LncRNA MALAT1在EGFR突变相关肺癌中的表达与临床意义

目的:探讨长链非编码RNA MALAT1在EGFR突变肺癌中的表达及其临床意义。方法:收集福建省肿瘤医院2015年6月到2018年6月进行外科手术的47例非小细胞肺癌病例(癌组织和癌旁组织),通过实时荧光定量PCR分析lncRNA MALAT1表达情况,通过多因素分析,研究lncRNA MALAT1表达对肺癌发生发展影响。分析EGFR基因突变情况,探讨lnc MALAT1与EGFR基因突变的相关性及其在肺癌中的意义。结果:肺癌病例中癌组织的lncRNA MALAT1表达量高于癌旁组织(P=0.0263),lncRNAMAL AT1表达量与淋巴结转移有显著相关(P=0.0275);lncRNAMAL AT1表达量与EGFR突变无相关。结论:LncRNA MALAT1可能作为原癌基因,参与肺癌的发生发展,lncRNA MALAT1与肿瘤转移有密切关系,可能作为肺癌预后判断指标。     

非小细胞肺癌组织中circ_0006692的表达及其对肺癌细胞增殖转移的调控机制

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中circ_0006692的表达与临床病理特征的关系及机制。方法 收集50对NSCLC和癌旁组织，qRT-PCR法检测癌和癌旁组织中circ_0006692的表达，并分析其与临床病理特征之间的关系。构建过表达、敲低的circ_0006692的A549肺癌细胞株，MTS、克隆形成实验、划痕创伤愈合实验和Transwell侵袭实验检测circ_0006692表达变化对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。qRT-PCR和Western blot检测circ_0006692表达变化对EMT相关基因表达的影响。结果 非小细胞肺癌组织中circ_0006692表达水平高于癌旁组织（P<0.05），其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及肺膜侵犯密切相关（P<0.05）。circ_0006692敲低抑制细胞增殖、侵袭和转移，过表达可促进细胞增殖、侵袭和转移。qRT-PCR和Western blot结果显示circ_0006692敲低抑制A549肺癌细胞EMT相关基因CDH2和MMP7促进CDH1表达。结论 非小细胞肺癌组织中circ_0006692的表达上调与肿瘤大小、TNM分期及肺膜侵犯密切相关；circ_0006692表达可调节A549肺癌细胞增殖、侵袭、转移以及EMT进展。     

非小细胞肺癌中ARL4C的表达及其在EGFR-TKI耐药中的作用

目的 探讨非小细胞肺癌中ARL4C的表达及其与临床病理特征的关系以及在EGFR-TKI耐药中的作用。方法 收集63例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织，qRT-PCR法检测ARL4C的表达并分析其与临床病理特征之间的关系。qRTPCR和Western blot法检测ARL4C在各细胞株中的表达，MTS检测细胞活性及IC50的变化，Transwell侵袭实验检测ARL4C表达变化对细胞侵袭能力的影响。结果 非小细胞肺癌组织中ARL4C表达水平低于癌旁组织（P<0.05），其表达水平与淋巴结转移、TNM分期和肺膜侵犯密切相关（P<0.05）。TKI耐药细胞株HCC827/ER中ARL4C在mRNA以及蛋白表达水平相较对照细胞株HCC827显著下调（P<0.05）；ARL4C过表达细胞株HCC827/ER/ARL4C-OEIC50显著下降（P<0.05），Transwell分析结果显示过表达ARL4C后肺癌细胞的侵袭能力受到抑制（P<0.05）。结论 ARL4C异常表达与非小细胞肺癌淋巴结转移、TNM分期和肺膜侵犯密切相关。过表达ARL4C能提高非小细胞肺癌细胞对EGFR-TKI药物的敏感度并抑制非小细胞肺癌细胞的侵袭能力。     

piR-9994对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其机制

目的 探讨piR-9994对胃癌细胞生物学行为的影响及可能机制。方法 qRT-PCR检测piR-9994在胃癌细胞系（MGC803和AGS）和正常胃上皮细胞（GES-1）中的表达情况;构建过表达和敲低piR-9994的MGC803胃癌细胞株,MTT、克隆形成实验检测piR-9994表达变化对细胞增殖能力的影响,划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。qRT-PCR和Western blot检测细胞增殖和EMT相关基因表达。结果 piR-9994在胃癌细胞MGC803中表达水平显著高于正常人胃黏膜上皮细胞GES-1（P<0.05）。piR-9994过表达促进胃癌细胞增殖、侵袭和转移,敲低则作用相反。piR-9994表达与细胞周期密切相关,特别是S期。piR-9994过表达促进增殖相关基因PCNA、CCND1、Bcl-2表达,抑制凋亡基因c-PARP表达,促进EMT相关基因N-cadherin、MMP7、Twist和Vimentin表达及抑制E-cadherin表达;敲低则作用相反。结论 piR-9994异常表达影响胃癌细胞增殖、侵袭、转移及EMT进程。piR-9994可能是胃癌新的标志物和治疗靶点。     

HS3ST1对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及顺铂耐药的作用机制研究

目的:研究HS3ST1对肺癌细胞A549增殖、迁移、侵袭及顺铂耐药的影响。方法:利用慢病毒感染并构建HS3ST1过表达细胞株;利用Western blot、RT-PCT检测HS3ST1的表达;利用CCK8实验、Transwell迁移实验和细胞毒性实验检测HS3ST1对A549细胞增殖、迁移、侵袭和顺铂耐药的影响;利用Western blot检测NF-κB信号通路的蛋白改变;利用GEO数据库（GSE108214）进行顺铂耐药基因分析,利用GEO数据库（GSE30219）数据分析HS3ST1表达水平对肺癌患者总生存时间（overall survival,OS）的影响。结果:HS3ST1在肺癌细胞及肺癌组织中呈高表达,中晚期（Ⅲ-Ⅳ期）肺癌组织中HS3ST1表达高于早期（Ⅰ-Ⅱ期）肺癌组织;过表达HS3ST1促进A549细胞的增殖、迁移和侵袭;GEO数据库（GSE108214）分析显示顺铂耐药细胞株高表达HS3ST1;细胞毒性实验表明过表达HS3ST1导致肺癌细胞顺铂耐药;过表达HS3ST1活化p65及p-p65;GEO数据库（GSE30219）数据显示高表达HS3ST1肺癌患者OS显著缩短。结论:HS3ST1可能通过NF-κB信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭及顺铂耐药,高表达HS3ST1肺癌患者预后较差。