| A组轮状病毒多个结构蛋白抗原表位的串联表达及其免疫原性的检测 |
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| 引用本文： | 杨艳梅,李 霞,杨 慧,钱 渊,张 又,霍 岩,方荣祥,陈晓英.A组轮状病毒多个结构蛋白抗原表位的串联表达及其免疫原性的检测[J].生物化学与生物物理进展,2011,38(1):60-66. |
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| 作者姓名： | 杨艳梅 李 霞 杨 慧 钱 渊 张 又 霍 岩 方荣祥 陈晓英 |
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| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所植物基因组国家重点实验室，北京 100101；国家植物基因研究中心，北京 100101；中国科学院研究生院，北京 100039;北京农林科学院蔬菜花卉中心，北京 100097;北京农林科学院蔬菜花卉中心，北京 100097;首都儿科研究所病毒室北京感染与免疫中心实验室，北京 100020;首都儿科研究所病毒室北京感染与免疫中心实验室，北京 100020;中国科学院微生物研究所植物基因组国家重点实验室，北京 100101；国家植物基因研究中心，北京 100101；中国科学院研究生院，北京 100039;中国科学院微生物研究所植物基因组国家重点实验室，北京 100101；国家植物基因研究中心，北京 100101;中国科学院微生物研究所植物基因组国家重点实验室，北京 100101；国家植物基因研究中心，北京 100101 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)(2007AA100505)资助项目 |
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| 摘 要： | 从北京腹泻婴儿粪便提取的轮状病毒(rotavirus,RV)(T114株)的RNA中,克隆到轮状病毒结构蛋白基因vp4,vp6和vp7的全长cDNA,对它们编码的蛋白质序列和可能的抗原表位肽进行了预测,选择了RV主要抗原蛋白VP7、VP6和VP4的4个抗原表位肽,通过人工合成DNA的方式将这些抗原表位肽基因串联融合成一个阅读框RME(rotavirus multipleepitopes,RME)并构建原核表达载体.大肠杆菌表达的RME在ELISA反应中可被RV多克隆抗体识别,纯化的RME蛋白注射免疫小鼠可诱导特异性免疫应答,产生高滴度的同源氨基酸序列特异抗体和人RV抗体,其中针对RME的IgG抗体滴度达到l∶40 000,针对单个抗原表位EV7、EV6和EV4的IgG抗体滴度达l∶10 000～l∶20 000,针对RV Wa株的IgG抗体滴度较低为l∶2 500,但能特异地中和该病毒对MAC145细胞的侵染.上述结果为新型RV基因工程疫苗的研发提供了论据和基础.
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| 关 键 词： | 轮状病毒 基因工程疫苗 多价抗原表位 |
| 收稿时间： | 6/9/2010 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 9/8/2010 12:00:00 AM |
Linked Multi-epitopes of Several Rotavirus Structural Proteins as Antigens |
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| YANG Yan-Mei,LI Xi,YANG Hui,QIAN Yuan,ZHANG You,HUO Yan,FANG Rong-Xiang and CHEN Xiao-Ying.Linked Multi-epitopes of Several Rotavirus Structural Proteins as Antigens[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2011,38(1):60-66. |
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| Authors: | YANG Yan-Mei LI Xi YANG Hui QIAN Yuan ZHANG You HUO Yan FANG Rong-Xiang and CHEN Xiao-Ying |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Plant Genomics, Institute of Microbiology, The Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;National Plant Gene Research Center, Beijing 100101, China;Graduate School of The Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039, China;Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China;Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China;Laboratory of Virology, Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020, China;Laboratory of Virology, Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020, China;State Key Laboratory of Plant Genomics, Institute of Microbiology, The Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;National Plant Gene Research Center, Beijing 100101, China;Graduate School of The Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039, China;State Key Laboratory of Plant Genomics, Institute of Microbiology, The Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;National Plant Gene Research Center, Beijing 100101, China;State Key Laboratory of Plant Genomics, Institute of Microbiology, The Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;National Plant Gene Research Center, Beijing 100101, China |
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| Abstract: | The full length cDNAs of rotavirus structural protein genes,vp4,vp6 and vp7 were cloned from the rotavirus infected child stool specimen in Beijing through RT-PCR.The protein sequences and their antigenic determinants were predicted.According to the epitope peptide sequences,4 epitopes from these structural proteins were chosen,a DNA fragment encoding all these epitopes was synthesized and cloned into the prokaryotic expression vector.Multiple epitope protein(rotavirus multiple epitopes,RME) expressed in E.... |
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| Keywords: | rotavirus bioengineering vaccine multi-epitopes |
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