重组人αA/D干扰素对小鼠Meth-A肉瘤的抗肿瘤作用

本文报道了纯化的αA/D干扰素(IFNαA/D)对小鼠皮下移植肉瘤的抗肿瘤作用。证明了瘤内注射效果大于全身治疗效果,并发现注射IFNαA/D后小鼠血清中α_1-酸性糖蛋白的含量显著增加。作者将甲基胆蒽诱发的小鼠成纤维肉瘤细胞(Meth-A)0.05ml(含1×10~6个细胞)皮下接种到8周龄雌性BALB/c同系小鼠体     

HSV-1基因转移载体在荷瘤裸鼠体内的生物分布研究

目的 研究HSV-1基因转移栽体在BALB/c荷瘤裸鼠体内的生物分布.方法 BALB/c裸鼠注射人乳腺癌MCF-7细胞制备肿瘤模型,瘤体内注射1×107pfu HSV-1,每2天给药1次,共给药3次.分别于给药后24h、5d和17d采集组织脏器,采用Taqman实时荧光定量PCR法,检测不同组织脏器中HSV-1基因拷贝数.结果 成功制备裸鼠肿瘤模型.在不同时间点,肿瘤中检测到的病毒载体最多,且随着时间延长不断增加;淋巴结、背根神经节和性腺中也有较高水平的病毒载体;其他组织器官中病毒载体量较少.结论 HSV-1能为基因转移提供有效、安全的载体平台,并能用于构建溶瘤基因治疗产品.     

霍乱毒素单克隆抗体与大肠杆菌不耐热肠毒素的交叉反应

作者用纯化霍乱毒素(CT)以两种方案分别免疫纯系8～14周龄BALB/c雄性或雌性小鼠:(1)首先用1μg CT静脉注射,然后每次间隔2周,用2、5、5、5和10μgCT注射,再隔3周,用5μg CT连续2天作静脉加强免疫。2天后杀鼠取脾,制备脾细胞悬液;(2)首先腹腔内注射CT 2μg(含于0.5ml弗氏完全佐剂中),3周后,腹腔注射     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对人甲状腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制的研究#br#

目的　观察去甲基化制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法　将人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞接种于16只BALB/c雌性裸鼠右前肢腋下。移植瘤模型建立后,用随机数字表法将裸鼠分为2组,实验组按照1 μg/g腹腔注射5-Aza-CdR 200 μL,每2 d给药1次,给药4周。对照组腹腔注射等体积生理盐水。末次给药后处死荷瘤鼠,观察2组裸鼠移植瘤的生长情况,HE染色观察移植瘤的病理形态学改变,采用甲基化特异性PCR检测死亡相关蛋白激酶（DAPK）基因甲基化程度,采用免疫组化染色与Western blot检测DAPK和DNA甲基转移酶（DNMTs）的蛋白表达水平。结果　经药物干预4周后,实验组移植瘤体积和质量均较对照组明显减少（P＜0.05）,相比对照组,实验组抑瘤率为45.38%。HE染色结果显示,实验组肿瘤细胞数量减少,部分区域肿瘤细胞核淡染、缩小,局部出现核固缩、核溶解。实验组DAPK基因甲基化程度低于对照组。免疫组化染色和Western blot结果显示,实验组DAPK蛋白表达量明显高于对照组,DNMT1、DNMT3A蛋白表达量低于对照组,差异有统计学意义（均P＜0.05）,2组DNMT3B的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　5-Aza-CdR可通过调节裸鼠移植瘤内DNMTs来提高DAPK的表达,从而抑制甲状腺乳头状癌生长。     

以rCTB为佐剂与rHBsAg共同鼻内接种的粘膜免疫

重组霍乱毒素 B亚单位 ( r CTB)由p NU2 1 2 - CTB转化短芽孢杆菌经 30℃培养5天 ,亲和层析法纯化所得 ;而重组 HBs Ag( r HBs)由酵母表达 (属 adr型 )。取 7周龄雌性 BALB/ c小鼠 ,分为 4个组 (每组 5或 6只 ) ,在第 0、1 4、2 1、2 8天分别用 1μg r HBs、1 μg r HBs+ 1 0 μg r CTB、 5μg r HBs及 5μgr HBs+ 1 0 μg r CTB鼻内免疫 ,第 35天处死。另取 5只未免疫的 BALB/ c小鼠作为对照。每次免疫及处死前收集各组小鼠的肺部、鼻腔、小肠、大肠灌洗液、唾液、阴道分泌物及血清标本 ,用 EL ISA法测定抗 - HBs。　　…     

环孢菌素对再生障碍性贫血细胞因子的影响

目的 探讨环孢菌素对再生障碍性贫血患者细胞因子的影响.方法 选取我院门诊及住院的再生障碍性贫血患者15例(病例组),给予环孢菌素治疗[环孢菌素5 mg/(kg·d)分3次服用].采用酶联免疫吸附试验法检测血清白细胞介素(IL)-2、IL-2受体、IL-3、干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,观察环孢菌素治疗前后各细胞因子水平的变化.结果 再生障碍性贫血患者造血负调控因子IL-2、IFN-γ、TNF-α水平明显高于正常组[(55±25) μg/L比(32±7)μg/L,(28±11) μg/L比(18±5)μg/L,(40±12)μg/L比(28±10) μg/L,均P＜0.05],正调控因子IL-3水平明显低于正常组[(19±6) μg/L比(24±6)μgL,P＜0.05];环孢菌素治疗后IL-2[(37±11) μg/L]、IFN-γ[( 19 ±7) μg/L]、TNF-α[ (34±11) μg/L]水平较治疗前明显下降(P＜0.05),IL-3水平[(25±7)μg/L]明显上升(P＜0.05).结论 环孢菌素能调控造血因子释放,降低造血负调控因子IL-2、IFN-γ、TNF-α水平,升高造血正调控因子IL-3水平,促进造血功能改善和恢复.     

金刚烷酰胺二肽在家兔及小鼠中是有效免疫佐剂

金刚烷酰胺二肽 (Ad DP)是胞壁酰二肽与金刚胺的共价结合物。为评估其作为佐剂的潜力 ,作者以卵白蛋白 (OVA)作为免疫原 ,分别以 Ad DP及 Cp G寡核苷酸 (ODN-Cp G)为佐剂免疫 8周龄雌性 BALB/ c小鼠及体重 3kg的雄性新西兰兔。实验小鼠被分成 3组 :A组 (10只 /组 )为对照组 ,分别于 0、14及 2 1天口服或腹腔注射 5 0 μg OVA;B组又分成 7个亚组 (10只 /亚组 ) ,分别于 3、14和 2 1天口服或腹腔注射 5 0μg OVA+不同量 (1、3、10、30、10 0、30 0、10 0 0 μg) Ad DP;C组 (10只 /组 )口服 5 0 μg OVA+10 0 μg ODN-Cp G。分…     

已烯雌酚对雌性BALB/c小鼠脾细胞凋亡影响的动态观察

目的了解新生期注射己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对雌性BALB/c小鼠生后不同时期脾细胞凋亡及Bcl-2、Bax的影响。方法新生雌性BALB/c小鼠,在生后24h内颈背部皮下注射DES40μg,每隔24h注射一次,共连续5次,对照组平行注射等量无菌豆油。分别在生后7、14、21、35和49d将小鼠处死,取其脾进行常规石蜡包埋和切片,进行TUNEL(TdT-mediated dUTP nick endlabeling,)检测以及Bcl-2、Bax的免疫组织化学检测。结果与对照组相比,DES组雌性BALB/c小鼠脾细胞的TUNEL阳性细胞数目在生后各点均有显著性增加。Bcl-2在各时间点DES组的表达均弱于相应的对照组。Bax在生后7d的对照组和DES组中的表达差异无统计学意义,而在生后14、21、35和49d DES组的阳性表达明显多于对照组。结论新生期注射DES可以导致雌性BALB/c小鼠脾细胞凋亡明显增加。细胞凋亡在对照组和DES组不同时间点的动态变化以及在两组间相同时间点的差异可能与Bcl-2表达的减少以及Bax表达的增加有关。     

小鼠对C群脑膜炎球菌荚膜多糖-胸腺依赖性类毒素结合菌苗的免疫应答

作者选用4周龄雌性BALB/c、A/He、B6、DBA/2小鼠于10～12周龄时首次腹腔注射10μg C群脑膜炎球菌荚膜多糖（MCPS）或MCPS-破伤风类毒素（TT）,初免后2和4周分别眼眶穿刺采血,于末次采血后4周进行第2次免疫,1周及3周后收集血样。将12～16周龄的BALB/c小鼠脾细胞用抗T细胞抗体及家兔补体处理除去T细     

卡介苗DNA抗肿瘤免疫的实验研究

目的探讨卡介苗DNA抗肿瘤免疫的效果及其免疫机制。方法纯化提取卡介苗菌DNA,建立荷瘤裸鼠模型,将24只荷瘤裸鼠随机分为3组,每组8只。于接种A549细胞株后第15d,分别腹腔注射TES液、BCG液、DNA液各0-3ml,隔2d1次,共8次。结果DNA、BCG可抑制肿瘤生长,DNA增强NK／Mφ杀伤活性,提高荷瘤裸鼠血清IFN—γ和TNF—α水平。结论DNA与卡介苗都具有抗肿瘤免疫效果,DNA比卡介苗抗肿瘤效果更强。     

两种法莫替丁胶囊在人体内的药代动力学与生物等效性研究

目的 :研究不同厂家生产的两种法莫替丁胶囊在健康志愿者体内的药代动力学 ,并评价这两种制剂的生物等效性。方法 :20例健康成年男性志愿者随机单次口服40mg法莫替丁胶囊后 ,采用固相萃取反相高效液相色谱法测定血浆中法莫替丁的浓度。结果 :参比制剂与受试制剂的主要药代动力学参数Cmax 分别为 (189 9±72 1) μg/L、(170 1±59 6) μg/L ;Tmax 分别为 (2 5±0 8)h、(2 1±0 8)h ;T1/2 分别为 (4 1±0 9)h、(3 8±0 8)h ;AUC0～t 分别为 (1031 7±316 7) μg/(L·h)、(1019 4±290 5) μg/(L·h) ;AUC0→∞分别为 (1123 9±346 0) μg/ (L·h)、(1103 4±312 0) μg/ (L·h) ;受试制剂相对于参比制剂的人体生物利用度为(101 6±22 6) %。结论 :受试制剂与参比制剂生物等效。     

刀豆蛋白A诱导急性肝损伤的模型建立

目的 建立刀豆蛋白A诱导急性肝损伤模型.方法 BLAB/c鼠69只,随机分为5组.A组尾静脉穿刺注射刀豆蛋白A 15 mg/kg,B、C、D组在尾静脉穿刺注射刀豆蛋白A前30 min分别注射肿瘤坏死因子α(TNF-α)和(或)γ干扰素(IFN-γ)抗体20 μg/只,E组注射等量生理盐水.分别在第4、8、12小时,采眼眶血,ELISA法检测TNF-α,IFN-γ,并留取肝组织行HE染色计算炎症活动度;取第12小时的肝组织行Western blot测定白细胞介素18(IL-18).结果 各组实验结束时非正常死亡数:A组6只,B组2只,C组3只,D组1只,E组0只.HE染色显示A组第4小时时可见大块坏死,碎屑样坏死等病变,B、C、D组炎症和坏死明显减轻(P<0.05).A组TNF-α、IFN-γ明显增高,而B、C、D组表达下降.A组IL-18呈强阳性.结论 刀豆蛋白A成功诱导了急性肝损伤模型,模型的形成与TNF-α、IFN-γ和IL-18有关,TNF-α、IFN-γ抗体可以阻断模型的建立.     

髓核组织TNFα、IL-6与腰椎间盘突出症的相关性检测及其意义

目的 :通过检测髓核组织中TNFα、IL - 6基因水平 ,探讨该类细胞因子在椎间盘退变中的作用。方法 :用ELISA法对 2 0例腰椎间盘突出症患者髓核组织中TNFα、IL - 6进行检测 ,并取 10例健康成人 (尸体 )正常腰椎间盘对照。结果 :突出腰椎间盘TNFα含量为 0 .347± 0 .0 96 μg/ml,正常腰椎间盘TNFα含量为 0 .0 86±0 .0 19μg/ml,两者有显著性差异 (P <0 .0 1)。突出腰椎间盘IL - 6含量为 0 .16 7± 0 .10 1μg/ml,明显高于正常腰椎间盘 (0 .0 5 5± 0 .0 2 2 μg/ml) ,两者有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :突出腰椎间盘产生这两种细胞因子 ,它们可能在椎间盘退变中发挥作用     

结合电穿孔术的肌肉DNA免疫可增强抗结核杆菌抗原的细胞及体液免疫应答

6组 B6 D2小鼠分别注射 1 0 0 μg、1 0 μg或 1μg插入了编码结核杆菌抗原 85B序列( ag85b)的 v1 Jns- tp A质粒或插入了编码牛分枝杆菌抗原 MPB70序列 ( mpb70 )的pc DNA3质粒 ,每个剂量注射两组小鼠 ,其中一组在 DNA注射时结合电穿孔术 ,另一组则不采用电穿孔术。对照小鼠注射盐水并结合电穿孔术。在注射 DNA后 4和 8周分别取小鼠血清 ,用 ELISA法检测其亚类抗体水平。　　取 6只 BALB/c小鼠注射 1 2 0μg插入了编码结核杆菌抗原 85A序列 ( ag85a)的VR1 0 2 0质粒 ,其中 3只结合电穿孔术。同样取 6只小鼠注射 1 0 0 μg编码…     

玉郎伞多糖对体外BALB/C小鼠淋巴细胞和巨噬细胞分泌细胞因子的影响

目的:探讨玉郎伞多糖（YLSPS）体外对BALB/C小鼠淋巴细胞、巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-γ）及白细胞介素-2（IL-2）的影响及作用机制。方法:分离BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞,分为空白对照组、LPS或ConA对照组和各浓度YLSPS组(50,100,200 mg·L^-1),MTT法检测脾淋巴细胞增殖,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的浓度,RT-PCR法检测TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2 mRNA的表达。结果:各浓度YLSPS组能剂量依赖性地促进BALB/C小鼠脾淋巴细胞增殖和TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的分泌,显著增强这些细胞因子的mRNA的表达（P<0.01或P<0.05）。结论:YLSPS体外能促进BALB/C小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞分泌IFN-γ、IL-2、TNF-α和IL-6,其作用机制可能与上调上述细胞因子mRNA表达有关。     

破伤风疫苗在BALB/c与NIH小鼠中的免疫效果比较

目的 对比破伤风疫苗在BALB/c与NIH小鼠中的免疫效果,探讨将BALB/c小鼠用于破伤风疫苗效力实验的可能。方法 将破伤风毒素系列稀释至适当的浓度范围,根据小鼠存活情况摸索合适的毒素浓度,重复实验,测定BALB/c和NIH小鼠的破伤风毒素半数致死量（median lethal dose,LD₅₀）。分别用BALB/c和NIH小鼠的破伤风毒素2 LD₅₀同时攻击BALB/c与NIH小鼠,考察BALB/c和NIH小鼠对破伤风毒素的敏感性。将破伤风疫苗稀释50、100、200倍,分别作为高剂量组、中剂量组、低剂量组免疫BALB/c和NIH小鼠,免疫4周后用50 LD₅₀破伤风毒素攻毒,观察小鼠死亡情况。结果   BALB/c小鼠的破伤风毒素2 LD₅₀为0.16 μg/ml;NIH小鼠的破伤风毒素2 LD₅₀为0.23 μg/ml。用0.16 μg/ml的破伤风毒素分别注射BALB/c和NIH小鼠各3组,每组6只,BALB/c小鼠死亡动物数为3、3、2,NIH小鼠死亡动物数为0、0、0。用0.23 μg/ml的破伤风毒素分别注射BALB/c和NIH小鼠各3组,每组6只,BALB/c小鼠死亡动物数为6、6、6,NIH小鼠死亡动物数为3、2、3。3批破伤风疫苗免疫后的BALB/c与NIH小鼠采用相同攻毒剂量,每组14只,BALB/c小鼠攻毒后,高剂量组存活数为13、14、14,中剂量组存活数为10、10、9,低剂量组存活数为4、3、4;NIH小鼠攻毒后,高剂量组存活数为10、10、10,中剂量组存活数为6、7、6,低剂量组存活数为0、0、1。结论   BALB/c小鼠比NIH小鼠对破伤风毒素具有更高的敏感性,能更好地对破伤风疫苗产生免疫应答,在破伤风疫苗效价测定实验中是一种较为理想的小鼠品系。     

亲脂性季铵盐可作为粘膜佐剂与疫苗抗原共同鼻腔接种

疫苗的鼻腔接种方法的优点明显多于传统的肌肉接种方法 ,包括接种方便及可诱导机体产生粘膜免疫。作者以新型粘膜佐剂——二甲基双十八基季铵溴化物 (DDA)为鼻腔佐剂 ,研究了鼻内接种 DDA与白喉类毒素 (DT)、破伤风类毒素 (TT)或呼吸道合胞病毒 (RSV) G蛋白重组片段 BBG2 Na的混合物所诱导的全身和局部免疫应答。　　作者将 6～ 9周龄无特定病原体雌性BALB/c小鼠和 7周龄雌性棉鼠各自分成 1 0组 ,分别于 0、1 0、2 0天 (BALB/c鼠 )及 0、1 0、2 0、3 0天 (棉鼠 )鼻内接种磷酸盐缓冲盐水(PBS、2 0μl)、BBG2 Na(2 0μg)、TT(1 …     

OK-432肿瘤疫苗对DBA/2小鼠脾脏细胞中Th1细胞因子以及TNF-α分泌的影响

目的利用DBA/2小鼠移植舌癌荷瘤模型,探讨OK-432肿瘤疫苗对DBA/2小鼠脾脏细胞中Th1细胞因子以及TNF-α分泌的影响。方法 ELISA定量检测脾脏淋巴细胞所产生的IFN-γ,IL-2,TNF-α等细胞因子的分泌水平。结果 OK-432肿瘤疫苗组中IFN-γ、IL-2以及TNF-α的含量明显高于实验对照组(P<0.05)。结论 OK-432肿瘤疫苗可刺激荷瘤小鼠脾脏细胞Th1细胞及TNF-α的分泌,增强DBA/2小鼠的抗肿瘤免疫功能。     

抗HBsAg单克隆抗体的制备

纯HBsAg由adw2亚型和ayw4亚型的阳性血浆经氯化铯处理超离心而制成。用两种亚型HBsAg混合物30μg加FCA给3月龄的BALB/c雌性小鼠皮下注射3次,每次间     

紫草多糖对S180荷瘤小鼠免疫器官及细胞因子TNF-α和IFN-γ的影响

目的:探讨紫草多糖具有抗肿瘤作用。方法:通过对小鼠腋下移植实体肉瘤S180进行体内抗肿瘤药效学实验;采用ELISA法检测荷瘤小鼠血清中细胞因子TNF-α和IFN-γ含量的影响。结果:各剂量组紫草多糖均表现出一定的抑瘤作用,能够抑制S180实体瘤的生长;ZCP能明显诱导荷瘤小鼠体内TNF-α和IFN-γ的生成。结论:紫草多糖具有抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用主要是通过调节机体免疫功能来实现的。