RASSF1A在胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究Ras相关结构域家族（RASSF）1A抑癌基因mRNA在胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法应用RT-PCR法检测胃癌和癌旁组织中RASSF1A mRNA的表达情况,并以正常胃黏膜组织作对照。结果 RASSF1A mRNA在胃癌组织中的表达缺失率为45.0%（27/60）,高于癌旁组织1.7%（1/60）和正常胃黏膜组织0（0/20）,P均〈0.01;RASSF1A mRNA表达缺失与胃癌TNM分期、浸润深度和淋巴结转移相关,而与年龄、性别、肿瘤大小和分化程度无关。结论胃癌组织中RASSF1A mRNA表达缺失与胃癌发生、进展和转移相关,可作为胃癌诊疗和预后评估的分子标志。     

p57KIP2 mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

选取石蜡包埋的44例非小细胞肺癌（NSCLC）患者及12例癌旁肺正常组织的标本制作组织芯片，用地高辛标记的探针、原位杂交法检测p57^KIP2 mRNA的表达情况。发现p57^KIP2 mRNA在癌旁肺正常组织和NSCLC组织中的表达元显著差异（P〉0．05）。鳞癌中阳性表达率明显高于腺癌（P〈0．01），NSCLC中无淋巴结转移者阳性表达率明显高于有淋巴结转移者（P〈0．01）。p57^KIP2 mRNA的表达有望成为监测NSCLC患者病情发展及评价预后的有用指标。     

结肠癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化状态、mRNA表达变化及意义

目的观察结肠癌组织中RAS相关区域家族1A（RASSF1A）基因启动子甲基化状态、mRNA表达变化,并探讨其意义。方法分别采用甲基化特异性PCR（MSPCR）和RT-PCR技术检测80例结肠癌及癌旁正常结肠组织中RASSF1A基因启动子甲基化、mRNA。结果 80例正常结肠组织中RASSF1A基因启动子未见甲基化,80例结肠癌组织中RASSF1A基因启动子出现甲基化者58例,两者相比,P〈0.05。正常结肠组织均可检测到RASSF1A基因mRNA,结肠癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化者未检测到RASSF1A基因mRNA、未甲基化者可检测到RASSF1A基因mRNA。RASSF1A基因启动子甲基化与结肠癌病理分型、淋巴结转移、远处转移和Dukes分期有关（P均〈0.05）。RASSF1A基因mRNA的表达与结肠癌Dukes分期有关（P〈0.05）。结论结肠癌组织中RASSF1A基因启动子出现甲基化,RASSF1A基因启动子甲基化者RASSF1A基因mRNA表达缺失,这可能与结肠癌的发生发展及转移有关。     

食管癌组织中RASSF1A的表达变化及意义

目的：观察食管癌组织中Ras相关区域家族1A（RASSF1A）的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测120例食管癌患者癌组织及其癌旁正常组织中的RASSF1A,分析其与食管癌临床病理参数的关系。结果 RASSF1A在食管癌及其癌旁正常组织中的阳性表达率分别为50．08％（61／120）、91．60％（110／120）,P＜0．01。 RASSF1A阳性表达与食管癌的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关（P均＜0．05）。结论食管癌组织中RASSF1A表达降低,其可能在食管癌的发生和发展过程中起重要作用。     

食管鳞癌中Paxillin mRNA的表达及其与癌转移的关系

目的探讨Paxillin mRNA表达与食管癌转移的关系。方法采用原位杂交方法检测54例食管鳞癌、癌旁不典型增生组织及其正常食管组织中Paxillin mRNA的表达。结果有淋巴结转移的21例（A组）食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管组织中Paxillin mRNA阳性表达率分别为90．48%（19／21）、52．38％（11／21）和0，无淋巴结转移的33例（B组）食管鳞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中的Paxillin mRNA阳性表达率分别为33．33％（7／33）、23．80％（5／33）和0。两组癌组织、癌旁不典型增生组织中Paxillin mRNA阳性表达率比较，P均〈0．05。结论Paxillin mRNA表达与食管鳞癌的转移密切相关。     

HMGB1和NF-κB p65在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）与核转录因子（NF-κB）p65在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测95例NSCLC（NSCLC组）和27例癌旁正常肺组织（对照组）中HMGB1、NF-κB p65蛋白的表达水平,并分析其临床意义。结果 HMGB1蛋白在NSCLC组织中的阳性表达（48.4%）明显高于癌旁正常肺组织（P〈0.01）;NF-κB p65蛋白在NSCLC癌组织中的阳性表达（44.2%）高于癌旁正常肺组织（22.2%）（P〈0.05）。HMGB1和NF-κB p65在转移组的表达显著高于非转移组（P〈0.01）。HMGB1和NF-κB p65蛋白在肺癌组织中的表达呈正相关（P〈0.05）,两者的表达均与NSCLC淋巴结转移有关。结论 HMGB1与NF-κB p65的高表达可能与NSCLC的转移有关。     

HIF-1αmRNA和GLUT1 mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨低氧诱导因子-1（HIF-1α）和葡萄糖转运蛋白子-1（GLUT1）的mRNA在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达以及与肺癌生物学特性的关系。方法采用PT—PCR、凝胶电泳半定量方法检测36例肺癌组织和12例癌旁组织中HIF-1αmRNA和GLUT1mRNA的表达，并分析它们在TNM分期中的表达情况。结果HIF-1αmRNA和GLUT1mRNA在癌症组织中的表达明显高于癌旁组织（P〈0.01），在有淋巴结转移组和有远端转移组中的表达均明显高于无淋巴结转移组（P〈0．05）和无远处转移组（P〈0．01）；HIF-1αmRNA与GLUT1mRNA的表达呈线性正相关（P〈0．01）。在T3、T4中的表达明显高于在T1、T2中的表达（P〈0．01或P〈0、05）。结论NSCLC组织中HIF-1αmRNA和GLUT1mRNA的表达与TNM分期、淋巴结转移和远端转移有关；HIF-1αmRNA和GLUT1mRNA表达的增高可能是NSCLC恶化的基因标志。     

ras相关结构域家族1A基因在胃癌组织中表达的意义

目的研究ras相关结构域家族(RASSF)1A基因在原发性胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨在胃癌发生发展中的可能机制。方法收集54例原发性胃癌及癌旁正常组织,应用逆转录(RT)-PCR检测RASSF1A mRNA表达,Western印迹及免疫组化法检测RASSF1A蛋白表达。结果RT-PCR及Western印迹显示RASSF1A mRNA和蛋白表达水平,在胃癌组织中明显低于癌旁正常组织(A值分别为0.2589±0.2407比0.5448±0.2971;0.1874±0.0737比0.6654±0.2201, P值均<0.01)。免疫组化分析显示,RASSF1A在所有癌旁正常组织中表达均阳性,积分范围为1～12,均值7.94±3.75;而在胃癌组织中表达则明显减弱或缺失,积分范围为0～6,均值1.07±1.61。RASSF1A在癌旁组织中的表达水平显著高于胃癌组织(P<0.01)。此外,RASSF1A mRNA及蛋白表达水平与胃癌分期显著相关。结论在原发性胃癌组织中,RASSF1A mRNA和蛋白表达明显缺失或低下,且与胃癌临床分期显著相关。     

p73和p51基因在结直肠癌中的表达和意义

背景：p53基因是一种肿瘤抑制基因，其家族成员p73和p51在结构上与p53具有高度同源性，影响细胞转录和凋亡的功能与p53相似。目的：研究p73和p51基因在结直肠癌中的表达及其与细胞凋亡和肿瘤临床病理特征的关系，探讨两者在结直肠癌发生、发展中的可能作用。方法：以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测60例结直肠癌组织和相应癌旁组织中p73、p51mRNA表达，以原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡。结果：结直肠癌组织p73、p51AmRNA表达阳性率显著高于相应癌旁组织（p73：71．7％对5．0％，P〈0．01：p51A：46．7％对11．7％，P〈0．01）：p51B mRNA在结直肠癌组织与相应癌旁组织中的相对表达量无明显差异（0．7318±0．3628对0．6836±0．3516，P〉0．05）。p73、p51A mRNA表达阳性者肿瘤细胞凋亡指数分别显著低于p73、p51A mRNA表达阴性者（p73：3．2％±2．5％对5．5％±2．8％．P=0．003；p51A：2．6％±2．3％对4．9％±2．7％，P=0．001）。p73mRNA表达与结直肠癌的分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关（P〈0．05），p51A mRNA表达仅与淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论：结直肠癌中p73、p51A基因表达上调，两者可能通过抑制肿瘤细胞凋亡而参与了结直肠癌的发生、发展。p73过表达可能与结直肠癌预后不良有关。     

血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）住非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与肿瘤血管形成、临床分期、淋巴结转移的关系。方法 应用免疫组织化学方法和酶联免疫吸附试验检测112例NSCLC患者的肺癌组织和血清中VEGF的表达，并分析其临床意义。结果 NSCLC组织中VEGF中的表达明显高于正常黏膜组织和癌旁组织（p〈）0.01），且大致随临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ-Ⅳ期的顺序明显升高（p〈）0.01）；同时有淋巴结转移组的VEGF水平显著高于无淋巴结转移组（p〈）0.01）。NSCLC患者血清VEGF水平显著高于正常对照组（p〈）0.01），并随肺癌分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ-Ⅳ期的顺序明显上升（p〈）0.01），淋巴结转移明显高于无淋巴结转移组（p〈）0.01）。结论 VEGF在NSCLC中表达明显增高，并与NSCLC的发生、发展及淋巴结转移有关，血清VEGF是NSCLC增生和转移的重要指标。     

胃癌组织中Survivin、PTEN、P53基因的表达及意义

目的　探讨凋亡抑制基因 Survivin和抑癌基因 PTEN、P53在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法　应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测 Survivin、PTEN和 P53基因在 6 5例胃癌、2 6例不典型增生胃黏膜、10例浅表性胃炎和 30例正常胃黏膜组织中的表达。结果　胃癌组织中Survivin、PTEN、突变型 P53基因的阳性表达率分别为 70 %、4 8%、6 5 % ,不典型增生胃黏膜中分别为 4 2 %、85 %、31% ,Survivin和突变型 P53基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中不表达 ,PTEN基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中全部呈阳性表达。胃癌组织中 PTEN基因的表达与正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,胃癌组织、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜中 Survivin和突变型 P53基因的表达差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。随临床分期增加、胃癌分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移 ,突变型 P53基因的阳性表达率逐渐上升 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因的阳性表达率逐渐降低 (P<0 .0 5 )。在胃癌组织中 Survivin与突变型 P53基因的表达呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,与 PTEN基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因与突变型 P53基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 )。结论　 Survivin、PTEN和 P53     

Whole-genome analysis reveals molecular innovations and evolutionary transitions in chromalveolate species

The chromalveolates form a highly diverse and fascinating assemblage of organisms, ranging from obligatory parasites such as Plasmodium to free-living ciliates and algae such as kelps, diatoms, and dinoflagellates. Many of the species in this monophyletic grouping are of major medical, ecological, and economical importance. Nevertheless, their genome evolution is much less well studied than that of higher plants, animals, or fungi. In the current study, we have analyzed and compared 12 chromalveolate species for which whole-sequence information is available and provide a detailed picture on gene loss and gene gain in the different lineages. As expected, many gene loss and gain events can be directly correlated with the lifestyle and specific adaptations of the organisms studied. For instance, in the obligate intracellular Apicomplexa we observed massive loss of genes that play a role in general basic processes such as amino acid, carbohydrate, and lipid metabolism, reflecting the transition of a free-living to an obligate intracellular lifestyle. In contrast, many gene families show species-specific expansions, such as those in the plant pathogen oomycete Phytophthora that are involved in degrading the plant cell wall polysaccharides to facilitate the pathogen invasion process. In general, chromalveolates show a tremendous difference in genome structure and evolution and in the number of genes they have lost or gained either through duplication or horizontal gene transfer.     

Frequent rearrangements of retinoic acid receptor alpha gene and myl gene, and rare mutations of RAS and FMS genes in acute promyelocytic leukemia.

To investigate leukemogenesis of acute promyelocytic leukemia (APL), we studied the involvements of retinoic acid receptor alpha (RAR alpha) and myl genes, and also the frequency of N-RAS, K-RAS, H-RAS, and FMS point mutations in sixteen patients with APL. By Southern blot analysis, the rearrangements of RAR alpha gene were detected in 13 patients (81.2%), and myl gene in 14 (87.5%). Either RAR alpha or myl gene rearrangements were found in all patients including one with normal karyotype. Breakpoints of both genes were clustered. By direct sequencing, no point mutations were found at codons 12, 13, and 61 of N-, K-, and H-RAS genes, and at codons 301 and 969 of FMS gene. These data indicate that myl-RAR alpha translocation occurs frequently in APL, whereas RAS and FMS mutations are rare in APL. It may be suggested that leukemogenesis of APL is different from other subtypes of acute myelogenous leukemia, and multistep leukemogenesis may not be a prevalent feature in APL.     

大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义

目的：探讨大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义。方法：用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的TUNEL法缺口末端标记和免疫组化技术，检测45例大肠腺瘤组织细胞的原位凋亡（AI）、原位增殖（KI）及bcl-2、bax基因表达；并设立20例正常大肠粘膜和40例大肠癌为对照组，探讨细胞凋亡和细胞增殖在大肠癌早期发生中的作用。结果：正常结肠粘膜有少量的bcl-2、bax和ki－67（用KI表示）表达及少量凋亡细胞存在，但无异常表达。大肠腺瘤中bcl-2表达和KI明显增加，与正常组相比P均＜0.05；AI和bax表达轻度增加，与正常相比P＜0.05。bax与AI表达呈正相关（P＜0.01），bcl－2和bax及AI呈负相关。大肠癌中bcl-2表达和KI表达虽增加，但与腺瘤相比无统计学差异P＞0.05；大肠癌组织中AI和bax表达明显增加且与腺瘤组相比P＜0.05。结论：大肠癌发生早期即腺瘤中就有细胞凋亡调控基因及增殖基因的表达异常，且以抗凋亡基因bcl-2和增殖基因表达占主导地位。该基因的表达异常可能是大肠癌发生的一个较早期分子标志；细胞凋亡增加和bax表达异常可能是大肠癌发生的一个相对较早期分子生物学事件。早期检测抗细胞凋亡基因和增殖基因，有助于对大肠癌早期发生的评估。     

Relationship between expression of Smac and Survivin and apoptosis of primary hepatocellular carcinoma

Introduction Disturbance of the regulation of cell apoptosis can lead to cell over-proliferation, and decrease of apoptosis can result in tumorigenesis ortumor development. The apoptotic signaling pathway is regulated by a variety of factors and is based on the balance between cell death and survival factors.[1, 2] The central players in apoptosis are caspases, and one important route to activation of the caspases involves the translocation of cytochrome C (Cyt-C) from mitochondria to cytosol…     

福州汉族献血者RHD和RHCE基因的多态性分析

目的：探讨福州市汉族献血者RHD和RHCE基因的多态性。方法：应用PCR-SSP等技术分析206名福州市汉族献血者的RHD和RHCE基因。用Arlequin3.5软件计算RHD、RHCE基因频率,检验Hardy-Weinberg平衡,计算最大可能性RH单倍型频率。结果：206名福州市汉族献血者都携带RhD抗原,都存在所检测的RHD基因第1、3、4、5、6、7、9和10外显子。206名献血者中,RHD、RHd、RHDel、RHCe、RHcE、RHce和RHCE基因频率分别为0.9660、0.0267、0.0073、0.6788、0.1667、0.0857和0.0688;DCe、DcE、Dce、DCE、dCe、dce、DelCe和DelcE单倍型频率分别为0.6580、0.1661、0.0733、0.0685、0.0145、0.0122、0.0065和0.0008。福州市汉族献血者RHD、RHEC各基因座基因频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0.05）。结论：福州市汉族人群RHD、RHd、RHCe、RHcE、RHce和RHCE等基因和DCe、DcE、Dce、DCE、dCe、dce等单倍型都达到多态水平。在RhD血型阳性中国人中,可能有相当数量的人携带诸如RHd、RHD1227A、RHD207A、RHD710delC等基因。     

嗜肺军团菌htpA基因的克隆及其原核表达

目的克隆并检测嗜肺军团菌htpA基因在原核系统中表达情况,为进一步研究HtpA蛋白的免疫性能作必要的准备。方法采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩得军团菌热休克蛋白A基因htpA,并将其定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pGhtpA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后,转化宿主菌大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果扩增出了291bp完整的htpA基因,构建了原核表达重组质粒pGhtpA,并检测到约36kDa的GST-htpA融合蛋白质表达条带。结论成功克隆了嗜肺军团菌htpA基因并使HtpA蛋白在原核表达系统中得到了有效的表达,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础。