骨肉瘤差异表达基因的生物信息学分析及关键基因筛选

目的筛选成骨型骨肉瘤与正常成骨细胞的差异表达基因, 寻找成骨型骨肉瘤发生、发展的关键基因。方法从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库获得正常成骨细胞和骨肉瘤组织的基因表达数据集GSE33382, 采用R语言的limma包筛选正常成骨细胞和成骨型骨肉瘤的差异表达基因, 对差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用String数据库构建蛋白交互网络, 应用Cytoscape软件的分子复合物检测(MCODE)插件筛选互作网络中的网络模块, 应用Cytoscape软件中的BiNGO模块对MCODE筛选得到的前3个主要模块所包含的差异表达基因进行基因本体(GO)富集分析。采用MCC算法筛选蛋白互作网络中前10个关键基因。从GEO数据库获得骨肉瘤的基因表达和生存数据集GSE39055, 采用Kaplan-Meier法进行生存分析。选取2005年1月至2015年12月福建医科大学附属第一医院收治的48例成骨型骨肉瘤患者的资料进行验证, 采用免疫组化法测定骨肉瘤组织中STC2蛋白的表达, 结合患者的临床资料进行生存分析。结果从GSE33382数据集...     

骨肉瘤软组织肿块骨化程度与患者临床病理特征的相关性

目的 探讨骨肉瘤软组织肿块骨化程度与患者临床病理特征的相关性。方法 回顾性分析有软组织肿块的普通型骨肉瘤患者临床资料,包括Enneking分期、化疗敏感度、总生存期和转移出现后的生存时间。影像学评估软组织肿块内成骨情况,病理形态学上评估骨样基质占比。结果 本研究共纳入符合要求的189例患者。Enneking ⅢB期患者中无成骨型、部分成骨型、成骨型分别占30.2%、9.6%和6.3%,无成骨型的骨肉瘤有更高的初诊转移率（P<0.05）;无成骨型、部分成骨型、成骨型的化疗有效率分别为60.5%、59.6%和31.3%,成骨型的普通型骨肉瘤化疗敏感度更差（P<0.05）;无成骨型的骨肉瘤总生存期短于部分成骨型或成骨型骨肉瘤（P<0.05）;成骨型骨肉瘤转移后的生存时间长于无成骨型骨肉瘤（P=0.078）。结论 在普通型骨肉瘤中,软组织肿块内的骨化程度与肿瘤的外科分期、化疗敏感度和预后相关,对患者化疗与手术时机的个体化选择可能有指导价值。     

KiSS-1抑制骨肉瘤MG63细胞的侵袭和迁移

摘 要　目的：探讨人肿瘤转移抑制基因KiSS-1对人骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移能力的影响。方法:构建KiSS-1表达质粒pSNAV2.0-KiSS-1。pSNAV2.0-KiSS-1质粒转染骨肉瘤MG63细胞,经G418筛选稳定表达KiSS-1基因的MG63细胞。应用real-time PCR、Western blotting检测KiSS-1 mRNA和蛋白的表达。Transwell小室法检测MG63细胞的侵袭力,millicell小室、细胞划痕愈合实验检测KiSS-1基因对MG63细胞迁移能力的影响。结果:成功建立pSNAV2.0-KiSS-1质粒并稳定转染MG63细胞（MG63-KiSS-1细胞）,MG63-KiSS-1细胞高表达KiSS-1 mRNA和蛋白。转染KiSS-1质粒后的MG63细胞侵袭力显著降低（P<0.05）;millicell法、细胞划痕愈合实验证实转染KiSS-1质粒后的MG63细胞迁移力也明显降低（P<0.05）。结论:KiSS-1基因能显著抑制人骨肉瘤MG63细胞的侵袭和迁移能力,在骨肉瘤的转移中起重要作用。     

骨巨细胞瘤术后复发原因分析

 目的 分析骨巨细胞瘤特点与术后复发的相关性。方法 回顾性分析获得随访的451例骨巨细胞瘤患者发病部位、手术方式、Campanacci分级、病理性骨折、肺转移与骨巨细胞瘤复发率的相关性。结果 脊柱骨盆骨巨细胞瘤的复发率较膝关节周围（P<0.001）、桡骨远端（P=0.005）及其他部位（P<0.001）骨巨细胞瘤复发率高；Ⅲ级骨巨细胞瘤单纯刮除术后复发率高于扩大刮除术（P<0.001）以及瘤段或分块切除术（P=0.002），差异有统计学意义；行单纯刮除术的CampanacciⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级骨巨细胞瘤术后复发率比较差异有统计学意义（P=0.028），行扩大刮除及瘤段或分块切除术后的CampanacciⅡ级与Ⅲ级的骨巨细胞瘤复发率比较差异无统计学意义（P>0.05）；骨巨细胞瘤复发病例肺转移率高于无复发病例肺转移率，差异有统计学意义（P<0.001）；伴病理性骨折与无病理性骨折骨巨细胞瘤术后复发率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 手术方式影响骨巨细胞瘤的肿瘤外科边界，与术后复发率密切相关；复发病例的肺转移率明显升高；为改善骨巨细胞瘤患者预后，临床上骨巨细胞瘤手术应考虑足够的外科边界。     

低血磷性骨软化症七例报告

目的：通过分析罕见代谢性骨病低血磷性骨软化症的临床表现、辅助检查与疗效,对低血磷性骨软化症诊断提供参考,减少误诊和漏诊。方法回顾性分析2000年至2013年于我院诊治的7例“低血磷性骨软化症”患者,对其临床表现、辅助检查情况和疗效特点进行分析,并归纳总结其共同点。结果7例共同特点：(1)因早期症状无特异性,均被不同程度误诊,平均误诊(1.2±0.5)年;(2)症状表现为全身多发不明原因骨痛、肌无力,可伴多发骨折,甚至骨畸形;(3)实验室检查可见显著低血磷,但血钾正常,肿瘤致该病患者经查体结合SPECT检查可发现致病肿瘤;(4)在确诊后,对散发性低血磷性骨软化症者给予中性磷合剂、药物性低血磷性骨软化症者停药后补磷、肿瘤相关性低磷性骨软化症( tumor-induced osteomalacia, TIO)手术去除肿瘤后,血磷水平均上升,病情明显改善,预后较好。结论低血磷性骨软化症者常表现为低血磷,并伴全身多发不明原因骨痛、肌无力,可伴多发骨折,甚至骨畸形。临床医生应进一步提高对该疾病的认识,通过实验室以及影像学检查,可提高确诊率,减少误诊和漏诊。对于确诊的病例找到病因后,给予适当治疗,患者的病情可得到相当程度的改善。     

常温下对骨肉瘤真空干燥灭活的探讨*

目的:分析常温下对骨肉瘤组织进行真空干燥灭活的可行性。方法:体内实验对VX2 肿瘤块进行真空干燥处理及冰水复水后,行体内种植,确定灭活处理的安全时间。体外实验对骨肉瘤组织进行真空干燥灭活,测定脱水率,观察肿瘤组织形态学改变,检测肿瘤组织ATP 酶活性;检测兔骨、肌腱进行真空灭活处理后生物力学强度的变化。结果:常温下VX2 肿瘤真空干燥灭活的安全时间为60min;骨肉瘤组织接受真空干燥灭活后,明显皱缩,内部呈多孔状,脱水率达93.98% ,镜下见细胞明显变小,结构破坏,透射电镜下见肿瘤细胞膜破坏,细胞器崩解,染色体分解;肿瘤组织的ATP 酶活性明显较对照组降低;骨、肌腱的生物力学强度并未发生明显下降。结论:室温下真空干燥处理60min,对骨、肌腱力学强度无明显影响,却可以使骨及软组织肿瘤内肿瘤细胞完全灭活。      

骨肉瘤基因治疗研究进展

骨肉瘤是常见的骨原发恶性肿瘤,其恶性度高,进展快,预后差,且以青少年好发。以手术,放、化疗等为主的综合治疗措施,疗效有所提高。目前越来越多的学者致力于骨肉瘤的基因治疗研究,并取得可喜的成果。它是针对肿瘤发生的遗传学背景，将外源性基因引入肿瘤细胞或其他体细胞内，达到治疗肿瘤的目的。目前，骨肉瘤基因治疗主要涉及抑癌基因治疗、免疫相关基因治疗、反义基因治疗、自杀基因治疗、肿瘤血管基因治疗、     

固定平台与旋转平台假体全膝关节置换术后早期疗效的回顾性观察

目的回顾性观察PFC固定平台假体和RP旋转平台假体2种人工膝关节置换系统治疗成人膝关节骨性关节炎术后早期疗效。方法 54例(58膝)膝关节骨性关节炎行全膝关节置换术(TKA),其中固定平台组28例(30膝);旋转平台组26例(28膝)。结果所有患者均获3~54个月随访,术后切口愈合良好,均能直立行走。末次随访时固定平台组、旋转平台组膝关节评分(HSS)与膝关节活动度(ROM)分别为(87.20±8.12)、(86.34±6.39)分和(106.73±6.24)°、(107.12±4.58)°,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PFC与RP假体系统全膝关节置换术是治疗成人晚期膝关节骨性关节炎的有效方法,早期假体生存率较满意,术后两者对膝关节功能改善差异无统计学意义。长期的假体生存率需要进一步研究观察。     

KiSS-1基因对骨肉瘤MG63细胞增殖与黏附能力影响的研究

目的:观察人肿瘤转移抑制基因KiSS-1对人骨肉瘤MG63细胞增殖、黏附能力的影响。方法:PSNAV2.0-KiSS-1转染骨肉瘤MG63细胞,经G418筛选稳定表达KiSS-1基因的MG63细胞,应用RealtimePCR、蛋白质印迹法检测KiSS-1基因的表达情况。CCK-8法检测各组肿瘤细胞增殖能力的变化,并通过各组肿瘤细胞与血管内皮细胞、层粘连蛋白FN、人工基质胶Matrigel的黏附情况评估KiSS-1基因对MG63细胞黏附能力的影响。结果:PSNAV2.0-KiSS-1转染的MG63细胞稳定、能高效表达KiSS-1基因。转染KiSS-1基因的骨肉瘤MG63细胞随培养时间延长,特别是48 h后较MG63细胞组增殖能力明显减慢,F=10.05,P<0.05;转染后细胞与脐血管内皮细胞、FN、Matrigel黏附能力比较明显降低(P<0.05)。结论:KiSS-1基因能显著降低人骨肉瘤MG63细胞的增殖和黏附能力,可能在骨肉瘤的基因治疗中发挥重要作用。