慢性乙型肝炎血清透明质酸和抗-HBe与肝组织病理的相关性

目的： 探讨慢性乙型肝炎血清透明质酸（ Ｈ Ａ） 和抗 Ｈ Ｂｅ 与肝组织病理改变的关系。方法：对１７０ 例慢性乙型肝炎患者进行肝活检,观察肝组织病理分级（ Ｇ） 和分期（ Ｓ） 情况,同时检测 Ｈ Ａ 及肝炎病毒标志物。结果：①血清 Ｈ Ａ 与肝组织病理分级和分期关系密切,随着病理分级和分期的升高, Ｈ Ａ 也逐渐升高, Ｇ４ 、 Ｓ４ 的血清 Ｈ Ａ 分别比 Ｇ１ 、 Ｓ１ 显著升高（ Ｐ ＜ ０００１） 。②肝组织病理分级、分期与血清抗 Ｈ Ｂｅ 的出现情况也密切相关, Ｇ４ 、 Ｓ４ 的抗 Ｈ Ｂｅ 阳性率分别比 Ｇ１ 、 Ｓ１ 显著升高（ Ｐ ＜ ００５） ;③抗 Ｈ Ｂｅ 阳性者中 Ｈ Ａ 值显著高于抗 Ｈ Ｂｅ 阴性病人（ Ｐ ＜ ０００１） 。结论： Ｈ Ａ 与抗 Ｈ Ｂｅ 有一定的相关性,在 Ｈ Ａ 显著升高或／ 和抗 Ｈ Ｂｅ 阳性的慢性乙型肝炎病人中,其肝组织的炎症、坏死及肝纤维化的程度较严重。     

乙型肝炎病毒核心蛋白原蛋白转化酶切割假定产物的体外研究

目的 通过体外试验探讨furin切割核心蛋白的可能性,并通过重组载体表达,研究其假定产物在HepG2细胞内的分布特点. 方法 重组HBV核心蛋白,并将其在不同温度和时间条件下(4℃消化16 h、30℃消化1h和30℃消化3h)接受furin切割,产物采用Western blot分析.构建HBV核心蛋白furin切割假定产物的真核表达载体,并以完整核心蛋白表达载体作为对照,转染HepG2细胞,获得稳定表达细胞株.使用核心蛋白与假定产物共同区的单克隆抗体进行间接免疫荧光染色,用共聚焦显微镜观察其细胞内分布. 结果 HBV核心蛋白在多种条件下均被furin切断,其主要产物相对分子质量约为15 000,与预期相符,且30℃切割1 h的效果最好.真核表达的核心抗原假定切割产物能与核心蛋白单克隆抗体结合,且在细胞内的分布与完整核心蛋白类似,主要以颗粒形式分布在细胞质. 结论 HBV核心蛋白在体外能被furin切割,其主要产物与完整核心蛋白有类似的免疫原性和相同的细胞内分布,提示furin或其家族成员参与了HBV复制调节,其切割产物对机体抗病毒免疫可能存在深远影响,值得深入研究.     

furin基因P1启动子区-229C/T多态性与肝硬化患者肝细胞功能的关系

目的：探讨furin基因启动子活性对肝硬化患者肝细胞功能的影响。方法：收集180例乙型肝炎肝硬化患者的血样和临床资料,采用竞争分化聚合酶链反应技术对furin P1启动子区单核苷酸多态性（SNP -229 C/T）进行基因分型,并以其为活性指标分析启动子活性与肝脏血清酶学、胆红素、白蛋白和凝血酶原等水平的关系。结果：全部患者中,等位基因C的频率为75.3%（271/360）,等位基因T的频率为24.7%（89/360）,基因型CC、CT和TT的频率分别为62.2%（112/180）、26.1%（47/180）和11.7%（21/180）。SNP -229C/T基因分型与主要血清酶学、胆红素、白蛋白和凝血酶原等水平无关,而与碱性磷酸酶和γ-谷氨酰转移酶有关。结论：furin基因启动子的活性对肝细胞主要功能无影响,提示furin作为HBV感染的治疗新靶点具有一定的可行性。     

定量PCR检测慢性HBV感染者血清HBV-DNA含量

目的 了解不同慢性乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量并探讨其临床意义 。方法 应用荧光能量转移定量聚合酶链反应检测２４５例不同临床类型慢性ＨＢＶ感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量。结果 ＨＢｅＡｇ阳性患者ＨＢＶ－ＤＮＡ含量显著高于ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阳性患者的含量;     

3种药用植物根际土壤水浸液对远志种子及其幼苗的化感作用

目的:探究地黄、半夏和菘蓝3种药用植物根际土壤水浸液对于远志种子萌发和幼苗生长的化感作用,筛选出适合与远志进行轮作的倒茬品种,为解决远志的连作障碍问题提供一定的科学依据。方法:采用生物测定方法,研究地黄、半夏和菘蓝3种药用植物根际土壤水浸液在0.3,0.6,0.9 g·mL~(-1)质量浓度下对于远志种子萌发和幼苗生长的影响。结果:地黄、半夏根际土壤水浸液对远志种子最终发芽率、发芽势、发芽指数均基本表现出低促高抑的浓度效应,而菘蓝根际土壤水浸液则具有显著的化感抑制作用;3种根际土壤水浸液对远志幼苗生长指标均表现出显著的化感抑制作用,其中,地黄根际土壤水浸液与其余两种水浸液相比对于远志幼苗的株高和根长的抑制作用最小;0.3 g·mL~(-1)地黄土壤水浸液处理下,远志幼苗的光合色素含量、脯氨酸(Pro)含量、可溶性糖含量最高,可溶性蛋白含量较高,H_2O_2含量较低;0.9 g·mL~(-1)地黄土壤水浸液处理下,远志幼苗的过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性最高,过氧化氢酶(CAT)活性较低、丙二醛(MDA)含量最低。结论:综合以上实验数据和化感综合效应分析,地黄根际土壤水浸液在一定程度上对于远志种子的萌发具有促进作用,且奠定了幼苗抗逆生化的基础,所以3种药用植物中,地黄更适合与远志进行轮作。     

248例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织HBsAg／HBcAg表达的相关性研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织病理学损害和HBsAg／HBcAg表达的关系。方法 对248例慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺活检,采用免疫组织化学法检测HBsAg和HBcAg,同时检测患者血清HBVDNA水平。结果 在肝脏炎症程度G1～G4四组患者之间血清HBV DNA水平无显著性差异（P〉0．05）,肝纤维化程度S1～S4四组患者之间血清HBV DNA水平也无显著性差异（P〉0．05）;在肝组织HBsAg表达强度-～＋＋＋四组患者之间血清HBV DNA水平无显著性差异（P〉0．05）,而肝组织HBcAg随血清HBV DNA水平的增高而表达增强。结论 慢性乙型肝炎患者肝组织炎症活动度和纤维化程度与血清HBV DNA水平无相关性。     

HepG2.2.15细胞系中HBV复制相关抑制因素的变化

目的:研究HBV对其自身复制相关抑制因素的影响,为今后探索提高抗病毒治疗的疗效提供基础.方法:采用实时荧光定量RT-PCR技术检测原蛋白转化酶(PCs)、肝细胞核因子(HNF)3*9茁和转化生长因子(TGF)*9茁1等HBV复制相关抑制因素的mRNA表达,采用Western印迹技术检测部分PCs的蛋白表达,通过比较模型细胞HepG2.2.15和其前体细胞HepG2的表达差别来判断HBV对其自身复制相关抑制因素的影响.结果:HepG2.2.15和HepG2细胞均相对高表达furin和PACE4,但HepG2细胞还高表达PC1/2.与HepG2细胞相比,HepG2.2.15细胞的PC1/3和PC7/8在mRNA水平显著被下调(均P ＜ 0.05),且PC1/3在蛋白水平的表达也显著减少.HepG2.2.15细胞的HNF3β和TGFβ1的mRNA表达水平也发生了显著改变,分别增加到5.22倍和降低到0.35倍.结论:HBV的存在对其自身复制相关抑制因素可产生显著影响.下调部分PCs和TGF*9茁1表达可能有利于HBV自身复制,但上调HNF3*9茁的意义值得深入研究.     

原蛋白转化酶FurinP1启动区SNP一229C／T影响HBV感染的转归

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）自限感染和慢性感染与原蛋白转化酶FurinP1启动区SNP一229C／T的关系。方法收集112例抗一HBs和抗一HBe阳性的HBV自限感染者和300例HBV慢性感染者的外周全血,提取基因组DNA;采用竞争分化聚合酶链反应技术为基础的方法对FurinP1启动区SNP一229C／T进行基因分型。结果全部患者中,C等位基因频率为74．6％（615／824）,T等位基因频率为25．4％（209／824）,CC、CT和TT基因型的频率分别为60．9％（251／412）、27．4％（113／412）和11．7％（48／412）,不完全符合Hardy—Weinberg分布。与自限感染相比,HBV慢性感染者携带较高频率的T等位基因（28．2％vs17．9％,P〈0．01）、1Tr基因型（14．3％vs4．5％,P〈0．01）和较低的C等位基因（71．8％VS82．1％,P〈0．01）、CC基因型（58．0％VS68．8％,P〈0．05）。在慢性感染患者中,HBeAg的状态与基因型分布无关。结论FurinP1启动区SNP．229C／T能在一定程度上影响HBV感染的转归,有望成为临床上HBV感染转归的预测指标。     

广州地区流行性出血热58例临床与流行病学分析

目的：为进一步了解近年广泛地区流行性出血热（ＥＨＦ）的临床和流行病学特点,方法：对５８例ＥＨＦ患者的临床及流行病学资料进行综合分析,结果：（１）肝,肾损害发生率分别为８７．５％和９２．９％,分别有８７．９％和８１％的患者出现蛋白尿和血小板减少;心电图改变发生率为８１．３％,（２）ＥＨＦ病毒重叠乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染率高达４７．１％（２４／５１）但单纯感染组与重叠感染组比较,两组在肝损害发生率并