体外沉默血管内皮生长因子对D-(-)-MTX/A549耐药细胞株迁移侵袭能力的影响

目的: 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)基因沉默对D-(-)-MTX /A549耐药细胞株迁移和侵袭的影响及可能的分子机制。方法: 采用siRNA技术沉默D-(-)-MTX/A549耐药细胞株VEGF基因, 细胞划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力，实时荧光定量PCR检测VEGF、MMP-2 mRNA，Western blot检测p-ERK1/2蛋白的表达。结果: VEGF siRNA序列及阴性对照成功转染至D-(-)-MTX/A549后，VEGF mRNA表达水平明显下降, 与阴性对照相比下降了2.29倍，差异具有统计学意义（P=0.002），表明转染成功。阴性对照组与空白组差异无统计学意义（P>0.05）。转染后，D-(-)-MTX/A549迁移和侵袭能力明显下降（P值均<0.05），D-(-)-MTX/A549耐药细胞 MMP-2 mRNA、p-ERK1/2的蛋白达也较阴性对照水平明显下降（P值均<0.05）。结论: 抑制VEGF基因表达可以抑制D-(-)-MTX/A549细胞的迁移和侵袭能力，这一过程可能涉及到MMP-2和p-ERK1/2信号通路。