糖尿病患者基因组Mfn2启动子区PGC-lα及ERRα顺式作用元件的多态性分析

目的 筛查2型糖尿病(T2DM)患者基因组线粒体融合蛋白2(Mfn2)启动子区过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(PGC-1α)及雌激素相关受体(ERRα)顺式作用元件的多态性.方法 采用PCR-SSCP技术结合DNA测序技术.结果 Mfn2启动子区PGC-1α及ERRα顺式作用元件处未发现多态性位点.结论 T2DM患者PGC-1α调控的Mfn2表达下降,可能通过某些生理机制,而非遗传机制.     

血清PGC-1α、A1AT水平与2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病发病的关系

目的 探讨血清过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂-1α(PGC-1α)、α1-抗胰蛋白酶（A1AT）水平与2型糖尿病（T2DM）合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病的关系。方法 选取T2DM患者184例（T2DM组）,另选取同期60名体检健康志愿者（对照组）,根据是否合并NAFLD将T2DM患者分为NAFLD组（95例）和非NAFLD组（89例）。采用酶联免疫吸附法检测血清PGC-1α、A1AT水平。多因素Logistic回归分析影响T2DM合并NAFLD的因素,受试者工作特征曲线分析血清PGC-1α、A1AT水平对T2DM合并NAFLD的预测价值。结果 与对照组比较,T2DM组血清PGC-1α、A1AT水平降低（P均<0.05）。与非NAFLD组比较,NAFLD组血清PGC-1α、A1AT水平降低（P均<0.05）。体质量指数增加、T2DM病程延长、高血压和总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、谷草转氨酶、谷丙转氨酶升高为T2DM合并NAFLD的独立危险因素,高密度脂蛋白胆固醇、PGC-1α、A1AT升高为独立保护因素（P均<0.05）。血清PGC-1α、A...     

2型糖尿病PGC-1α基因单核苷酸多态性筛查及Gly482Ser变异分析

对120例T2DM和106例NGT研究对象，筛查其PGC-1α基因的单核苷酸多态性（SNP）时应用PCR-SSCP和DNA测序法。发现了4种SNP，即394Thr→Thr，482G1y→Ser，528Thr→Thr，612Thr→Met。其中，PGC-1α基因的482Gly→Ser多态性相关于T2DM的发生。     

肝脂酶基因启动子-514C／T多态性与糖尿病慢性肾脏疾病的相关性研究

目的探讨肝脂酶（HL）基因启动子区-514C／T多态性与糖尿病慢性肾脏疾病（CKD）的相关性。方法纳入T2DM患者（T2DM组）164例,根据UAlb水平再分为CKD亚组（CKD,n=108）和无CKD亚组（CKD0,n=56）;另选健康对照者（NC组）91名。运用限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术对各组HL基因启动子区-514C／T多态性进行检测,并比较各组间基因型和等位基因频率及相关资料。结果（1）CKD亚组C／T＋T／T基因型和T等位基因频率高于CKD0亚组（P〈0．05）;（2）NC组与T2DM组间基因型和等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05）;（3）T2DM组中C／T＋T／T基因型患者TG水平高于C／C基因型患者（P〈0．05）;（4）Logistic回归分析表明,HL基因启动子区514C／T基因多态性与CKD相关。结论HL基因启动子区=514T等位基因可能是CKD发生的遗传易感因素。     

能量代谢与疾病的关键调控因子PGC-1α（下）

2．PGC-1α在骨骼肌中的生物学功能 （1）调控适应性产热和刺激线粒体的生物合成 如前所述，骨骼肌也是适应性产热的主要场所。大型哺乳动物几乎没有BAT，适应性产热主要发生在骨骼肌中。骨骼肌同样含有丰富的线粒体，氧化代谢活跃。和在BAT中的作用一样，PGC-1α在骨骼肌中也受寒冷、饥饿等环境刺激，通过肾上腺素能调节作用调控适应性产热（图3），同时，PGC-1α通过上调ERRα来刺激NRF-1、NFR-2及ERRa自身的表达，导致核编码的线粒体基因表达上调，从而刺激线粒体的生物合成（图5）。     

脂联素基因启动子区-11377 C/G多态性与2型糖尿病及糖尿病肾病的关系

目的探讨桂北地区汉族人群脂联素基因启动子区-11377 C/G单核苷酸多态性各基因型及等位基因频率分布,分析其与2型糖尿病（T2DM）及糖尿病肾病（DN）的关系。方法采用PCR-RFLP技术检测100例健康对照者及232例T2DM患者（其中DN 105例）的脂联素基因-11377 C/G位点基因型及等位基因频率分布。结果 T2DM患者脂联素基因启动子区-11377的GG基因型频率和G等位基因频率高于健康对照者（P〈0.05,Or=1.625,95%CI 1.05～2.51）;脂联素基因启动子区-11377基因型及等位基因频率分布在T2DM、DN患者间无统计学意义;T2DM患者CG＋GG基因型BMI高于CC基因型（P〈0.05）。结论脂联素基因启动子区-11377 C/G与桂北地区汉族人群T2DM发病有相关性,G等位基因可能是T2DM发病的遗传易感基因。     

中国汉族人群PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性与冠心病的关系

目的本研究探讨过氧化物酶增殖激活物受体辅助激活因子1α（peroxisome prolifemtor-activatedreeeptor γ coactivator-1,PGC-1α）基因rs3774923单核苷酸多态性与中国汉族人群冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）发病的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法对675例冠心病患者和636例对照组患者进行检验,分析PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性的基因型和等位基因频率的分布情况。结果PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性三种基因型（GG型,GA和AA型）在冠心病组的分布频率分别为60．0％,30．2％和9．8％,在对照组分别为58．2％,35．2％和6．4％,两组PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性的基因型比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。PGC-1α基因rs3774923单核苷酸等位基因（G等位基因,A等位基因）分布频率在冠心病组为75．1％和24．9％,在对照组为75．9％和24．1％,两组PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性的等位基因频率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。Logistic回归分析校正性别、年龄、体质量指数、吸烟、原发性高血压、高脂血症、糖尿病等冠心病的易患因素后,PGC—1α基因rs3774923单核苷酸多态性与冠心病的发病不存在相关关系（P〉0．01）。结论PGC-1基因rs3774923单核苷酸多态性与冠心病的发病不存在相关关系。     

内脂素基因启动子-1535C／T多态性与中国人2型糖尿病的关系

目的探讨内脂素基因启动子-1535C／T多态性与中国人2型糖尿病（T2DM）的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测153例初诊T2DM患者（T2DM组）和162例糖耐量正常者的内脂素基因启动子-1535C／T多态性,分析该基因多态性与腰围、BMI、血浆内脂素、血糖、血脂代谢指标的相关性。结果两组内脂素基因型分布及等位基因频率比较无统计学差异（P〉0．05）;与TC、CC基因型患者比较,T2DM组TT基因型患者餐后2h血糖升高、HDL—C降低（P分别为0．04、0．01）。结论内脂素基因启动子-1535C／T多态性与中国人T2DM、脂代谢有相关性。     

血管紧张素Ⅱ1型和α1肾上腺素能受体抗体对预测老年2型糖尿病合并冠心病患者死亡危险性分析

目的 探讨血清抗血管紧张素Ⅱ 1型和α1肾上腺素能受体抗体与老年T2DM合并冠心病（CAD）患者死亡危险性的关系. 方法 选取老年T2DM患者234例,根据是否合并CAD平均分为T2DM合并冠心病（T2DM＋CAD）组和单纯糖尿病（T2DM）组,进行追踪研究3～11年.以合成的α1R和AT1R多肽片段为抗原,应用酶联免疫吸附法检测上述患者血清中抗α1R和AT1R自身抗体. 结果 （1） T2DM＋CAD组AT1R和α1R抗体阳性率高于T2DM组（48.7％ vs 20.5％,36.8％vs21.4％,P＜0.01）；（2）T2DM＋CAD组抗α1R和AT1R抗体受体阳性组死亡率高于受体抗体阴性组（47.4％vs10.0％,P＜0.01）；（3）α1R和AT1R抗体阳性组（指同一个体α1R和AT1R均阳性）死亡率高于单抗体阳性组（指同一个体仅α1R或AT1R阳性）（37.2％ vs 11.6％ vs 12.3％,P＜0.01）. 结论 α1R和AT1R抗体阳性与老年T2DM合并CAD患者死亡的危险性增高有关,双抗体阳性是老年T2DM合并CAD患者死亡的危险因素.     

过氧化物酶体增殖物辅助激活因子1 α基因多态性对糖异生基因转录的影响

目的 研究过氧化物酶体增殖物辅助激活因子1α（PGC-1α）基因482号密码子甘氨酸-丝氨酸突变（Gly482Ser）多态性对糖异生关键基因磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶（PEPCK）转录的影响.方法 （1）应用寡核苷酸诱导的定点突变和PCR技术构建PGC-1α 1444位点基因多态性表达质粒,并用普通PCR和酶切方法构建连接荧光素酶报告基因的人PEPCK启动子报告质粒PGL3-hPCK-luc.分别将PGC-1α基因482号密码子为甘氨酸的野生型表达质粒pcDNA3.1-PGC-1α（G）或482号密码子为丝氨酸的突变型表达质粒pcDNA3.1-PGC-1α（S）,与转录因子肝细胞核因子4α（HNF4α）表达质粒pcDNA3.0-HNF4α共转染进培养的人肝癌细胞及人正常肝细胞株.（2）转染48 h后检测细胞株内PGC-1α及PEPCK的mRNA水平及蛋白水平.进一步按不同组合联合转染PGL3-hPCK-luc及内参质粒PRL-SV40,培养48 h后用双荧光素酶检测试剂盒检测细胞荧光素酶的相对活性.多组间比较用单因素方差分析,2组组间比较用独立样本t检验.结果 成功构建PGC-1α 1444位点突变质粒及PGL3-hPCK-luc荧光素酶报告质粒.瞬时转染进HepG2细胞中,PGC-1α（G）与PGC-1α（S）质粒转染组PGC-1α mRNA及蛋白表达水平均明显增加,但2组间无明显差异（P＞0.05）;联合转染PGC-1α和HNF4α组的PEPCK的mRNA及蛋白表达水平较单转染PGC-1α明显增高（分别为10.40±0.70、4.50±0.50和0.86±0.18、0.99±0.09,均P＜0.05）;转染PGC-1α（G）＋HNF4α组较PGC-1α（S）＋HNF4α组PEPCK的mRNA及蛋白表达水平分别增高1.83倍和1.4倍（分别为10.40±0.70、5.35±0.23和4.50±0.50、3.00±0.40,均P＜0.05）.转染PGC-1α＋HNF4α组可显著促进PEPCK启动子活性（与单转染PGL3-hPCK-luc组比较）（分别为28.0±5.0和2.4±0.4,F=23.41,P＜0.05）;在HepG2中联合转染HNF4α时,PGC-1α（G）组较PGC-1α（S）可使PEPCK启动子相对活性增高2倍（分别为83±10和41±5,F=23.41,P＜0.001）;在L02细胞中联合转染HNF4α时,PGC-1α（G）组较PGC-1α（S）可使PEPCK启动子相对活性增高2.25倍（分别为28.0±5.0和12.6±1.5,F=60.75,P＜0.001）.结论PGC-1α可辅助激活HNF4α对PEPCK转录的促进作用,而PGC-1α基因Gly482 较Ser482对HNF4α的蛋白辅助激活作用更强,这可能为基因多态性引起蛋白表达后不同构型影响蛋白-蛋白相互作用有关.     

糖尿病伴轻度认知功能障碍与 ApoE、TNF-α基因多态性的关系

目的：探讨2型糖尿病（T2DM）伴轻度认知功能障碍（MCI）与载脂蛋白E（ApoE）、TNF-α基因多态性的关系及其危险因素分析。方法选择T2DM合并MCI患者40例（MCI组）,T2DM认知功能正常患者80例（NMCI组）,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法检测ApoE及TNF-α-308 A／G的基因多态性;依据病程、血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、体质量指数（BMI）等临床资料,进行非条件Logistic回归分析T2DM合并MCI的独立危险因素。结果 MCI组ApoEε4、TNF-α2等位基因频率均高于NMCI组（P均＜0．01）。非条件Logistic回归分析显示,糖尿病视网膜病变、周围神经病变、HbA1c、餐后2 h血糖、年龄、病程、ApoE基因、TNF-α2基因为其独立危险因素。结论 T2 DM合并MCI患者ApoEε4、TNF-α2等位基因频率明显升高,且为其独立危险因素。     

雌激素受体相关受体α在胃腺癌中表达及意义

目的探讨雌激素受体相关受体（ERR）α在胃腺癌发生、发展中的作用以及临床应用价值。方法采用免疫组化法检测84例胃腺癌组织中ERRα的表达,评估其与临床病理参数之间的关系。结果胃腺癌中ERRα阳性率（69.05%）高于对照组（10.00%）;胃腺癌组中,ERRα阳性率与胃腺癌分化程度、临床分期、淋巴结转移有关。ERRα阳性表达组3 a生存率明显低于ERRα阴性表达组。结论ERRα可作为判断胃腺癌患者病情进展的指标。     

CD14启动子-260位点基因多态性对糖尿病肾病的影响

目的探讨CD14启动子-260位点基因多态性对糖尿病肾病（DN）的影响。方法应用PCR直接测序法对437例2型糖尿病（T2DM）患者（T2DM组）及145例正常者（对照组）的CD14启动子C-260T基因多态性进行分析。结果两组CD14启动子-260位点基因型分布及等位基因频率均无统计学差异（P〉0．05）;非DN与DN患者比较,其CD14启动子-260位点CC基因与CT＋TT基因有统计学差异（P〈0．05）。结论CD14启动子-260C／T基因多态性与糖尿病发病无相关性,但其CC基因是T2DM患者进展为DN的遗传学风险因素。     

NET-1、ERRα在胃癌中的相关性及意义

目的研究胃癌组织中NET-1和雌激素受体相关受体（ERRα）表达相关性及意义。方法应用免疫组化法检测72例胃癌组织中NET-1和ERRα的表达，对两指标均阳性病例行免疫组化双标双染，原位检测两指标的表达特点和比邻关系。结果胃癌组织中NET-1和ERRα两指标阳性表达呈正相关；两指标高表达分别与癌分化呈负相关、与癌临床分期呈正相关；NET-1表达与癌淋巴结转移呈正相关；ERRα与患者生存率呈负相关。结论NET-1、ERRα是判断胃癌预后的有价值的标记物。     

PGC-1α与胰岛素抵抗

过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1 α）,是一种核转录共激活因子,它与不同的转录因子结合发挥不同的功能。PGC-1 α在胰岛素抵抗和2型糖尿病人群的表达下降。环境和遗传因素均可影响PGC-1 α的表达,高脂使PGC-1 α表达下降,降低胰岛素敏感性,而运动可增加PGC-1 α表达,改善胰岛素抵抗。PGC-1 α的基因多态性与胰岛素抵抗、2型糖尿病密切相关。     

PAI-1启动子区4G/5G多态性和PAI-1抗原含量与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的 观察PAI-1启动子区4G/5G多态性与PAI-1抗原含量在不同人群中的差异,探讨糖尿病肾病（ DN）的发病机制及危险因素.方法 检测2型糖尿病（T2DM）患者、DN患者、健康者血浆PA I-1抗原水平和 PAI-1基因多态性、HbA1C、FBG、血脂、UAER水平.结果 （1）T2DM患者血浆PAI-1抗原含量、HbA1C、TG 水平明显升高,以DN患者升高最显著 ,与其他各组比较有统计学意义（P＜0.05）.（2）PAI-1基因启动区4G/5G多态性可影响血浆PAI-1抗原水平,4G纯合子的血浆PAI-1抗原水平显著高于5G纯合子,差异显著（ P＜0.05）.（3）DN患者4G等位基因频率和4G/4G基因型频率显著增高（P＜0.05） .[ HT6H〗结论 （1） PAI-1基因启动区4G/5G多态性可影响血浆PAI-1抗原水平及TG 水平. （2）DN患者血浆PAI-1抗原含量、TG水平明显升高,HbA1c、TG、PAI-1抗原含量与早期DN的发生有关,属DN的独立危险因素.（3） 中国北方汉族人中T2DM PAI -1基因启动子区4G纯合子携带者发生DN的危险性增加.     

糖尿病肾病患者抗血管紧张素Ⅱ的1型受体和肾上腺素能α1受体自身抗体改变的观察

目的探讨2型糖尿病（T2DM）抗血管紧张素Ⅱ的1型受体（AT1）和肾上腺素能α1（Adr-α1）受体自身抗体与肾功能不全的关系。方法以合成的AT1和Adr-α1受体多肽片段为抗原，应用ELISA技术，检测糖尿病肾病（DN）79例，T2DM52例，40例正常人血清中抗AT1和Adr-α1受体自身抗体。结果DN组AT1和Adr-α1受体自身抗体阳性率分别为45．6％和32．9％，明显高于T2DM组的13．5％和9．6％及正常对照组的10．0％、12．5％，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论抗G蛋白偶联AT1和Adr-α1受体自身抗体可能与DN的发病有关。     

内脏脂肪素基因多态性与宁夏回、汉族2型糖尿病患者的相关性研究

目的 探讨内脏脂肪素基因启动子区-1535 C/T基因多态性与宁夏回、汉族T2DM的相关性. 方法 用PCR-RFLP方法检测210例宁夏回、汉族T2DM患者(T2DM组)及207名健康对照者(NC组)内脏脂肪素启动子区-1535 C/T位点多态性. 结果 两组间及两组内回、汉族内脏脂肪素基因启动子区-1535 C/T基因多态性位点CC、CT、TT3种基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(P＞0.05).回族T2DM组TT基因型HDL-C低于CT、CC基因型(P=0.007),汉族T2DM组TT基因型TG较CC、CT基因型高(P=0.026). 结论 内脏脂肪素基因启动子区-1535 C/T位点存在多态性,两组间回、汉族差异无统计学意义;TT基因型可能与T2DM患者血脂异常有关.     

腹腔脂肪组织肿瘤坏死因子-α基因启动子区DNA甲基化及其mRNA的表达与维吾尔族肥胖及2型糖尿病的相关性研究

目的 探讨TNF-α基因启动子区甲基化及其mRNA的表达与新疆维吾尔族肥胖及T2DM的相关性. 方法 选取腹部择期手术的维吾尔族患者124例,分为对照(Con)组50例、肥胖(Ob)组48例,以及T2DM组26例.术时取网膜脂肪组织,采用变性高效液相色谱法(DHPLC)对TNF-α基因启动子区DNA甲基化进行检测.RT PCR检测TNFα mRNA表达情况. 结果 TNF-α基因启动子区DNA甲基化阳性率在Con组(70.0％)、Ob组(47.9％)及T2DM组(26.9％)逐渐降低(P＜0.01).Con组TNF-α mRNA相对拷贝数低于Ob组及T2DM组(P＜0.05).TNF-α基因启动子区DNA甲基化阳性组mRNA相对拷贝数(0.0542)低于甲基化阴性组(0.1988)(P＜0.01). 结论 腹腔脂肪组织TNF-α基因启动子区DNA甲基化抑制其mRNA表达可能是新疆维吾尔族肥胖及T2DM发生的危险因素.     

156例2型糖尿病PAI-1基因启动子区4G/5G多态性及其相关因素分析

检测156例2型糖尿病（T2DM）和60名正常人血浆纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）启动子4G／5G多态性，与有关临床指标作相关分析，结果提示PAI-1基因4G／SG多态性可能与T2DM发生冠心病相关。