基于网络药理学和分子对接研究淫羊藿治疗抑郁症的抗炎作用机制

目的:采用网络药理学方法预测淫羊藿治疗抑郁症的抗炎靶点及相关信号通路,探讨其抗抑郁作用的潜在机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库搜集和筛选淫羊藿的活性成分;利用PharmMapper服务器,TCMSP数据库对蛋白靶点进行预测和筛选;利用OMIM数据库,CTD数据库和GeneCards数据库筛选抑郁症的相关靶点以及抗炎靶点;通过DAVID数据库对关键抗炎靶点进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;利用Cytoscape 3.6.0软件构建淫羊藿"活性成分-作用靶点-信号通路"网络图,并对网络拓扑结构分析;采用GOLD分子对接软件对活性成分与关键抗炎靶点进行结果验证。结果:筛选得到淫羊藿与抑郁症相关的12个活性成分,30个作用靶点,5个关键抗炎靶点;GO功能富集得到生物过程65个,细胞组成4个,分子功能1个,KEGG通路富集分析得到41条,其中与炎症相关的信号通路9个;分子对接验证淫羊藿苷与关键抗炎靶点能够形成最佳复合体。结论:揭示了淫羊藿通过抗炎靶点及其相关信号通路网络作用于抑郁症的分子机制,为进一步研究淫羊藿抗抑郁作用提供了基础。     

特发性男性不育的分子遗传学诊断与生育指导

特发性男性不育是指男性不育症患者除有精子异常外,其余情况均正常,而患者出现精子异常的原因不明.研究证明,Yq11中无精子因子(azoospermia factor,AZF)的缺失,可引起不同程度的生精障碍[1],但随着辅助生殖技术的发展,AZF缺失患者依然可以生育后代,并且不同缺失类型辅助治疗对策各异.因此,有必要对特发性男性不育患者进行Y染色体AZF区域微缺失研究,从而对该类患者的诊断和生育指导提供依据.     

CYP1A1rs4646903单核苷酸多态性与宁夏地区男性不育相关性研究

目的分析CYP1A1(rs4646903,T/C)单核苷酸多态性与宁夏地区男性不育的相关性。方法采用病例-对照研究方法,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分别对204例男性不育患者和202例正常男性对照的CYP1A1 rs4646903单核苷酸多态性进行测定,分析基因型及等位基因频率在患者组和对照组的分布特点。结果相对于纯合野生基因型TT,未见CYP1A1 rs4646903杂合突变型TC(OR=1.07,95%CI=0.70～1.65)和纯合突变型CC(OR=1.41,95%CI=0.79～2.50)与男性不育有关联(P>0.05)。此外,相对于野生基因T,也未见突变基因C与男性不育有关联(OR=1.17,95%CI=0.88～1.55)。结论 CYP1A1 rs4646903单核苷酸多态性与宁夏地区男性不育无相关性。     

MMS2 和P53 基因对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨MMS2 siRNA与P53 siRNA对人高分化结肠癌细胞(THC-8307)的增殖与凋亡的相互调控作用。方法:以实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)分析检测细胞转染效率,选择沉默效率具有统计学意义的THC-8307细胞作为实验组,同时将未作处理的THC-8307作为空白对照,转染空质粒细胞作为阴性对照。采用qRT-PCR及Western blot分别检测干扰各组目的基因后其两基因相互关系及表达量。采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,以明确其对结肠癌细胞增殖与凋亡的作用。结果:实验组与对照组相比,分别沉默MMS2基因与P53基因的结肠癌细胞内P53与MMS2的mRNA与蛋白水平显著升高(P0.05)。沉默MMS2实验组其早期凋亡与晚期凋亡率增加(P0.05)。结论:MMS2和P53在结肠癌细胞增殖与凋亡方面起反向调控作用。     

宁夏地区汉族MTHFR基因C677T多态性与男性无精和严重少弱精的相关性分析

目的研究宁夏地区汉族人群5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因（MTHFR）C677T多态性与男性不育患者无精和严重少弱精的相关性。方法采用病例-对照研究方法,应用限制性片段长度多态性扩增技术（PCR-RFLP）分析宁夏地区汉族271例男性不育患者（其中无精患者158例、严重少弱精患者113例）和180例正常男性的MTHFR C677T等位基因频率及基因型分布特点。结果①不育患者与正常对照组MTH-FR C677T的各基因型分别为CC 27.7%vs 35.0%、CT 41.3%vs 47.2%和TT 31.0%vs 17.8%,两组间基因型分布及等位基因频率差异有统计学意义（P〈0.01）。②将不育患者分为无精患者组和严重少弱精患者组后,两组MTHFR C677T基因型分布均仍与正常对照组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MTHFR C677T多态性可能是宁夏汉族男性不育的易感性风险因素。     

REV3基因低表达对COLO-205细胞增殖的影响

目的检测REV3基因低表达后对COLO-205细胞增殖的影响情况。方法采用RNA干扰技术特异性的下调人类结肠癌细胞(COLO-205)中REV3基因的表达情况:实验组细胞加入的培养基中包含脂质体及降低REV3基因表达的质粒,阴性对照组细胞加入的培养基中包含脂质体及空质粒,空白对照组细胞只加入培养基。实时荧光定量PCR技术检测不同细胞REV3基因的相对表达量,通过细胞计数和MTT检测,比较REV3基因表达量不同的细胞生长增殖情况。结果 REV3基因的表达量降低后,COLO-205实验组细胞的增殖速度与对照组细胞相比较明显降低,差别有统计学意义(P<0.05);而阴性对照组和空白对照组的细胞增殖情况虽然有一定的差异,但差别没有统计学意义。结论特异性的下调REV3基因在COLO-205中的表达量,可能对该细胞的生长与增殖均具有一定的抑制作用。     

甲减患者Hb含量观察

本文对68例甲状腺机能减退(甲减)患者血红蛋白(Hb)的测定,结果显示,甲减患者平均Hb含量明显低于正常对照组(P〈0.01),现将结果报告如下。     

抗-HCV RIA在临床中的应用

近些年来．人们对乙型肝炎病毒(HBV)的致病作用及感染情况已逐步了解，但对丙型肝炎病毒(HCV)的认识还不够深入，有关HCV的报道也不多。本室用RIA对来自住院的186个肝病患者和120个健康查体者进行了丙型肝炎抗体(抗-HCV)检测，结果显示：健康组中HCV的感染率为3．3％，慢活肝中HCV的感染率为13．3％，     

沉默Rev1基因对人结肠癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨沉默Rev1基因对人高分化结肠癌细胞THC8307 X射线照射后增殖、凋亡的影响。方法 利用RNA干扰技术将Rev1基因的特异性片段转染THC8307细胞,用实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后细胞中目的基因的表达;实验分空白对照组、阴性对照组、Rev1 siRNA组。分别给予0、6 Gy X射线照射,运用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同时段（0、24、48、72、96 h）细胞增殖情况,并绘制增殖曲线;流式细胞仪（FCM）检测不同剂量X射线处理后的细胞凋亡;Western blot检测各组PCNA、γ-H2AX、P53、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 与空白对照组相比,6 Gy X射线照射后,沉默Rev1基因组细胞增殖速率明显降低（t=7.53,P<0.05）,凋亡明显增加（t=6.23,P<0.05）,增殖细胞抗原（PCNA）表达下降（t=4.39,P<0.05）,γ-H2AX表达升高（t=5.48,P<0.05）,P53表达升高（t=5.09,P<0.05）、Bax表达升高（t=3.32,P<0.05）、Bcl-2表达降低（t=6.13,P<0.05）。结论 沉默Rev1基因,抑制了X射线作用下的结肠癌细胞THC8307的增殖,促进了凋亡,增加了其对X射线的放射敏感性。     

人REV3基因与紫外线诱导突变形成原因的探讨

目的利用反义阻断REV3基因表达的人胚肾上皮细胞(HEK293-M-REV3-)检测其对紫外线(UVB)的敏感性及细胞动力学的改变,评价hREV3基因在紫外线诱发突变中的作用。方法体外培养HEK293-M-REV3-细胞,利用MTT法检测hREV3缺陷细胞系对UVB的敏感性,采用流式细胞技术DNA含量分析法检测细胞周期及DNA倍体指数(D I值)的变化,计算增殖指数PI值。结果HEK293-M-REV3-细胞系对UVB的IC50为47.97m J/cm2,其敏感性明显比对照细胞高,流式细胞技术检测结果显示,自发状态下HEK293-M-REV3-细胞系的S期比例增加,UVB处理后细胞G2-M期延长,随着处理后培养时间的延长,细胞周期停滞现象更明显,细胞的PI相应的有所改变。结论阻断hREV3基因表达,细胞对紫外线等物质敏感性增加,提示REV3基因参与哺乳动物细胞易误性跨损伤修复,易引起突变形成,原因可能与细胞周期的改变有关,由于REV3基因的低表达,细胞不能跨越损伤而使细胞周期停滞于致突变物质作用敏感的S期或G2-M期,引起DNA复制叉停滞,最终引起的结果是细胞的凋亡或死亡。