重庆市正常人群肠道双歧杆菌的定量调查

本文介绍了一种双歧杆菌的选择鉴别培养基,并用该培养基对重庆市正常人群肠道双歧杆菌进行了定量分析,进而确定了正常值,为进一步研究双歧杆菌与人类的健康和疾病以及生态学防治提供了科学依据.同时也显示了正常人类肠道中双收杆菌的含量与年龄及性别无显著差异.     

双歧杆菌脂磷壁酸延缓脾脏衰老的研究

目的　研究双歧杆菌表面分子脂磷壁酸 (LTA)在D 半乳糖诱导的衰老小鼠体内 ,对脾脏指数和脾细胞DNA损伤的影响。方法　在建立D 半乳糖诱导的衰老小鼠模型的同时 ,注射双歧杆菌LTA ;然后测定模型对照组、正常对照组、试验组小鼠的脾脏指数 ,并以单细胞凝胶电泳试验检测脾脏淋巴细胞DNA氧化损伤的情况。结果　与正常对照组相比 ,模型对照小鼠的脾脏指数显著升高 (P <0 .0 5 ) ,脾淋巴细胞DNA受到了较严重的损伤 (P <0 .0 5 ) ;用双歧杆菌LTA处理后 ,试验小鼠的脾脏指数明显下降 (P <0 .0 5 ) ,脾淋巴细胞DNA的损伤程度显著降低 (P <0 .0 5 )。结论　双歧杆菌LTA能显著抑制衰老小鼠脾脏淋巴细胞DNA的氧化损伤 ,这可能与双歧杆菌抗衰老有关。     

双歧杆菌脂磷壁酸体外诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的 探讨双歧杆菌表面分子脂磷壁酸（LTA）的抗肿瘤作用及其机制.方法 应用MTT法、透射电镜及流式细胞术等方法观察双歧杆菌LTA对胃癌细胞BGC823的增殖抑制作用及其对细胞形态和细胞周期的影响,并用免疫细胞化学染色法检测LTA处理前后细胞凋亡相关蛋白表达的变化.结果 双歧杆菌LTA对体外培养的BGC823细胞具有明显的生长抑制作用,且具有剂量和时间依赖性.经LTA处理的BGC823细胞超微结构改变,出现凋亡小体,同时细胞周期发生变化,细胞被阻滞于G0/G1期.免疫细胞化学染色结果显示,LTA能下调Bcl-2蛋白和c-myc蛋白的表达,同时上调p53蛋白和c-fos蛋白的表达.结论 双歧杆菌LTA能抑制胃癌细胞BGC823的增长,其机制可能是通过调节凋亡相关蛋白的表达变化,将细胞阻滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡.     

双歧杆菌对单核细胞来源的树突状细胞成熟及功能影响的体外研究

目的 研究双歧杆菌对正常成年人外周血单核细胞来源的树突状细胞(dendritic cell, DC)刺激淋巴细胞增殖功能及分泌细胞因子的影响.方法 以GM-CSF、IL-4联合诱导单核细胞生成未成熟DC,加入不同剂量热灭活的双歧杆菌,观察DC形态,检测混合淋巴细胞反应,ELISA法测IL-12、IFN-γ分泌.结果 经双歧杆菌死菌刺激后,可获得具有典型树突状突起形态的DC;诱导后的DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力增强(P＜0.01),分泌IL-12、IFN-γ的水平提高(P＜0.05),呈剂量依赖型.结论 双歧杆菌能影响单核细胞来源的DC的分化、成熟及功能的发挥,且不同剂量的双歧杆菌对DC的成熟程度影响有差异.     

红霉素体外诱导肺炎链球菌耐药的研究

目的 通过体外诱导获得肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)耐药菌株,对比分析S.pn诱导耐药前后红霉素结合域的变异.方法 采用最低抑菌浓度(MIC)递增方法对S.pn标准菌株tigr4、tigr2 临床分离敏感株进行红霉素体外诱导耐药,PCR与RT-PCR对诱导前后rplD、rplV基因以及23S rRNA扩增并测序,CPHmodels-2.0蛋白质空间构象预测系统对诱导前后rplD、rplV基因编码的核糖体蛋白L4和L22进行空间构象预测分析.结果 诱导后tigr4 MIC由0.031 2 mg/L增加到256 mg/L,而临床分离敏感株MIC均由0.031 2 ms/L增加到32 ms/L.诱导前后测序结果对比显示标准菌株tigr4核糖体蛋白L4发生V32A变异,L22发生D35G变异,而临床分离敏感株核糖体蛋白L4发生Q67R、K68E变异.空间构象分析L22的D35G及L4的Q67R、K68E变异导致其相应的表面空间构象发生明显改变.结论 S.pn可通过红霉素体外诱导而导致耐药,其耐药机制与红霉素结合域发生新的变异有关.     

应用特异单克隆抗体测定猪囊尾蚴病人血清和脑脊液中的循环抗原

我们应用特异的抗猪囊尾蚴抗原的单克隆抗体(CCy1),建立了单克隆抗体抑制性ELISA方法以测定囊尾蚴病患者的循环抗原(CAg)。测定灵敏度为ng水平。83例囊尾蚴病患者血清的CAg阳性率为71.1％。其范围为0.16-128μg/ml。对41例囊尾蚴病患者,同时测定了血清和脑脊液中的CAg。单项或两项阳性的总阳性率为90.2％。114例正常人血清、107例其它寄生虫病患者(包括30例包虫病患者)的血清及10例非寄生虫病患者的脑脊液的CAg量均为零。有23例囊尾蚴病患者治疗半年到1年后,有21例抗原浓度为零。另2例分别为0.64μg/ml和1.6μg/ml。表明测定CAg不仅可以确定活动性囊尾蚴感染,而且可考核疗效。     

双歧杆菌脂磷壁酸抗氧化作用的实验研究

目的 通过研究双歧杆菌表面分子脂磷壁酸（LTA）对D-半乳糖致衰老小鼠氧化系统指标及Klotho基因表达变化的影响,探讨双歧杆菌LTA延缓衰老的分子机制。方法 在D-半乳糖诱导小鼠亚急性衰老的同时,每日腹腔注射双歧杆菌LTA。用试剂盒检测小鼠肾脏组织SOD活性及MDA的含量,同时用RT-PCR、Western blot及免疫组化方法检测各组小鼠肾脏组织Klotho基因表达情况。结果 与青年对照组小鼠比较,衰老模型组小鼠SOD活性显著下降,MDA含量显著升高,Klotho基因在转录和翻译水平表达均明显下降;而双歧杆菌LTA能显著逆转上述变化。结论 双歧杆菌LTA可能通过提高衰老小鼠的抗氧化活性及上调Klotho基因表达,从而发挥其延缓衰老的作用。     

波特兰水门汀对3种微生物的体外生长抑制实验研究

目的：比较波特兰水门汀（portland cement,PC）、无机三氧化物聚合物（mineral trioxide aggregate,MTA）、玻璃离子水门汀（glass ionomer cement,GIC）对3种微生物的体外生长抑制能力。方法：采用琼脂扩散法检测3种材料对3种微生物的体外生长抑菌效果。将含有1.5×108 CFU/ml活菌的白色念珠菌、大肠杆菌、变形链球菌菌悬液分别接种于不同的琼脂平板,将新鲜调拌的直径5 mm、厚度1 mm的材料片等间距放入琼脂平板内,37 ℃恒温培养24～48 h后,测量材料周围的抑菌环直径大小,根据抑菌环直径大小评价3种材料的体外细菌生长抑制能力。结果：研究发现3种材料对变形链球菌均无抑菌环产生;GIC对3种微生物均无抑菌环产生;PC及MTA对白色念珠菌均有抑菌效果,且PC产生的抑菌环直径大于MTA,差异具有统计学意义（P=0.002 9）;PC及MTA对大肠杆菌均有抑菌效果。结论：PC对白色念珠菌及大肠杆菌有一定抑制生长能力,可考虑进一步深入研究,为其临床应用提供理论支持。     

双歧杆菌对单核细胞来源的树突状细胞的影响

双歧杆菌是体内重要的优势菌之一，其活菌、死菌及各种成分都可激活机体免疫系统中多种免疫效应细胞，还可以明显下调人体TH2应答反应，从而提高机体局部或全身的防御功能，发挥自稳调节、抗感染、抗肿瘤等效应。目前，双歧杆菌对树突状细胞（DC）这一重要的免疫启动因子影响的研究较少。本实验主要通过体外细胞培养研究双歧杆菌对正常成年人外周血单核细胞来源的DC刺激淋巴细胞增殖功能及分泌细胞因子的影响，探讨双歧杆菌在体外对DC分化、成熟及功能的作用。     

光动力学照射小鼠牙周组织的病理变化*

背景：光化学疗法对口腔组织可能具有伤害,在临床应用甲苯胺蓝O介导的光动力学疗法预防龋病前,需进行生物安全性评估。 目的：观察甲苯胺蓝介导的光动力学疗法产生的光敏作用对小鼠牙周组织健康的影响。 方法：将54只小鼠随机分为9组,分别用0,50,100 mg/L 甲苯胺蓝O联合二极管光照0,15,25 min。作用后72 h,切取牙周组织切片观察。 结果与结论：经光照治疗后小鼠的牙龈、牙槽骨和牙齿没有发现有坏死、溃疡、增生等异常改变。提示甲苯胺蓝介导的光动力学疗法一个安全的预防龋病的方法,对牙齿临近的牙周组织无破坏性影响。