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目的:建立一种快速、高效、可视化的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1检测方法,为其基层检测的展开提供依据和便利。方法:利用重组酶聚合酶扩增结合胶体金侧向流试纸条技术(Recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow dipstick,RPA-LFD),辅以手持式胶体金读数仪;根据mcr-1基因保守序列设计合成一对特异性RPA引物,通过对反应条件和体系的优化,以及特异性试验、灵敏度试验、模拟食样试验和实际样品试验,成功建立了可视化定量检测细菌多黏菌素耐药基因mcr-1的RPA-LFD方法。结果:在引物浓度400 nmol/L,引物比例1:1时,该方法最佳反应条件为Mg2+浓度14.0 mmol/L,反应温度37℃,反应时间20 min;灵敏度好,标准曲线方程为y=0.117x+0.051,定量限为101~108 copies/μL,检出限为101 copies/μL,比PCR法低一个数量级且模拟样品检出结果与PCR法一致。利... 相似文献
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《Planning》2017,(5)
利用水杨酸、聚甲基丙烯酸甲酯与乙二胺化聚甲基丙烯酸甲酯的分子间作用力,制备了水杨酸选择性检测试纸。分析了聚甲基丙烯酸甲酯溶液质量分数、吸附时间和pH值等对水杨酸选择性检测试纸检测性能的影响。研究结果表明:应用制备的试纸检测水杨酸溶液,其线性值为50~2 200μmol/L,检测限为48μmol/L。测定250μmol/L水杨酸溶液时,6次测定的相对标准偏差为2.86%。 相似文献
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本文就pH计及pH玻璃复合电极在缓冲溶液缓冲性质的验证及演示教学作了初步探讨,并与pH试纸的运用作比较,以利明晰方法特点,拓宽学生视野,加深其对缓冲作用原理的认识,改进实验教学。 相似文献
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分别以粒径为50和100 nm的羧基化纳米磁珠,通过碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)交联法使磁珠与抗体偶联,制备出可特异性识别玉米细菌性枯萎病菌的两种纳米免疫磁珠试剂。基于双抗体夹心法,经实验条件优化,选用100 nm的羧基化纳米磁珠为磁标记探针,组装了玉米细菌性枯萎病菌磁标记免疫层析检测试纸条。该方法用于玉米种子中玉米细菌性枯萎病菌的检测,检出限为1.0×106CFU/m L,15 min内可通过肉眼判读结果,也可用超顺磁共振检测仪实现量化检测,具有简便、快速、现场化检测的优势。 相似文献
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河南省科学院日前研发出一种新型快速检测试纸条。在新型快速检测试纸条上滴几滴鲜牛奶,只需5~109钟就可方便直观地确定牛奶中是否有抗生素药物残留。 相似文献