胶原蛋白的提取及其纳米纤维的制备与表征

为提高羊皮中胶原蛋白的提取率和利用率，采用酸酶复合法提取羊皮胶原蛋白，再利用静电纺技术制备胶原基纳米纤维。以羊皮胶原蛋白提取率为评价指标，考察料液比、乙酸浓度、胃蛋白酶浓度和酶解时间四个因素对羊皮胶原蛋白提取效果的影响，确定单因素最优水平；在此基础上，采用正交试验设计对羊皮胶原蛋白提取的工艺条件进行优化，并通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描、SDS-PAGE图谱和扫描电镜等生化技术探讨酶解过程对胶原蛋白结构性质的影响；然后将胶原蛋白和聚乳酸复合静电纺丝，制备得到胶原基纳米纤维。结果表明，酸酶复合法提取羊皮胶原蛋白最佳工艺为：料液比1:25 g/mL、乙酸浓度1.2 mol/L、胃蛋白酶用量1.0%、酶解时间72 h，在此条件下羊皮胶原蛋白提取率为38.42%±0.49%；紫外光谱扫描显示羊皮胶原蛋白于230 nm附近出现最大紫外吸收峰；红外光谱扫描、SDS-PAGE图谱分析表明羊皮胶原蛋白主要有α₁、α₂、β三种亚基成分组成，属于Ⅰ型胶原蛋白，且胶原蛋白的空间结构保留完整；扫描电镜直观表明了羊皮胶原蛋白的纤维网络结构保留较完整；静电纺丝得到的胶原...     

海蜇Ⅰ型胶原蛋白的提取及结构特性研究

以海蜇为原料，采用盐酸-胃蛋白酶法提取胶原蛋白，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）、紫外光谱（UV-visible spectroscopy，UV）、氨基酸分析、红外光谱（Fourier-transform infrared spectroscopy，FTIR）、圆二色谱（Circular dichroism，CD）以及扫描电镜（Scanning electron microscope，SEM）对其结构特性进行了系统全面的研究。结果显示，海蜇胶原蛋白在135 kDa左右有一条α-链，在245 kDa以上有一条β-链和γ-链，紫外吸收峰在233 nm处，符合I型胶原蛋白的特征，其亚基组成可能为[α₁(I)]₃。海蜇胶原蛋白中含量最高的氨基酸为甘氨酸，占氨基酸总量的25.99%，且含有15.94%的亚氨基酸。红外光谱和圆二色谱均表明海蜇胶原蛋白分子排布紧凑，具有主要由氢键构成的完整三螺旋结构。扫描电镜结果显示海蜇胶原蛋白具有多层聚集、以纤维为主的无规则网状结构。     

B.cereus MBL13-U产牛骨胶原蛋白酶工艺优化

为了获得能够高效降解牛骨胶原蛋白的新型胶原蛋白酶,以蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus MBL13-U)为出发菌种,以胶原蛋白酶活力为检测指标,对影响发酵的4个因素(菌种接种量、发酵温度、p H、发酵时间)进行单因素试验。通过四元二次正交旋转组合试验,确定了B.cereus MBL13-U菌株发酵制备胶原蛋白酶的最佳工艺。当菌种接种量4%(体积分数)、发酵温度35℃、初始p H6.4、发酵时间46 h时,胶原蛋白酶活力达(92.31±1.13)U/m L。将其作用于牛骨胶原蛋白,通过扫描电子显微镜对酶解过程中的牛骨胶原蛋白进行结构分析。分析结果表明:酶解破坏了牛骨胶原蛋白原本完整的表面结构,使其所含的Ⅰ型胶原蛋白更多地暴露在表面,加快水解。     

猪皮胶原蛋白在模拟腌肉制品中的应用

为探讨猪皮胶原蛋白在肉制品中的应用价值,通过蒸煮损失率测定、质构测定、感官评价和凝胶电泳等分析方法,综合评价猪皮胶原蛋白对模拟腌肉制品品质的影响。实验结果表明:将猪皮胶原蛋白、TGase添加到模拟腌肉制品中,随着出品率不断提高,模拟腌肉制品的硬度(p 0.01)、弹性(p 0.01)和咀嚼度(p 0.05)逐渐下降,黏聚性和回复性先降低在回升。结合质构结果和感官评价可得出样品质构强度由大到小依次排序为:2号 3号 4号 5号 1号 6号,其对应的出品率分别为122.7% 128.7%133.7% 138.7% 122.5% 143.7%。所有组别的模拟腌肉制品a*值差异不显著。经SDS-PAGE变性凝胶电泳分析,TGase可使模拟腌肉制品中的肉蛋白与猪皮胶原蛋白发生交联,形成了新的蛋白质分子。因此,添加猪皮胶原蛋白和TGase,可以提高模拟腌肉制品的出品率,改善出品率增加所造成的质构和口感不佳,同时降低蒸煮损失率。     

口服胶原蛋白与海豹油治疗肥大性脊柱炎疼痛30例临床观察

目的:观察口服胶原蛋白与海豹油对肥大性脊柱炎疼痛的治疗效果。方法:选择30例腰椎退行性骨关节炎志愿者,口服胶原蛋白、海豹油,比较治疗前后腰部疼痛评分(VAS评分)、腰部压痛、叩击痛评分的差异。结果:治疗后患者VAS评分、腰部压痛+叩击痛总评分积分较治疗前显著减少(P<0.01)。结论:口服胶原蛋白、海豹油可有效缓解肥大性脊柱炎患者的疼痛症状,提高患者生活质量。     

鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁工艺条件探究

以鳕鱼皮胶原蛋白肽作为原料,合成了鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁,运用正交实验优选鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁最佳实验条件。实验结果表明,鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁最佳的实验条件是:镁盐与肽质量比为2∶1、反应时间为115 min、pH为7.5以及反应温度为70℃;采用水相合成法制备鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合镁,以红外分光光谱对产物进行表征。     

复方七芍降压片对自发性高血压大鼠肠系膜动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达及血压的影响

目的:探究复方七芍降压片对自发性高血压大鼠（SHR）血压及血管重塑的作用机制。方法:SHR大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦片组、复方七芍降压片组,每组10只,另设10只WKY大鼠为正常对照组,给药6周,无创血压仪测量各周大鼠血压变化;HE染色观察大鼠肠系膜动脉病理变化并测量管壁厚度、血管中膜厚度及相同位置的管腔直径,比值记为WT;免疫组化法检测肠系膜动脉中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白（COⅠ、COⅢ）表达情况。结果:给药6周后,与正常对照组比较,模型组大鼠各周血压均明显升高（P<0.01）,管壁厚度及WT值增高（P<0.01或P<0.05）,肠系膜动脉中MMP-2及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达均明显升高（P<0.01）;与模型组比较,复方七芍降压片组大鼠各周血压均明显降低（P<0.01）,管壁厚度及WT值降低（P<0.05）,肠系膜动脉中MMP-2及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达均明显降低（P<0.05）,且病理变化得到改善。结论:复方七芍降压片具有降低SHR大鼠血压,改善血管重塑的作用,其机制可能与降低MMP-2表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白沉积有关。     

活性胶原蛋白提取与表征方法研究进展

胶原蛋白由于其丰富性和可用性已成为最具前途的绿色可再生功能材料,从动物组织中提取具有完整螺旋结构和生物活性的胶原蛋白是制备胶原蛋白功能材料的首要任务。介绍了提取活性胶原蛋白的来源和提取方法,分析了酸提法和酶提法的研究现状;指出了两种提取方法的提取原理和提取特点;总结了分析表征胶原蛋白分子量、氨基酸序列、结构、物理性能、自组装性能的最新方法;指出了活性胶原蛋白提取表征今后的研究方向。结果表明活性胶原蛋白作为清洁化可再生材料具有广阔的应用前景。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白肽的制备及分析

草鱼鱼鳞为淡水产品副产物。我们用木瓜蛋白酶水解草鱼鱼鳞并优化酶解条件,运用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳和凝胶渗透色谱确定所得胶原蛋白肽的分子量,并分析了其中的氨基酸组成。结果表明,最佳酶解条件为:酶解温度60℃、酶添加量8%(质量分数)、酶解时间2 h、pH 5.0、料液比1∶30(g/mL)。所得的胶原蛋白肽分子量小于500 u,其中主要含有甘氨酸、丙氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和天冬氨酸。