用本法测定了中成药丸及原料药粉中的铅含量,回收率分别介于92 0%～107%和94%～101%之间。     

花菁-脱氧核糖核酸的共振光散射光谱及其分析应用

研究了一种苯并噻唑阳离子花菁与脱氧核糖核酸(DNA)作用的共振光散射光谱,在pH 6.0的六次甲基四胺-HCl缓冲介质中,痕量DNA的加入使花菁在590nm的共振光散射强度显著增强。在最佳实验条件下,增强的共振光散射强度与DNA浓度具有良好的线性关系,据此建立了一种测定DNA的共振光散射光谱法。方法的线性范围为:小牛胸腺DNA(CT DNA),0～20μg/mL,鱼精子DNA(FS DNA),0～15μg/mL;检出限分别为0.005μg/mL和0.008μg/mL。该方法已用于合成样品中DNA的测定。     

胶体金免疫层析法检测罂粟碱的研究

建立了准确、快速,简便的检测食品中罂粟碱的胶体金免疫层析技术(GICA)。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记罂粟碱(Papavarine)抗体。方法检出限为0.2μg/mL,正确检出率约为97%,特异性强,具有推广应用价值。     

高锰酸根褪色光度法测定食盐中的微量碘离子

在稀硫酸介质中，碘离子能快速、定量地还原高锰酸根，在加入碘离子前后，高锰酸钾溶液在波长525nm处的吸光度发生显著变化，且吸光度之差ΔA与加入的碘离子的浓度成正比，确定了最佳反应条件，建立了高锰酸根褪色光度法测定食盐中微量碘离子的新方法。方法的线性范围为0-20μg／mL，线性回归方程为ΔA=0．0165c 0．0041，相关系数r=0．9987，检出限为0．17μg／mL。用于食盐中微量碘离子的测定，加标回收率为91．0％～95．0％．相对标准偏差为0．35％～0．75％。     

胶体金免疫层析法测定酸奶中组胺含量及教学应用

建立了一种快速检测酸奶中组胺含量的胶体金免疫层析测定方法。将直径40nm的胶体金颗粒与组胺特异性单克隆抗体偶联制备金标抗体,研究了胶体金溶液pH、抗体用量、层析时间及抗原用量等对方法灵敏度的影响。结果显示,最佳反应条件为标记pH8.8、3.6μL抗体标记0.5 mL胶体金,层析时间7 min,抗原用量1 mg/mL,此时胶体金免疫层析方法对组胺的检测限为1.11μg/g。酸奶样品组胺含量的添加回收实验结果与仪器法吻合。将该方法用于本科实践课程"食品与发酵工业分析"的现场教学,效果良好。     

分子印迹功能介孔材料富集-火焰原子吸收光谱法测定溶液中痕量铅

以2-巯基苯骈噻唑为修饰剂,铅离子为印迹离子成功制备分子印迹功能介孔材料,并用扫描电镜(SEM)、傅里叶红外光谱对材料进行了结构表征。铅离子分子印迹功能介孔材料能很好地将Pb(II)与性质相近的二价重金属离子Cu(II),Cd(II)和Hg(II)分离,具有非常好的吸附选择性,且静态吸附容量0.64 mmol/g。利用该材料制备的分离富集柱可以很好地富集溶液中痕量铅离子,且仅用2 mL 0.5 mol/L EDTA以0.4 mL/min流速即可完全洗脱,富集倍数高达250倍。样品预富集后的火焰原子吸收光度法线性范围为0.5～1.2×104μg/L,r=0.999 2,检出限(3σ,n=11)为0.04μg/L。利用功能介孔材料分离富集水样中痕量铅离子,用火焰原子吸收法测定含量,相对标准偏差(RSD)小于等于3%(n=6),回收率在98.2%～99.1%之间。     

荧光桃红分光光度法测定微量盐酸异丙嗪

在pH 1.85的HCl-NaAc缓冲溶液中,荧光桃红与盐酸异丙嗪依靠静电引力和疏水作用力相互作用形成离子缔合物,其组成比为1∶2,最大褪色波长537 nm,表观摩尔吸光系数ε=4.07×104L.mol-1.cm-1,研究了体系的光谱特征,适宜的反应条件和影响因素,发现体系的吸光度与盐酸异丙嗪的质量浓度在0.04~3.6μg/mL范围内呈良好的线性关系,线性回归方程A=-0.04991-0.1269ρ(μg/mL),线性相关系数r=0.9998,检出限和RSD分别为0.0177μg/mL和2.2%。本法可用于药物制剂中盐酸异丙嗪含量的快速测定。     

电感耦合等离子体质谱法测定风电机组齿轮油中铅、砷、铬、镉的含量北大核心CSCD

取齿轮油样品0.300 0g,加入硝酸15mL,过氧化氢5mL及高氯酸1mL,按程序升温加热模式进行微波消解。所得消解后的溶液于180℃蒸发至近干,加水定容至20mL。采用电感耦合等离子体质谱法测定此溶液中铅、砷、铬、镉的含量,以内标法补偿基体效应。铅、砷、铬、镉的质量浓度在1.00～50.0μg·L-1范围内与其对应的信号强度呈线性关系,检出限(3S/N)依次为0.05,0.006,0.04,0.003μg·L-1。按标准加入法进行回收试验,回收率为81.3%～96.4%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.2%～4.3%。     

离子色谱法同时测定蛋白胨中氯离子、硫酸根离子、碘离子

建立离子色谱法测定蛋白胨中氯离子、硫酸根离子、碘离子3种阴离子的含量。采用氢氧化钾淋洗液发生器产生的KOH溶液为流动相,进行梯度淋洗,流量为1.0 mL/min。氯离子、硫酸根离子的质量浓度分别在0.5～200μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,碘离子的质量浓度在0.75～50μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性,线性相关系数均不小于0.999,检出限分别为0.003,0.01,0.22μg/mL。样品加标回收率为92.94%～96.59%,测定结果的相对标准偏差为2.42%～5.70%(n=9)。该方法灵敏、高效,可用于蛋白胨中氯离子、硫酸根离子、碘离子的快速准确测定。     

极谱法测定化探样品中钨钼的技术改进

针对传统极谱法测定化探样品中钨钼时操作手段繁琐问题加以改进。试样以硫酸-二苯乙醇酸-二苯胍-氯酸钠体系为混合底液,将经过碱熔融后的样品以甲基橙为指示剂,用硫酸(1+1)调酸度后,加入固定比例的混合底液,摇匀,无需定容,放置25~30min后直接测定。采用二次倒数波测定,钨峰电位在-660mV左右,钼峰电位在-30mV左右,钨钼的质量浓度在0.02~1.0μg/mL内呈线性关系,钨检出限为0.5μg/g,钼检出限为0.3μg/g。方法灵敏度高,快捷、简单,适用于大批量化探样品的测定。     

虎红-牛血清白蛋白共振光散射光谱研究及其分析应用

基于在pH3.0的BR缓冲溶液中蛋白质的加入使虎红的共振光散射信号增强,建立了一种蛋白质测定的新方法.详细地探讨了pH、染料用量、表面活性剂、离子强度、共存物质等对信号的影响.牛血清白蛋白浓度在0～4.0μg/mL范围内与体系散射强度呈线性关系,检出限为0.01718μg/mL.该方法用于合成样品中牛血清白蛋白的测定,...     

基于核酸酶的新型阻抗传感器检测纺织品中的铅

建立一种基于核酸酶的电化学阻抗传感器检测纺织品中铅含量的方法。采用金纳米粒子修饰的金电极作为基底电极,以一种新型的核酸酶17EDNAzyme体系作为铅离子的生物识别元件,构建了一种新型的电化学阻抗传感器用于高灵敏选择性检测铅离子。在最佳实验条件下,传感器对溶液中铅离子的线性检测范围为1.0μg/L~10mg/L,检出限为0.6μg/L。测定结果的相对标准偏差小于5.4%(n=6),加标回收率在93.5%~106.0%之间。采用该法对实际纺织品样品进行测试,并与国标方法测定值进行对比,实验结果表明两种方法的测定值无显著性差异。该方法操作简便,对铅离子的检测具有良好的选择性,可用于现场样品的在线、快速测定。