SELDI蛋白芯片技术在肝癌及相关肝病中的应用

SELDI蛋白芯片技术全称为表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术（surface enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）,把层析、质谱等项技术合理应用于蛋白样品的检测,具有高通量、高效率、高灵敏度等特点,可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成,在基础医学研究、临床疾病诊断以及药物研发方面显示出广阔的应用前景。本文就其组成、技术原理、特点及其在肝癌和相关肝病中的应用、意义及发展前景作一综述。     

SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术及其在肿瘤研究中的应用

本文介绍了表面加强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption／inionation-time of flightmass spectra，SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片系统的组成和工作原理，并对SELDI-TOF-MS技术与其他蛋白质检测系统进行比较，对其所具有的优势和不足及该技术在肿瘤研究中的应用前景等作一评价。     

一组新发现的肿瘤功能性蛋白质组的指纹图谱

目的 确定新发现蛋白质组的指纹图谱及诊断平台。方法 将2004年4月至2004年12月31日治疗的146名肿瘤患者用美国赛弗吉(Ciphergen)公司的蛋白质指纹仪及wcx2蛋白质芯片经SELDI检测技术(surface enhanced erdesorption／ioniization-time of night-mass spectrometei)检测其血清。以质荷比(M／Z)大小构成某一患者血清的蛋白质指纹图谱。结果 对272次结果汇总，在M／Z为11100 H～11900 H之间出现质谱峰，其中一个丰度≥20％，其余丰度均≥5％，其峰簇上下游近1000个质量单位内无任何质谱峰，个别情况下，在M／Z为11100 H至11900 H之间出现丰度值≥5％单峰(自命名为LGT蛋白质组lost gooclwill target)。结论 LGT蛋白质组指纹图阳性诊断平台，在用wcx2蛋白芯片和sELDI技术获取的蛋白质指纹图上，在M／Z为11100 H～11900 H之间出现一质谱峰簇(cluster)，其最大丰度≥20％，最小丰度≥5％，并其上游、下游近1000个质量单位内无任何质谱峰出现；在M／Z为11100 H至11900 H之间出现丰度≥5％的单峰指纹标记，其余无变化，视为LGT蛋白质组指纹疑似阳性；在M／Z为11000 H至11900 H之间无任何质谱峰簇，为LGT蛋白质指纹阴性。     

SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展

SELDI蛋白芯片技术全称为表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF—MS）是近年用来研究蛋白质组学的一项新的技术平台，具有高通量、高效率、高灵敏度等特点，可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成，在基础医学研究、临床疾病诊断以及药物研发方面显示出广阔的应用前景及临床意义。文章就其技术组成、原理、特点和在肿瘤早期诊断中的应用及发展前景作一综述。     

蛋白芯片——飞行质谱技术在妇科肿瘤中的研究进展

蛋白芯片——飞行质谱技术是近年来发展较快、在肿瘤差异蛋白质研究中应用较广的一种蛋白质组学研究技术,它具有高效、高通量、只需微量样品进行检测等特点。本文对其原理、优势等进行介绍,并就近年来在妇科肿瘤中的研究进展方面作一综述。     

蛋白芯片技术对甲胎蛋白阴性肝癌诊断的意义

 目的　探讨表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（简称SELDI）技术在甲胎蛋白（AFP）阴性肝癌患者中的诊断价值。方法　应用美国Ciphergen公司SELDI仪和CM10芯片检测57例血清AFP阴性（<20 μg／L）肝癌患者和55例健康对照外周血清。采用Biomarker Wizard软件分析,筛选出特征性的蛋白峰,结合临床病理资料分析该蛋白峰的诊断价值。结果　筛选出的特异蛋白峰质荷比为4.2×103、4.1×103、6.7×103、5.7×103、6.5×103、6.9×103、5.8×103,利用差异蛋白峰对17例AFP阴性的肝癌患者和13例健康对照进行盲筛,其灵敏度和特异度分别为88.23 ％和92.31 ％。筛选出的特异蛋白峰与患者年龄、性别、肿瘤大小以及是否合并肝硬化等临床资料无关。结论　应用SELDI技术筛选肝癌患者血清特异性肿瘤标志物的方法快速、有效,对血清AFP阴性患者的正确诊断有较大的辅助作用。     

蛋白质组学技术及其在肝病研究中的应用

目的 蛋白质组学是继基因组学之后出现的一门新兴学科,已成为当前生物医学领域研究的热点,在肝脏疾病研究中已广泛应用并取得较大进展,本文综述蛋白质组学技术及其在肝病研究中的应用概况.     

SELDI-TOF-MS检测胎盘免疫调节因子对CIK细胞蛋白谱的影响

目的 用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测胎盘免疫调节因子(placental factor,PF)作用后的人细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK细胞)的蛋白组变化.方法 将健康人新鲜血液诱导成为CIK细胞后,设PF-CIK组和不加PF的空白对照CIK组,继续培养72h,观察CIK细胞的增殖率和细胞毒活性的变化,并用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELD-ITOF-MS)及WCX2蛋白芯片获得CIK细胞蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析,寻找差异蛋白.结果 与空白对照CIK细胞组相比较, PF-CIK组细胞的增殖率和杀伤率均有统计学意义(P＜0.01).空白对照CIK组和PF-CIK组有6个峰差异有统计学意义(P＜0.05),其中以4个蛋白质生物标志物(M/Z分别为5636.077、6860.359、6072.814和5984.191)差异最大.结论 PF可上调CIK细胞的生长及杀伤活性,并从蛋白组学上分析可发现两组之间存在显著差异的蛋白峰.同时,SELDI-TOF-MS在CIK细胞特异性蛋白质生物标志分子的筛选等方面具有一定价值.     

SELDI—TOFMS技术与小分子肿瘤相关蛋白的鉴定

表面增强激光解吸／离子化-飞行时间-质谱（SELDI—TOFMS）是目前广泛用于疾病标志物研究的蛋白质组学技术．应用该技术建立的诊断模型为人类疾病特别是恶性肿瘤的诊断研究提供了新思路。目前随着实验技术的不断发展，越来越多的SELDI—TOFMS技术筛选的小分子蛋白多肽被鉴定．为肿瘤标志物的研究提供了许多候选蛋白。SELDI—TOF差异峰的鉴定比较困难，文章总结SELDI差异峰鉴定的研究进展。     

SELDI蛋白芯片技术及其应用研究进展

近年来出现的SELDI蛋白芯片技术是一种自动快捷．灵敏特异．高通量的蛋白组学研究方法。在临床诊断、药物研发及食品卫生等方面有良好的应用前景。综述了该技术的原理、分类及应用范围．并对其优势、劣势和前最展望进行了分析。     

SELDI蛋白质芯片技术在肿瘤标志物筛选中的研究进展

表面增强激光解析电离光谱技术(surface--enhanced laser desorption ionization spectrometry，SELDI)是一种新兴的蛋白质芯片技术，它可以简便、快速地从各种体液及组织中获得大量蛋白质分子信息，可用于临床筛选新的肿瘤标志物、肿瘤的早期检测和风险评估。本文介绍了本技术的基本原理，以及在临床检测中的应用，并对本技术的发展前景作出预测。     

蛋白质组学及其在肿瘤研究中的应用

蛋白质组学技术如样品制备、双向电泳(2-DE)、凝胶染色、质谱分析、生物信息学、差异凝胶电泳(DIGE)、同位素亲和标签(ICAT)、蛋白质芯片等的研究取得较大进展,蛋白质组学在探讨肿瘤发病机制及诊断等方面得到广泛应用.现就蛋白质组学相关技术研究进展及其在肿瘤研究中的应用作一综述.     

应用SELDI技术检测弥漫大B细胞淋巴瘤预后相关的特异蛋白质谱

 目的　应用蛋白芯片表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）术检测弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者预后相关蛋白标志。方法　SELDI技术wcx2芯片检测62例DLBCL患者蛋白质谱,生物化学方法测定乳酸脱氢酶(LDH),酶联免疫吸附法（ELISA）测定β2-微球蛋白（β2-MG）和CA125。分析健康人、患者疾病缓解期与患者病情恶化、复发时的差异蛋白质谱,进行生存期分析,同时与国际预后指标（IPI）、LDH、CA125和β2-MG 作相关性分析。结果　20例患者在病情恶化、复发和死亡前出现11.000×103～12.000×103蛋白质谱峰（LGT）高表达,阳性组生存期明显低于阴性组的生存期（P = 0.0002）。IPI低中危组中LGT蛋白阳性者生存期比阴性者生存期明显短（P = 0.0034）。伴随的其他异常蛋白质谱：6.107×103、7.974×103及8.067×103与LGT蛋白呈正相关。LDH、CA125、β2-MG三者在LGT蛋白质谱表达组比阴性组显著增高（P＜0.05）,而且LGT与LDH、CA125及β2-MG呈正相关（P＜0.01）。结论　LGT蛋白与6.107×103、7.974×103和8.067×103三组蛋白质联合检测,有望作为DLBCL预后不良的特异性血清学蛋白标志,可能补充IPI指数的不足。     

血清蛋白质谱结合人工神经网络在头颈部鳞癌诊断中的研究

背景与目的:头颈部鳞癌早诊率的高低是影响治疗效果的关键因素之一.本研究应用血清蛋白质谱技术结合人工神经网络建立头颈部鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)患者的诊断模型,并评价其诊断价值.方法:对74例头颈部鳞癌患者和146例健康人的血清样本随机分为训练集(148例)和测试集(72例).首先应用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱surface-enhanced desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术及WCX2 (weak cation-exchange)芯片检测训练集样本,结合反向传播人工神经网络(artificial neural network,ANN)的方法建立诊断模型,进一步检测测试集样本并评价该模型的诊断价值.结果:在训练集样本中筛选出4个m/z(质荷比)峰(4 469 u,5 924 u,8 926 u,16 697 u)区分头颈部鳞癌和对照人群的敏感度和特异度均达100.0%(148/148);用该模型对测试集样本进行双盲法预测的敏感度为85.7%(18/21),特异度为96.1%(49/51).结论:该模型诊断头颈部鳞癌具有较高的灵敏度和特异度,值得进一步研究.     

应用蛋白质指纹图谱技术对胰腺癌标志物的筛选分析研究

目的：应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（surfaceenhancedlaserdesorption／ionization—timeofflight—massspectrometry，SELDI—TOF—MS）筛选胰腺癌患者血清蛋白标志物。方法：应用强阴离子交换芯片（stronganionicexchangechromatography，SAX），选择最佳结合、洗脱缓冲液对18例胰腺癌患者及18例正常人血清标本进行蛋白质质谱分析。结果：应用SAX，经SELDI—TOF—MS分析，在胰腺癌患者血清筛选出与正常人血清有统计学意义差异蛋白8个（P〈0.05），其中3个为高表达，相对分子量为4136．60、4465．92、4359．53Da，5个为低表达，相对分子量分别为15856．8、7564．52、15116．1、2042．78、2016．44Da。在18例胰腺癌患者中包括11例导管腺癌和7例其他类型癌，两者之间有统计学意义的差异蛋白1个，相对分子量4136．60Da。应用ROC曲线分析，确定6个差异蛋白对胰腺癌有中等诊断价值，敏感度为83％～94％，特异度为56％～67％。结论：经SELDI—TOF—MS技术在胰腺癌患者血清中筛选出灵敏度和特异度较好的差异表达蛋白，有助于胰腺癌的诊断。     

应用ＳＥＬＤＩ-ＴＯＦ-ＭＳ建立淋巴瘤诊断模型的研究

目的　探讨应用蛋白质组学技术研究淋巴瘤血清蛋白标志物并建立淋巴瘤人工神经网络诊断模型。方法　利用表面激光解析电离飞行时间质谱技术（ＳＥＬＤＩ-ＴＯＦ-ＭＳ）及弱阳离子交换表面（ＣＭ１０）蛋白芯片检测４７例初诊淋巴瘤患者和２１例正常对照血清蛋白质谱,采用ＣｉｐｈｅｒｇｅｎＰｒｏｔｅｉｎｃｈｉｐ软件对蛋白质谱进行差异蛋白分析,再优选４种蛋白质建立淋巴瘤诊断模型。结果　（１）淋巴瘤与正常对照的血清蛋白质谱之间有７７个差异表达的蛋白质荷比峰（Ｐ＜０.０５）,其中３５个蛋白有明显差异（Ｐ＜０.００１）,有８个蛋白质峰在淋巴瘤血清中高表达,２７个蛋白质峰低表达。（２）霍奇金淋巴瘤（ＨＬ）与非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）患者的血清蛋白质指纹图谱之间有２个差异表达的蛋白质荷比峰（Ｐ＜０.０５）,均在ＮＨＬ中高表达。（３）淋巴瘤诊断模型的灵敏度为８２.９８％,特异度９０.４８％,诊断指数（ＤＩ）１７３.４６％,Ｙｏｕｄｅｎ指数７３.４６％,阳性预测值９５.１２％,阴性预测值７０.３７％,ＲＯＣ曲线下面积ＡＺ为０.９４１。结论　淋巴瘤患者和正常对照血清之间存在特征性差异蛋白,可能对淋巴瘤的诊断和鉴别有重要意义。     

质谱分析及其在肺癌分子标志物研究中的应用

常压直接质谱分析技术和质谱成像技术是近年来质谱分析的重要进展,它们在生物样品分析 中具有广泛应用价值。肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,早期筛查和诊断是改善其临床诊治现状的重要 途径。本文就质谱分析及其在肺癌分子标志物研究中的应用作一综述。     

一组与焦虑症相关的蛋白质组指纹的研究报告

 目的　初步分析新发现的质荷比（M／Z）15 000+H～16 800+H范围内蛋白质组指纹表达与焦虑症的相关性。方法　2004年4月至2006年12月，对221例肿瘤患者进行了观察，全部采用焦虑自评量表（SAS）进行评估，根据评分标准分为焦虑症组和无焦虑组，应用蛋白质飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）检测患者血清，获得指纹图进行分析。结果　采用SAS评估221例患者，其中焦虑症患者49例，无焦虑患者172例，在焦虑症组患者的血清中捕获到M／Z为15 000+H～15 380+H和15 700+H～16 800+H的质谱峰簇，与SAS评估的符合率为75.51 %，其中，M／Z为15 700+H～16 800+H出现频度最高，其次是M／Z为15 000+H～15 380+H和15 700+H～16 800+H的双峰簇指纹，M／Z为15 000+ H～15 380+H峰簇指纹出现频度最少。在SAS评估为无焦虑的患者血清中也捕获到上述指纹图谱，二者比较除丰度有差异外，其质荷比是一致的。结论　M／Z为15 000+H～16 800+H处的峰簇为焦虑症相关蛋白质指纹。     

SELDI-TOF质谱技术与肿瘤体液标志物研究

本文简要总结近年用于临床蛋白质组研究中的表面增强激光解吸电离蛋白质芯片飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-filght mass spectrometry,SELDI-TOF)技术及其在肿瘤体液标志物研究中的应用.该技术以其简便、快速和无需纯化直接检测体液中蛋白质的特点迅速用于临床体液蛋白质组研究,取得了一些重要进展.同时,该技术也有许多缺点,本文对此做了总结.     

蛋白质芯片质谱仪在肿瘤标志物研究中的应用

表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)是一种新的蛋白质检测技术.与传统的蛋白质组学方法相比,该技术具有快速、灵敏、高通量等特点.利用该技术制成的蛋白质芯片质谱仪已成为蛋白质组学研究中的重要工具.现综述该技术在肿瘤标志物研究中的应用.