镇肝熄风汤载药脑脊液对PC12细胞损伤的保护作用

目的 :探讨镇肝熄风汤载药脑脊液对甲基-苯基-吡啶离子(1-methyl-4- phenylpyridinium, MPP⁺)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。 方法 :不同浓度的镇肝熄风汤载药脑脊液预处理体外培养的PC12细胞后,加入MPP⁺诱导PC12细胞损伤模型。用MTT法检测PC12细胞活力,实时定量PCR检测Bax和Bcl-2 mRNA的表达,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达。 结果 :MPP⁺处理72~96 h,与空白对照组比较,模型组细胞活力明显降低,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著下调, Bax mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.05)。与模型组比较,不同浓度的镇肝熄风汤载药脑脊液细胞活力明显升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著上调, Bax mRNA和蛋白表达显著下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论 :镇肝熄风汤载药脑脊液对MPP⁺诱导的PC12细胞具有保护作用,可能是通过上调Bcl-2和下调Bax的 mRNA和蛋白表达而发挥抑制PC12细胞凋亡的作用。     

MPP~+对PC12细胞中细胞色素c和caspase-3表达的影响及镇肝熄风汤的调控作用

目的:研究甲基-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)对PC12细胞细胞色素C(Cytc)和caspase-3蛋白表达的影响及镇肝熄风汤载药脑脊液的干预作用。方法:不同浓度的镇肝熄风汤载药脑脊液预处理体外培养的PC12细胞后30min后,加入250μmol/L MPP+共孵育24h。采用实时定量PCR检测PC12细胞caspase-3mRNA的表达,采用ELISA法检测PC12细胞细胞浆中Cyt c浓度变化。结果:MPP+诱导24h,PC12细胞中caspase-3mRNA表达明显增多,细胞浆中Cyt c浓度也明显升高,而镇肝熄风汤载药脑脊液能剂量依赖性地抑制MPP+诱导的caspase-3mRNA表达增多和细胞浆中Cyt c浓度升高。结论:MPP+诱导PC12细胞caspase-3mRNA表达和Cyt c浓度的增加,镇肝熄风汤其增加具有抑制作用。     

镇肝熄风汤载药脑脊液对MPP^＋诱导的PC12细胞c-Jun磷酸化的影响

目的探讨镇肝熄风汤载药脑脊液对甲基-苯基-吡啶离子（1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP＋）诱导的PC12细胞c-Jun磷酸化的影响。方法镇肝熄风汤载药脑脊液预处理体外培养的PC12细胞后,加入MPP＋诱导PC12细胞损伤模型。用Western blotting检测c-Jun和phospho-c-jun蛋白表达。结果 MPP＋处理72h,与空白对照组比较,模型组phospho-c-jun蛋白表达显著上调,差异具有统计学意义（P〈0.05）。与模型组比较,镇肝熄风汤载药脑脊液组phospho-c-jun蛋白表达显著下调,差异具有统计学意义（P〈0.05）。而各组之间c-jun蛋白表达无显著性差异（P〉0.05）。结论镇肝熄风汤载药脑脊液对MPP＋诱导的PC12细胞c-Jun磷酸化具有抑制作用。