超声辐射微泡剂抑制SMMC-7721移植瘤的实验研究及其作用机制探讨

目的研究低频超声辐射微泡剂对裸鼠移植肿瘤增长抑制情况和组织病理学变化,并探讨其与局部氧自由基代谢产物SOD浓度改变的关系。方法建立SMMC-7721系肝癌Balb/c裸鼠移植瘤模型,随机分为五组,对照组(A),微泡组(B),单纯超声组(C),超声微泡隔日组(D),超声微泡每日组(E)。连续一周观察肿瘤组织病理学损伤,肿瘤体积生长曲线和体积增长率。应用免疫组化的方法分析局部氧自由基代谢产物SOD的变化。分析增长率与SOD浓度之间的相关性。结果超声辐射D组、E组肿瘤体积明显小于对照组(P<0.05),超声辐射D组(73.20%±0.138%),E组(57.24%±0.1653%)肿瘤增长率明显低于对照的A组(121.24%±0.347%)、B组(123.13%±0.232%)和C组(108.74%±0.221%)(P<0.05),病理学检查见瘤内血栓形成和梗死,瘤组织细胞坏死。免疫组化法得出局部SOD阳性率D组(28.83%±2.483%)、E组(32.50%±3.017%)高于A组(11.50%±2.881%),(P<0.01)。并且SOD阳性率与肿瘤生长率间呈负相关(r=-0.663)。结论低频超声辐射微泡剂可以抑制肝癌移植瘤裸小鼠肿瘤的增长,并增加局部氧自由基代谢产物SOD浓度。肿瘤增长率与SOD浓度间有负相关关系。     

肝郁证雌性大鼠的神经内分泌状态及柴胡疏肝散的干预作用

目的探讨肝郁证雌性大鼠的神经内分泌状态及因证治方柴胡疏肝散的干预作用。方法Wistar雌性大鼠随机分为正常对照,模型组,柴胡疏肝散大、小剂量组共4组,每组10只。慢性束缚法复制肝郁证模型,连续4周。2个中药干预组大鼠在造模第2周末,分别按1.26 g/(kg·d)和0.31 g/(kg·d)剂量给予柴胡疏肝散灌胃,每日1次,连续2周;模型组和正常对照组大鼠给予等量蒸馏水。采用放射免疫法测定下丘脑组织促肾上腺素皮质激素释放激素(CRH)、促甲状腺释放激素(TRH)、促性腺激素释放激素(GnRH)。采用酶联免疫法测定血浆去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、五羟色胺(5-TH)、多巴胺(DA)、β内啡肽(β-EP);采用放射免疫法测定血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT),促甲状腺素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4),卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、孕酮(P)、雌二醇(E_2)、睾酮(T)。结果与正常组比较,模型组大鼠血浆5-HT、DA、NE降低,血浆E、β-EP升高(P0.05,P0.01);下丘脑组织CRH、TRH,血清ACTH、CORT、T3、T4均升高,血清TSH降低(P0.01);下丘脑组织GnRH,血清FSH、LH、PRL、P、T、E_2均升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,柴胡疏肝散大剂量组血浆5-HT、NE升高,E、β-EP降低(P0.05,P0.01),下丘脑组织CRH,血清ACTH、CORT降低(P0.01),下丘脑组织TRH,血清T3、T4降低,TSH升高(P0.01),下丘脑组织GnRH,血清FSH、LH、PRL、P、T均降低(P0.05,P0.01);柴胡疏肝散小剂量组大鼠下丘脑CRH,血浆β-EP和血清ACTH、T4、FSH、LH、PRL、P、E_2均降低(P0.05,P0.01),血浆DA升高(P0.01)。结论慢性束缚法雌性肝郁模型大鼠存在神经内分泌功能的失调,表现为下丘脑-垂体-肾上腺皮质/甲状腺/性腺轴的功能亢进,并伴有下丘脑和(或)垂体的负反馈调节障碍。柴胡疏肝散对该模型大鼠神经-内分泌轴的异常具有一定的调节作用,其大剂量作用优于小剂量。     

低频超声波对人外周血造血干细胞作用的研究

目的观察低频超声波对人外周血造血干细胞的作用。方法正常人经外周血动员后Baxter CS-3000血细胞分离机采取外周血造血干细胞，分成照射组和对照组。分别于照射后6h，24h，48h用台盼蓝拒染法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡，瑞氏染色光镜下观察细胞照射后有无出现凋亡，透射电镜观察照射后细胞的超微结构。结果台盼蓝拒染法结果为不同照射强度和不同照射时间组之间数值差异不显著；流式细胞仪未检测到明显凋亡；瑞氏染色光镜下未观察到细胞凋亡；透射电镜观察结果为照射后细胞的超微结构无明显改变。结论低频低强度超声波对人外周血造血干细胞的生长无明显影响。     

原子力声显微镜研究大鼠主动脉平滑肌细胞A7r5的弹性特征

目的 使用原子力声显微镜获得大鼠胸主动脉平滑肌A7r5细胞的弹性分布.方法 使用原子力显微镜加声激励对在盖玻片上附壁生长的A7r5大鼠主动脉平滑肌细胞成像,在进行原子力声显微镜成像的同时,辅以力-距离曲线计算弹性模量.结果 使用原子力声显微镜可以在数分钟内无创、完整显示纳米尺度的A7r5大鼠主动脉平滑肌细胞的弹性分布,并得到其弹性模量.结论 原子力声显微镜可以在数分钟内无创、完整显示纳米尺度的细胞的弹性分布.     

原子力声显微镜评价超声靶向微泡破坏法对大鼠心肌母细胞的影响

目的 探讨运用原子力声显微镜评价超声靶向微泡破坏法对大鼠心肌母细胞(H9C2)影响的可行性.方法 采用不同超声参数对H9C2细胞进行辐照处理.使用原子力声显微镜观察细胞骨架、形态结构的改变;采用台盼蓝染色法及荧光物质转入法检测细胞存活率及细胞膜通透性变化.结果 (1)通过比较辐照后H9C2细胞生存率及发光率变化,适宜参数为:频率1 MHz,声强1.0 W/cm2,占空比20％,辐照时间60 s;(2)原子力声显微镜可以完整显示H9C2细胞的形态结构,以形态像、声学像及三维像的差异区分细胞损伤的程度.结论 原子力声显微镜能够准确评估不同超声辐照参数对H9C2细胞的影响,优化超声靶向微泡破坏法转染参数.     

肝郁证雌性大鼠的动情期变化及柴胡疏肝散的防治作用

目的探查肝郁证雌性大鼠的证候学和动情周期的变化及柴胡疏肝散的防治作用。方法雌性大鼠随机分为正常组,模型组,柴胡疏肝散大、小剂量组,每组10只。肝郁证模型复制采用慢性束缚法。大鼠造模第2周末(造模第14天),柴胡疏肝散大、小剂量组分别给予柴胡疏肝散1.26g/(kg·d)和0.31 g/(kg·d)灌胃,每日1次,连续2周;模型组和正常组大鼠给予等量蒸馏水。记录造模期间各组大鼠的外观行为和动情周期(阴道涂片法)的变化,实验2周末和4周末做糖水偏嗜实验,实验4周末做旷场实验。结果模型组大鼠实验期间出现由早期多动兴奋、烦躁易怒逐渐变为扎堆少动,行动迟缓,饮食减少等表现;第2周和第4周糖水偏嗜度分别增加和降低(P0.01),第4周旷场实验中中央区停留时间、穿格次数、直立次数均降低(P0.01),出现明显的动情周期紊乱。柴胡疏肝散的防治作用:与模型组比较,柴胡疏肝散大剂量组大鼠外部一般行为的异常趋于适度,糖水偏嗜度增加(P0.01),旷场实验中的中央区停留时间、穿格次数、直立次数均见增加(P0.01),动情周期紊乱率明显下降(P0.01);柴胡疏肝散小剂量组上述指标变化无明显差异(P0.05)。结论慢性束缚法建立的雌性肝郁模型大鼠不仅表现有中医肝郁证的变化且伴有动情周期的紊乱,肝郁证的治疗代表方柴胡疏肝散对该模型大鼠的中医证候及性周期紊乱均有良好改善作用,且大剂量作用优于小剂量。     

低频低强度超声波诱导白血病细胞株K562凋亡的研究

目的：研究低频低强度超声波诱导白血病细胞株K562凋亡的作用及其机制.方法：取对数生长期的K562细胞,分成实验组和对照组,用MTT法计算细胞存活率,流式细胞仪判断细胞凋亡,瑞氏染色和透射电镜观察细胞照射后有无出现凋亡,分光光度法检测照射前后K562细胞Caspase-3的活性改变.结果：超声照射各组间细胞存活率与对照组相比有统计学差异,但组间无差异;瑞氏染色光镜下可见0.03 W组和0.10 W组细胞出现细胞核固缩等早期凋亡的改变,0.25 W组出现凋亡小体等典型凋亡改变;流式细胞仪检测0.25 W组凋亡率为38.87%;照射前后K562细胞Caspase-3的活性无差异.结论：低频低强度超声波对白血病细胞株K562有诱导凋亡作用,与照射强度和时间无明显相关.低频低强度超声波诱导K562的凋亡可能不通过Caspase-3的途径.     

肝藏血中肝郁血滞病机的实验探查

【目的】 探查肝藏血中肝郁血滞病机的现代内涵。【方法】 将40只雄性大鼠随机分为正常组和模型组各20只。模型组采用慢性束缚应激法建立肝郁证模型,记录各组大鼠的不同时间点的外观行为与体质量的变化,于第2周末和第4周末进行糖水实验和旷场实验及检测下述指标水平：下丘脑去甲肾上腺素（NE）;血浆5-羟色胺（5-HT）、皮质酮（CORT）、抗凝辅助因子抗凝血酶（AT-Ⅲ）、蛋白C（PC）及游离蛋白S（FPS）;不同切变率下的全血黏度及血浆黏度,凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（FIB）,血小板聚集率。【结果】（1）肝郁相关指标。与正常组比较,模型组大鼠可见：体质量第1 ~ 4周均显著降低,活动状态和情绪睡眠积分均明显升高（P < 0.05或P < 0.01）;糖水偏嗜度第2、4周均明显降低（P < 0.05或P < 0.01）;爬行里程数第2周明显增加（P < 0.01）、中央区停留时间明显降低（P < 0.05）,中央区停留时间、爬行里程数第 4 周均明显降低（P < 0.05 或 P < 0.01）;血浆 5-HT 水平第 2、4 周均明显降低（P < 0.05 或 P <0.01）,血浆CORT水平第4周明显升高（P < 0.05）,下丘脑NE第4周水平明显降低（P < 0.01）。（2）血滞相关指标。与正常组比较,模型组大鼠可见：第2周的PT、APTT、TT均明显降低（P < 0.01）,FIB明显升高（P < 0.05）,3 min血小板聚集率明显升高（P < 0.01）;第4周的中切、高切全血黏度和血浆黏度均明显升高（P < 0.01）,PT和APTT均明显降低（P < 0.01）,FIB明显升高（P < 0.05）,1、3、5 min血小板聚集率均明显升高（P < 0.01）,PC、FPS、AT-Ⅲ均明显降低（P < 0.01）。【结论】 慢性束缚应激肝郁证模型大鼠造模期间先后出现不同程度的肝郁证表现,而且还伴有血液黏度增高和凝血功能增强及肝脏对凝血因子及抗凝辅助因子平衡调节的异常。该结果在一定程度上可阐释中医肝郁血滞病机的现代内涵。     

中药与5-羟色胺再摄取抑制类抗抑郁药联合应用的研究进展

摘 要选择性5-羟色胺（HT）再摄取抑制药（SSRIs）或5 HT及去甲肾上腺素（NA）再摄取抑制药（SNaRI）是目前临床上治疗抑郁症的首选药物。然而该类药物的临床不良反应已成为影响临床运用的突出问题。中药在治疗抑郁症方面具有一定的经验,与该类抗抑郁药联合应用有增强疗效和（或）减轻其不良反应的作用。本文拟对该类药物与中药联合运用的现状进行评述,以期对临床治疗抑郁症提供一定的参考。     

礞石滚痰丸的临床运用

礞石滚痰丸是中医泻火逐痰的著名方剂,为历代医家所推崇,被临床广泛应用。文章基于该方的现代研究与运用背景,围绕其主治、功效、剂型、用法、临床运用及加减变化等进行了系统评述。调查显示,原方所主病证有数十种之多,但以痰火壅、闭、窜、乱为其基本病机;汤、散、丸剂均可选用,但以丸剂为佳,且宜缓缓服用(药后宜静卧或少动),有利于消除陈积伏匿之痰。现代该方主要用于神经精神、呼吸、内分泌等系统的疾病,其中治疗精神神经系统疾病的疗效与西药大体相近,联合西药使用时或能提高其疗效及减轻其不良反应,但不少病例属于个案,确切疗效尚待评价。该方现代多用汤剂,随症加减中的配伍主要涉及化痰祛浊、凉血活血、行气解郁、祛风止痉等类药物,尤其与清半夏、天竺黄配用最为常见。