利用ITS序列对两个盐藻株的分子鉴定

对实验室长期保存的两个盐藻株(Dunaliella salina)核糖体rDNA的ITS(internal transcribed space)序列(ITS1 5.8S rDNA ITS2)用PCR技术扩增并克隆,经序列测定后,与从GenBank中获得的相关序列一起构建系统发育树.结果显示:其中一个(Dunaliella salinaSHU 01)与Dunaliella viridisCONC 002的距离最近,另一个(Dunaliella salinaSHU02)与Dunaliella salinaUTEX 1644的距离最近.因此分别命名为Dunaliella viridisSHU与Dunaliella salinaSHU.     

不同胁迫下盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶基因表达及其与甘油合成的响应

在已克隆的盐藻（Dunaliella salina）3-磷酸甘油脱氢酶GPD基因的基础上，利用实时荧光定量PCR的方法，研究了经高盐、厌氧、磷酸盐以及氧化等不同外界胁迫条件下该基因的表达情况，并同时监测了盐藻细胞甘油合成的动态变化.对比酿酒酵母的GPD基因，发现D.salina GPD基因受高渗诱导，同时D.salina细胞内可能存在多个形式的GPD基因.     

盐藻（Dunaliella viridis）细菌人工染色体文库的构建和鉴定

盐藻具有极强的耐盐能力，是研究植物耐盐机制的模式系统.为了对其耐盐机制进行深入的 研究，以pCC1BAC为载体，构建了盐藻的细菌人工染色体（BAC）文库.该文库共有9 216 个转化子，插入片段平均长度为55 kb，以单克隆形式保藏在96块96孔板中，并建立了四维P CR基因筛选体系，可以通过4轮PCR快速筛选获得阳性单克隆.根据本实验室分离到的两个盐 藻基因的cDNA序列（ DvSPT2和DvTPSP ）设计引物，通过PCR从该文库中各筛到4个阳性BA C克 隆，说明该文库能有效用于分离盐藻基因的基因组序列，据此推测该文库约覆盖4倍盐藻基 因组序列.     

Hypoosmotic shock induces a stateⅠtransition of photosynthetic apparatus in Dunaliella salina

The effects of hypoosmotic shock on state transition in darkness in Dunaliella salina were studied. When the concentration of NaCI in culture medium was dropped from 1.5 to 0.5 mol/L abruptly, the photosynthetic rate of D.salina declined, but the respiratory rate and intracellular ATP content increased in the dark. The FpsⅡ/FpsⅠ ratio at 77 K of D. salina cells exposed to hypoosmotic shock was higher than that of control cells, indicating that more excitation energy was distributed to PS Ⅱ in stressed D.salina cells upon illumination. A decrease in LHC Ⅱ phosphorylation level was also observed when D.salina was exposed to hypoosmotic shock. Thus a state Ⅰ transition of photosynthetic apparatus occurs when D.salina suffers hypoosmotic shock in darkness, which is supposed to be related to an enhancement of respiration and an increase in ATP content in stressed D.salina cells.     

西藏高原盐湖植物—杜氏藻的香气成分研究

扎布盐湖世界上已知的海拔最高的丰富的嗜盐菌藻产地。本文用吸附法收集扎布耶湖中杜氏藻的香气，经色质用定性鉴定了３８个香气成分，其中大部分是藻类植物未被检检出的化合物。     

杜氏藻Dunaliellapeircei超微结构研究

两类糖蛋白纤维构成了Dunaliella peirces的细胞外被,鞭毛和基本分别为“9+2”和“9+0”结构,首次发现的中心粒由9个三联体组成,高尔基体1～2个,眼点位于细胞质中,由二排椭圆形小球构成,内质网丰富,线粒体形状多样,在“杯形”叶绿体中发现了雏形的基粒及“杯”上的小孔,叶绿体前端凹凸不平,后端具大型淀粉核一个,细胞核位于“杯形”叶绿体的凹窝中。     

杜氏藻同步化生长及核型分析

经１２ｈ光照和１２ｈ黑暗的光周期诱导，杜氏藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａ）出现同步化生长．以０．０５％秋水仙素处理、低渗及高位（６０ｃｍ）滴片，获得４种杜氏藻的核型．它们都是单倍体．染色体大多呈圆点状，极小．最长的染色体约为１．６μｍ，最短的染色体仅约０．５μｍ．染色体数分别是：Ｄ．ｐａｒｖａ１６条，Ｄ．ｂｉｏｃｕｌａｔａ２２条，Ｄ．ｐｅｉｒｃｅｉ２６条和Ｄ．ｍｉｎｕｔａ２８条．只有Ｄ．ｐｅｉｒｃｅｉ的第１至第４号和第７号染色体可见较明显的中间缢痕     

一种低危害的基因组DNA和总RNA的提取方法

从生物组织里提取基因组DNA和总RNA是多数专业研究人员都需要操作的实验内容,但该实验的常规操作流程中却存在致病性微生物的感染风险和有毒有害试剂的危害.本文从选择安全的实验材料和改进低危的实验方法两个方面入手,提出了以盐藻为实验材料的基因组DNA和总RNA的新的实验提取方法,该方法有效避免了致病性微生物的感染风险,也避免了有毒、挥发性试剂苯酚、氯仿和Trizol的使用,对核酸提取实验操作的安全性提供了一定的保障,可供研究者选取实验方案时参考.     

盐藻多糖提取及初步纯化

对提取β-胡萝卜素后的杜氏盐藻渣中多糖的提取、初步纯化和多糖脱色方法进行了实验研究.实验采用水浸提的方法,考察了提取温度、提取时间、液固比和pH值对盐藻多糖提取率的影响,盐藻多糖的最适提取条件为:提取温度:70℃,提取时间:4 h,液固比:30:1,pH值10,在此条件下,盐藻多糖的提取率为8.63%,多糖含量为65.73%.采用分级醇沉和分步醇沉的方法沉淀多糖,得到醇沉最佳条件为无水乙醇一步醇沉.采用中性蛋白酶水解脱除盐藻多糖提取液中蛋白质,脱除率为61.55%,脱蛋白后多糖含量为70.96%,采用过氧化氢对脱蛋白后多糖提取液脱色,脱色率为78.66%.