LC-MS/MS同时测定小鼠脑组织中7种神经递质含量

目的: 建立一种同时测定小鼠脑组织中7种神经递质的LC-MS/MS分析方法。方法: 小鼠脑组织加入4倍量冰冷的0.2%甲酸-水超声匀浆,匀浆液加入0.2%甲酸-乙腈沉淀蛋白,离心,取上清液,加入内标,混匀后进LC-MS/MS分析。采用TSK Gel amide 80 (4.5 mm×150 mm,5 μm) 色谱柱,柱温35℃,流动相乙腈-6 mmol·L^-1甲酸铵水溶液(pH 5.5)(67.5:32.5),流速0.2 mL·min^-1,采用正离子多反应检测(MRM)模式进行扫描。通过动物试验验证LC-MS/MS的可靠性,并考察酸枣果肉对小鼠神经递质水平的影响。结果: 多巴胺(DA)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)的最低检测限均<0.1 μg·L^-1,精密度RSD分别为0.52%,0.71%,0.98%,0.35%,0.32%,0.46%,0.94%,准确度RSD分别为0.67%,0.46%,0.53%,0.72%,0.48%,0.59%,0.82%,均符合生物样品的分析要求。动物试验显示与空白组相比,小鼠给予多奈哌齐后,海马和皮层中乙酰胆碱水平极显著升高;而东莨菪碱则作用相反,给药后会降低脑内乙酰胆碱含量,与空白组相比,具有极显著差异。小鼠口服酸枣果肉后,脑内多种神经递质明显发生改变,且变化规律与阳性药物舒乐安定相同。结论: 建立的LC-MS/MS分析方法可应用于神经精神类药物的药理作用机制研究。     

葛根黄酮提高桑白皮降糖活性及其机制研究

目的:葛根黄酮(PF)对桑白皮提取物(ME)降糖活性的增效作用研究及其机制探讨.方法:4组大鼠(每组5只)分别灌胃给予含淀粉(2 g·kg-1)的桑白皮提取物(ME,34.5 mg·kg-1)、葛根黄酮(PF,211.5 mg·kg-1)、桑葛复方提取物(ME-PF,250 mg·kg-1)或蒸馏水,给药后于0～2h内取血测定其血糖水平;另取2组大鼠(每组5只)施行在体单向肠灌流实验,在ME的主要药效成分1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)相同浓度(10 μmol·L-1)下以ME或ME-PF进行灌流,以LC-MS/MS法测定灌流液中DNJ的浓度.结果:PF与ME联用时,可显著抑制大鼠餐后血糖水平的升高,与仅给淀粉组比较,2h内的总血糖血糖浓度-时间曲线下面积(AUC)水平从(8.71 ±2.26) h·mmol·L-1下降至(5.16 ±1.42) h·mmol·L-1,其下降幅度达40.8％,而单独使用ME和PF时血糖AUC的下降幅度较小,分别为13.6％[(7,52-±1.00) h·mmol·L-1]和11.8％(7.68±2.22 h·mmol·L-1).肠灌流结果表明,ME-PF中DNJ的平均有效渗透系数Peff值(3.5 ×10-3)cm·min-1,明显低于单独使用桑白皮的Peff值(7.5 ×10-3)cm·min-1,(P＜0.05);肠吸收率亦有显著差别(P＜0.01),分别为14.8％,31.6％.结论:葛根黄酮能显著提高桑白皮提取物降低餐后血糖的作用,这很可能与其抑制桑白皮提取物中DNJ的肠道吸收,从而提高具有α-糖苷酶抑制活性的DNJ的肠道浓度有关.     

以Caco-2细胞模型研究远志皂苷水解物的肠吸收特性

目的 通过研究远志皂苷水解物主要活性成分3,4,5-三甲氧基肉桂酸(TMCA)、对甲氧基肉桂酸(PMCA)和细叶远志皂苷(TF)的肠转运特性,预测其口服生物利用度.方法 利用Caco-2细胞模型,以及所建立的LC-MS/MS分析方法,研究上述3个成分在不同浓度下从顶侧(AP)到基底侧(BL)以及从BL到AP2个方向的转运特性.结果 TMCA和PMCA 2个酚酸化合物具有较好的膜通透性,在不同浓度下从AP到BL的表观渗透系数(Papp)均＞10×10-6cm·s-1,而三萜皂苷TF的通透性较差,Papp值均＜1×10-6cm· s-1.3个化合物的转运量均随浓度的增加而增加,但Papp值保持基本一致,且各自2个方向的Papp值无明显差异.结论 TMCA和PMCA具有良好的肠通透性,属吸收较好的化合物,而TF则通透性较差,口服吸收可能很有限;3个化合物均以被动扩散形式转运,且无外排转运机制.     

盲肠周围疝致回肠坏死伴肠梗阻超声表现1例

患者女,82岁,因腹痛、腹胀4天就诊。患者既往体健,于4天前无明显诱因出现腹痛、腹胀,腹痛呈持续性钝痛,并伴有停止排气、排便。当地县医院诊断为小肠不全梗阻,给予抗炎及灌肠治疗后症状未见缓解,来我院就诊。查体：急性病容,腹式呼吸减弱,无胃肠蠕动波,肠鸣音减弱。下腹部局部膨隆,腹壁紧张,全腹压痛阳性,以右下腹为著,在右下腹触及大小约10 cm × 10 cm的包块,质硬、活动尚可。超声检查示：右下腹部分回肠及结肠扭曲成团状,呈肠襻聚集征,范围12.4 cm × 8.2 cm(图1A),该处肠壁水肿增厚,厚约0.6 cm,回声减低,CDFI：增厚的肠壁内未见明显血流信号(图1B);扭曲肠襻近端小肠肠腔扩张,最宽处4.5 cm,其内可见肠内容物往返流动;腹腔可见游离液性无回声区,最深处约2.2 cm。超声提示：1.右下腹部分回肠及结肠扭曲,呈肠襻聚集征;2.扭曲段回肠肠壁局限性增厚且无血流信号(提示：肠壁梗死可能性大);3小肠肠梗阻;4.腹腔少量积液。腹部平扫CT示：空肠及近段回肠扩张,其内充满液体密度影,右下腹部分梗阻段小肠走行不良,肠壁增厚、水肿,周围可见渗出,肠系膜密度增高(图2A)。提示：小肠梗阻(空肠及近段回肠为著),右下腹部分梗阻段小肠走行不良,建议增强扫描。增强后显示增厚的肠壁无明显强化(图2B)。提示：小肠梗阻,扭转不除外;小肠周围少量渗出性积液。完善相关检查后进行急诊手术治疗,手术见腹腔内有淡血色渗液,梗阻上段小肠扩张增粗、充血水肿;末端回肠经盲肠后方疝入后腹膜,将盲肠挤向前外侧;松解盲肠后方腹膜并将疝入的回肠取出,见回肠壁充血水肿,外观呈紫黑色,累及长度约60 cm,观察肠管无蠕动,该段肠系膜水肿,未见肠系膜表面血管博动(图     

LC-MS/MS同时测定5种探针底物代谢产物和快速评价细胞色素P450同工酶的活性

目的建立同时测定奥美拉唑（CYP2C19）、右美沙芬（CYP2D6）、睾酮（CYP3A4）、氯唑沙宗（CYP2E1）和甲苯磺丁脲（CYP2C9）5种探针底物代谢产物的Cocktail体外方法,快速评价药物对人肝微粒体细胞色素P450同工酶活性的影响。方法通过人肝微粒体与5种探针底物在还原系统NADPH的作用下,于37℃水浴条件下共同孵育,采用液质联用（LC-MS/MS）分析方法,测定探针底物的代谢产物生成量来评价各P450同工酶的活性。结果建立了同时测定5种P450同工酶活性的酶反应条件和LC-MS/MS分析方法,数据显示该方法具有良好的线性和分析灵敏度,以及具有良好的准确度、精密度、重现性,可用于药物间相互作用的体外快速评价。结论可用于体外快速评价药物对相应的CYP450亚型酶活性的影响,以预测潜在的药物相互作用。     

经直肠弹性成像结合灰阶超声对直肠癌诊断及分期的应用进展

直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤，弹性成像（UE）作为超声检查的新技术，可根据直肠肿瘤及周围正常组织的硬度间接判断肿瘤的良、恶性及分期，辅助传统灰阶超声提高诊断直肠癌的准确率。该文综述经直肠UE技术结合灰阶超声在诊断直肠癌中的应用进展。