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小干扰RNA特异性抑制淋巴细胞T-bet表达的研究
引用本文:张维,李宝金,伊远学,吴立旋,刘晓平,陶剑平.小干扰RNA特异性抑制淋巴细胞T-bet表达的研究[J].第三军医大学学报,2009,31(13).
作者姓名:张维  李宝金  伊远学  吴立旋  刘晓平  陶剑平
作者单位:1. 北京大学深圳医院肝胆腔镜外科,广东,深圳,518036
2. 中山大学中山医学院微生物学教研室,广州,510080
基金项目:国家自然科学基金,广东省自然科学基金 
摘    要:目的 探讨体外转录法合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人淋巴细胞T-bet基因表达及功能的影响.方法 设计并合成4条siRNA(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-co),脂质体法转染淋巴细胞.转染后48 h收集转染后细胞,采用RT-PCR方法检测细胞T-bet mRNA的抑制率;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞上清液中IL-4和IFN-γ水平;将淋巴细胞与人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)共培养检测淋巴细胞对ECV304增殖的抑制作用.结果 转染后48h半定量RT-PCR的检测显示siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3转染后的淋巴细胞T-bet表达抑制率分别为(72.50±1.01)%、(5.40±0.63)%和(30.90±0.90)%,以siRNA-1转染后的淋巴细胞T-bet表达抑制作用最强(P<0.05),其细胞上清液中IL-4水平最高,而IFN-γ的水平最低(P<0.05),siRNA-1转染淋巴细胞对人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)增殖的抑制作用低于siRNA-2及siRNA-3.结论 siRNA可特异性抑制淋巴细胞T-bet基因的表达,从而为进一步研究siRNA在移植免疫耐受中应用提供了理论和实验基础.

关 键 词:RNA干扰  小干扰RNA  淋巴细胞

Study on the expression of T-bet on human lymphocytes inhibited by specific siRNA
ZHANG Wei,LI Bao-jin,YI Yuan-xue,WU Li-xuan,LIU Xiao-ping,TAO Jian-ping.Study on the expression of T-bet on human lymphocytes inhibited by specific siRNA[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2009,31(13).
Authors:ZHANG Wei  LI Bao-jin  YI Yuan-xue  WU Li-xuan  LIU Xiao-ping  TAO Jian-ping
Affiliation:ZHANG Wei1,LI Bao-jin1,YI Yuan-xue1,WU Li-xuan1,LIU Xiao-ping1,TAO Jian-ping2 (1Department of Hepatobiliary Laparoscopy Surgery,Shenzhen Hospital,Peking University,Shenzhen 518036,Guangdong Province,2Department of Microbiology,Zhongshan Medical College,Sun Yet-sen University,Guangzhou 510080,China)
Abstract:
Keywords:T-bet
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