CD20 和CD19 双靶点CAR-T细胞对B淋巴细胞肿瘤的杀伤作用

目的：设计同时靶向B淋巴细胞表面CD20 和CD19 两个抗原蛋白的双特异嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）并制备BiCAR-T 细胞，检测其对B淋巴细胞肿瘤细胞的杀伤作用以及对免疫缺陷B-NSG 小鼠白血病模型的治疗效果。方法：构建基于鼠源CD19 和人源化CD20 scFv 的双靶点CAR分子，将CAR基因装载于慢病毒载体中，在293T细胞中包装慢病毒，感染健康人T 细胞制备BiCAR-T 细胞。构建表达CD19 和CD20 的K562-CD19-GFP、K562-CD20-GFP 以及表达Luciferase 的Nalm6-Luc-GFP 细胞作为靶细胞，将BiCAR-T 细胞与靶细胞共同孵育，检测其对靶细胞杀伤能力及释放IFN-γ 水平。使用Nalm6-Luc-GFP 细胞构建白血病小鼠模型，尾静脉注射BiCAR-T细胞，通过小动物成像方法观察BiCAR-T细胞对荷瘤小鼠的治疗作用。结果：健康人来源的BiCAR-T 细胞经7 d 培养后扩增良好，扩增倍数为20~50 倍，阳性率为10%~92%，显示成功制备BiCAR-T细胞。在效靶比为10∶1 时，BiCAR-T细胞对Nalm-6、K562-CD19-GFP 和K562-CD20-GFP 的杀伤率显著高于对照组细胞[ （76.7±7.4）% vs（8.7±2.4）%、（93.3±5.2）% vs（46.7±6.2）、（51.0±0.8）vs（30.7±0.5）%，均P<0.01]；与对照组相比，与Nalm-6细胞共孵育后BiCAR-T 细胞分泌IFN- γ 量显著增加[（872.7±7.7）vs（101.0±5.3）pg/ml ，P<0.01]。动物实验表明，BiCAR-T细胞对B-NSG小鼠白血病模型治疗效果明显，注射BiCAR-T细胞后白血病细胞逐渐减少，第50 天时基本消失，小鼠全部存活至第70 天被安乐死；PBS和对照T细胞组小鼠分别在（19±3）和（20±1）d 全部死亡。结论：成功设计了表达CD19 和CD20 的双靶点CAR分子后成功制备了BiCAR-T 细胞，该细胞能够有效杀伤表达CD19 和/或CD20 的B淋巴细胞肿瘤细胞，与靶细胞共同孵育后能够分泌大量IFN-γ，对B-NSG免疫缺陷小鼠白血病模型具有明显的治疗效果。     

临床常见六类不合理处方分析

目的通过抽检处方,掌握不合理处方状况,促进临床合理化用药。方法随机收集医院2011年1月至2月门诊住院处方,进行审查分析。结论针对不合理处方,要多措并举,加强处方管理,提高处方质量,提升合理用药水平,保障患者安全用药。     

浅析诱发中药不良反应的原因

从古至今,中草药在防病治病中起到了重要的作用,人们对中药普遍存在着纯天然的、无害的、可长期服用、甚至于随意服用的误区,其实这是非常错误、片面的,为进一步提高公众对中药不良反应的重视,正确理性认识中药,本文通过阐述总结讨论十四种诱发中药不良反应的原因,增强公众安全使用中药的意识.     

中药治疗妊娠剧吐50例疗效观察

2006年1月～2009年1月，笔者采用中药内服治疗妊娠剧吐50例，效果较好，现总结如下。     

176例药物不良反应分析

目的:了解药物不良反应(ADR)的发生和分布情况,为药物安全性评价提供依据。方法:对我院176例ADR进行分类统计和分析。结果:176例ADR中涉及ADR的药物共有60个品种,以抗感染药物所致的ADR居首位,占48.9%,其次循环系统用药占13.6%;给药途径中以静脉给药所占比例最大,占55.7%。结论:强化ADR认识,加强合理用药,预防或减少ADR的发生。