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RNAi抑制Akt2基因表达对卵巢癌细胞系A2780放射敏感性的影响
引用本文:孙冬岩,翁丹卉,宋晓红,夏曦,卢运萍,马丁.RNAi抑制Akt2基因表达对卵巢癌细胞系A2780放射敏感性的影响[J].中国癌症杂志,2008,18(2):96-100.
作者姓名:孙冬岩  翁丹卉  宋晓红  夏曦  卢运萍  马丁
作者单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北武汉,430030
基金项目:国家973重点基础研究发展计划资助项目(No:2002CB513107);国家自然科学基金资助项目(No:30571950).
摘    要:背景与目的:许多研究已经表明蛋白激酶B(P13K/Akt)在肿瘤细胞恶性增殖及肿瘤对放化疗的拮抗中起着重要作用,Akt2是Akt家族成员之一.本研究应用RNAi(RNA interference,RNAi)技术抑制Akt2基因的表达,观察其对肿瘤细胞生长和放射敏感性的影响.方法:构建Akt2基因的短发卡状RNA质粒转染人卵巢癌细胞A2780,同时以转染空载体和未转染组作为对照,3组细胞命名为pAkt2-shRNA/A2780,pEGFP/A2780和A2780)运用RT-PCR、蛋白质免疫印迹方法比较转染前后Akt2表达的差异;四甲基偶氮唑蓝实验绘制细胞生长曲线;克隆形成实验观察细胞的放射敏感性变化,以克隆形成率表示;6 MV X线10 Gy照射后48 h收集细胞,流式细胞仪(FACS)分析细胞凋亡情况.结果:与对照相比,shRNA可抑制Akt2 mRNA转录和蛋白的表达,差异显著(P<0.05);pAkt2-shRNA/A2780细胞生长明显慢于pEGFP/A2780和A2780细胞;pAkt2-shRNA/A2780细胞克隆形成率明显低于pEGFP/A2780细胞和A2780细胞(P<0.05);pAkt2-shRNA/A2780,pEGFP/A2780和A2780细胞凋亡率分别为(78.3±2.2)%、(41.2±1.8)%和(40.4±2.0)%,差异有显著性(P<0.05).结论:转染针对Akt2基因shRNA真核表达载体,抑制卵巢癌细胞中Akt2基因表达,能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,增强其对放射治疗的敏感性.

关 键 词:卵巢肿瘤  RNA干扰  放射敏感性  细胞凋亡  Akt2  RNAi  基因表达  卵巢癌细胞系  放射敏感性  影响  cancer  cell  line  human  radiosensitivity  RNA  interference  gene  放射治疗  增强  促进细胞凋亡  抑制细胞增殖  真核表达载体  细胞凋亡率  克隆形成率  差异显著  蛋白  转录
文章编号:1007-3639(2008)02-0096-05
收稿时间:2007-11-09
修稿时间:2007-12-26

Influence of Akt2 gene repression by RNA interference on the radiosensitivity of human ovadan cancer cell line A2780
SUN Dong-yan,WENG Dan-hui,SONG Xiao-hong,XIA Xi,LU Yun-ping,MA Ding.Influence of Akt2 gene repression by RNA interference on the radiosensitivity of human ovadan cancer cell line A2780[J].China Oncology,2008,18(2):96-100.
Authors:SUN Dong-yan  WENG Dan-hui  SONG Xiao-hong  XIA Xi  LU Yun-ping  MA Ding
Abstract:
Keywords:ovarian neoplasms  RNA interference  radiosensitivity  apoptosis  Akt2
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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