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红花天冬氨酸激酶基因片段的分离及表达分析
引用本文:王艳芳,张娜,张玲,张伟,李喜明,刘伟灿,杨晶,姚娜,李海燕,李校堃.红花天冬氨酸激酶基因片段的分离及表达分析[J].中草药,2015,46(20):3065-3070.
作者姓名:王艳芳  张娜  张玲  张伟  李喜明  刘伟灿  杨晶  姚娜  李海燕  李校堃
作者单位:吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春 130118
基金项目:国家高技术研究发展计划(“863”)(2011AA100606);国家自然科学基金资助项目(31401445);吉林省科技厅医药产业推进计划项目(20140311034YY);教育部博士点基金(20122223120002)
摘    要:目的克隆红花种子中的天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)基因并研究其在种子不同发育时期的表达量。方法根据红花转录组文库注释信息筛选与红花天冬氨酸激酶(Ct AK)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花种子总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增Ct AK基因片段并连接到克隆载体上,经PCR及酶切鉴定,筛选阳性克隆进行测序。同时利用荧光定量PCR技术对其进行基因表达量的分析。结果克隆了红花Ct AK基因的核心片段,分离到486 bp的基因序列。根据Ct AK基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行荧光定量PCR分析,Ct AK基因在红花品种川红1号初花后13 d表达量最高。结论系统发育树分析表明,该基因与其他物种的AK基因具有较高的同源性。

关 键 词:红花  天冬氨酸激酶  基因克隆  同源性  基因表达
收稿时间:2015/6/19 0:00:00

Isolation and expression analysis of aspartokinase gene fragment from Carthamus tinctorius
WANG Yan-fang,ZHANG N,ZHANG Ling,ZHANG Wei,LI Xi-ming,LIU Wei-can,YANG Jing,YAO N,LI Hai-yan and LI Xiao-kun.Isolation and expression analysis of aspartokinase gene fragment from Carthamus tinctorius[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2015,46(20):3065-3070.
Authors:WANG Yan-fang  ZHANG N  ZHANG Ling  ZHANG Wei  LI Xi-ming  LIU Wei-can  YANG Jing  YAO N  LI Hai-yan and LI Xiao-kun
Affiliation:Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
Abstract:
Keywords:Carthamus tinctorius L    aspartokinase  gene cloning  homology  gene expression
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