组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及其突变体的表达研究进展

对组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及其突变体在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞、丝状真菌、昆虫细胞和转基因动物乳腺等表达系统中进行表达的研究工作情况进行了综述，并对各个表达系统的优缺点进行了比较。     

漆酶提取黄芪中黄芪皂苷的研究

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,是最主要的3种木质素降解酶之一,可以催化氧化酚类化合物脱去羟基上的电子或质子,形成自由基,导致酚类及木质素类化合物裂解,有效的降解木质素。近年来,有关漆酶的研究越来越受到国际上的重视,它在保护环境、造纸工业、食品工业及其他领域均有很大的研究价值和应用潜力。中药中的杂质大多为淀粉、果胶、蛋白质等,可选用合适的酶予以分解除去。目前,应用较多的是纤维素酶。大部分的中药材的细胞壁是由纤维素构成,植物的有效成分往往包裹在细胞壁内,用纤维素酶酶解破坏植物细胞壁,有利于有效成分的提取。将漆酶等…     

卫星搭载甘草遗传变异的 ISSR 分析

 目的 探讨 太空环境对甘草的诱变作用。 方法 利用返回式卫星搭载甘草， 18 d 后返回地球（飞行回收舱平均辐射剂量为 0.102 mGy·d^-1 ，飞行远地点距地球 350 km ，重力为 10^-6 N ），搭载种子返回地面后与对照组同时播于实验田中 , 取生长 3 年的甘草叶子用作 ISSR 分析，应用简单序列重复 (ISSR) 分子标记技术分析甘草基因组的变异情况。 结果 最终 10 条能产生清晰重复多态性条带的 ISSR 引物用于检测鄂托克前旗样品的基因组多态性， 9 条能产生清晰重复的多态性条带的 ISSR 引物用于检测杭锦旗样品的基因组多态性。 太空飞行组与地面对照组的相似系数分别为 0.886 8 和 0.872 3 ，遗传距离分别为 0.120 1 和 0.136 6 ， 基因组的多态性频率为 20.3% 和 20.7% ，多态性片段大小在 200 ～ 1 900 bp 之间。 结论 太空环境对甘草基因组产生了一定的诱变作用，这些变化表明空间育种是一种新型有效的育种方法并且对保护濒危甘草资源做出贡献。     

太空环境对甘草中甘草酸生物合成相关基因的诱变作用分析

目的:探讨太空环境对甘草酸相关基因的诱变作用分析.方法:利用返回式卫星搭载甘草,18 d后返回地球,搭载种子返回地面后与对照组同时种植于实验田中,采集三年生甘草叶子,对甘草酸形成相关基因ITS序列,β-香树酯醇合成酶基因的多态性以及基因表达差异进行了研究.结果:甘草经过卫星搭载后,甘草酸相关基因ITS序列没有发生变化,而甘草酸合成关键基因β-香树酯醇合成酶基因某些位点呈现了差异性,并且太空环境对甘草酸合成关键基因β-香树酯醇合成酶基因表达有一定影响.结论:太空环境对甘草酸相关形成和表达产生一定影响,这些变化对于揭示太空环境对甘草酸形成的基因机制具有重要意义,并且对于后期选育甘草优良种质奠定基础.     

中国根霉溶栓活性成分高产菌株的选育

中国根霉虽然能产生溶栓活性组分,但在发酵液中其活性成分浓度过低,影响活性组分的应用和分离纯化。因此,有必要对出发菌进行改造。取中国根霉菌No12孢子经过硫酸二乙酯和紫外线诱变后涂布在初筛平板去氧胆酸纳牛奶琼脂平板上,2 8℃培养6d ,孢子在牛乳平板中形成菌落并产生溶解,挑选出5 8株溶解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,进一步在蛋白胨麸皮水中发酵,通过比较发酵液在血纤维平板上形成透明圈面积,筛选出1株高产溶栓酶的突变株No 12 -1,其在血纤维平板上形成的溶圈平均直径为5 5mm ,大于出发菌株No 12所形成的溶圈平均直径3 75mm ,…     

构建酿酒酵母细胞工厂生产番茄红素

为构建高效生产番茄红素的酿酒酵母细胞工厂,本研究首先在酿酒酵母中引入番茄红素生物合成途径基因Crt B和Crt I,获得能生产0.17 mg·L-1番茄红素的初始工程菌ZD-L-000。在此基础上,在工程菌ZD-L-000中分别过表达MVA途径中的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶编码基因t HMG1、萜类合成调控的转录因子编码基因upc2.1、二萜生物合成的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶与法呢基焦磷酸合酶编码基因BTS1-ERG20,以及来自嗜酸热硫化叶菌的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶编码基因Sa GGPS,考察这些基因过表达对番茄红素合成的影响,结果发现过表达upc2.1基因未能提高番茄红素的产量,但过表达t HMG1、BTS1-EGR20和Sa GGPS基因均能显著提高番茄红素的产量,分别为初始菌株的2.0,16.9和20.5倍。在进一步研究中,t HMG1、BTS1-EGR20和Sa GGPS等有效基因被一同整合入工程菌ZD-L-000,获得的高产菌株ZD-L-201中番茄红素的产量提高77.0倍,达到13.23 mg·L-1;在高密度-两相发酵体系中工程菌ZD-L-201的番茄红素产量能进一步提高到135.21 mg·L-1(提高10.2倍)。本研究获得的工程菌为微生物发酵法生产番茄红素提供了基础。     

利用板蓝根水提醇沉物生产产朊假丝酵母

目的以板蓝根的水提醇沉物为原料培养产朊假丝酵母。方法将原料液化、糖化处理后,以此水解液为发酵液进行液态发酵,并对该菌在水解液中的生长特性及发酵条件进行研究。结果优化后的培养条件为:水解液还原糖含量2.65%,温度28℃,pH值5.5～6.5,接种量9%,装液量100mL(500mL三角瓶)。在优化培养条件下培养20h后,产朊假丝酵母的生长达到稳定期,其活菌数达到6.61×108/mL。经检测,干燥后的菌粉中靛玉红达0.45μg/g。结论以板蓝根水提醇沉物为原料生产产朊假丝酵母是可行的。     

间歇补料分批发酵提高纳他霉素产量

对间歇补料分批发酵提高纳他霉素产量的工艺进行了研究，结果表明，在5L自动发酵罐条件下，初始葡萄糖浓度40g/L，以发酵液中的还原糖为控制指标，当还原糖降至2％以下时开始间歇补糖使葡萄糖浓度维持在2％，葡萄糖流加总量为20－25g/L，在最佳的间歇补料分批发酵工艺下，使纳他霉素的产量从1.5g/L提高到2．3g/L，提高率为35％。     

漆酶提取黄芪中黄芪皂苷的研究

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,是最主要的3种木质素降解酶之一,可以催化氧化酚类化合物脱去羟基上的电子或质子,形成自由基,导致酚类及木质素类化合物裂解,有效的降解木质素。近年来,有关漆酶的研究越来越受到国际上的重视,它在保护环境、造纸工业、食品工业及其他领域均有很大的研究价值和应用潜力。中药中的杂质大多为淀粉、果胶、蛋白质等,可选用合适的酶予以分解除去。目前,应用较多的是纤维素酶。大部分的中药材的细胞壁是由纤维素构成,植物的有效成分往往包裹在细胞壁内,用纤维素酶酶解破坏植物细胞壁,有利于有效成分的提取。将漆酶等…     

根霉产生抗生物质发酵条件初步研究

通过对不同培养基及不同C源、N源、接种量等影响因素的单因素多水平实验,确定了最佳发酵工艺;以5%麸皮水,1%玉米浆为培养基,初始pH4.0,种龄为10h,接种量5%,装液量5%,装液量100mL/500mL三角瓶,160r/min,30℃,发酵48h,在优化后的条件下,培养基的成本及制作时间均降低,而且总活力提高为140U/mL。