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| 烟草Nt-syr1基因实时荧光定量PCR检测方法 | |
| 引用本文： | 代晓燕,苏以荣,魏文学,陈风雷,邹焱,龙文,贾志红,范业宽.烟草Nt-syr1基因实时荧光定量PCR检测方法[J].中国烟草科学,2008,29(3):20-25. |
| 作者姓名： | 代晓燕 苏以荣 魏文学 陈风雷 邹焱 龙文 贾志红 范业宽 |
| 作者单位： | 1. 中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态重点实验室,长沙,410125;华中农业大学资源与环境学院,武汉430070 2. 中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态重点实验室,长沙,410125 3. 贵州省铜仁地区烟草公司,贵州,铜仁,554300 4. 贵州省烟草科学研究所,贵阳,550003 5. 中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态重点实验室,长沙,410125;长沙卷烟厂技术中心,长沙,410007 6. 华中农业大学资源与环境学院,武汉,430070 |
| 基金项目： | 中国科学院知识创新工程项目 , 贵州省烟草公司科技计划项目 |
| 摘 要： | 根据烟草Nt—syr1基因mRNA序列设计特异引物，建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR反应体系，对烟株打顶后叶片Nt—syr1基因进行了mRNA转录水平上的定量分析，为从分子生物学水平上研究烤烟钾素营养调控机理提供新的技术手段。该方法简单实用，获得的荧光定量PCR扩增曲线基线平整，指数区扩增明显，斜率大；稳定性和重现性好，变异系数小；循环阈值Ct与PCR起始模板量的对数值之间存在良好的线性关系。对基因表达结果分析表明，烟株打顶后1h，Nt—syr1基因在叶片中强烈表达，表达量约是同期不打顶处理的480倍，随后逐渐降低。与打顶处理相比，打顶后涂抹生长调节剂可以降低其表达量。 |
| 关 键 词： | 实时荧光定量PCR 烟草 Nt-syr1 基因表达 烟草 基因表达 实时荧光定量 检测方法 Tobacco Gene Detecting Quantitative 生长调节剂 处理 打顶 表达量 分析表 结果 线性关系 存在 数值 模板 循环阈值 变异系数 |
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