基于TGF-β/smad信号通路探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS细胞上皮间质转化过程的影响＊

目的 探究七方胃痛颗粒对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导人胃腺癌细胞AGS上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition， EMT）过程的影响及其潜在分子机制。方法 为了探究七方胃痛颗粒对TGF-β1处理的AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响，实验分为四组：AGS细胞对照组，EMT空白模型组，中药血清组，TGF-β/smad通路抑制剂组，分别利用CCK8、细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。此外，通过免疫荧光检测EMT过程中相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3）的表达水平。结果 与AGS细胞对照组相比，TGF-β1诱导EMT过程，显著促进AGS细胞增殖、迁移和侵袭，下调了E-cadherin的表达，上调了N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3的表达；与EMT空白模型组相比，中药血清组、TGF-β/smad通路抑制剂组显著抑制了细胞增殖、迁移和侵袭，上调了E-cadherin的表达，降低了N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3的表达。结论 七方胃痛颗粒通过调控TGF-β/smad信号通路从而抑制人胃腺癌AGS细胞的EMT过程。     

中医剖析肺气逆之治

正肺气逆为肺气叛逆而上,不能正常肃降平顺他脏,导致或咳,或喘,或便秘,或癃闭,或肝叛等各种病症。因所致各症中,咳、喘两症乃肺之本病所致,故多从肺论治。反观便秘、癃闭、肝叛等症,因其为大肠、膀胱、肝脏等脏腑之本病,故有治者从各本病脏腑论治,而忽略了肺气逆乱之机。部分医者虽注意肺气逆之机,但其所治,皆以一味降敛肺气为药,而不知肺气逆之治,当以降中有升,升降有度,如柳絮飘摆。近代名     

基于TFF3、ERK/NF-κB信号通路探讨加味七方胃痛颗粒对人胃癌细胞株SGC7901增殖凋亡的影响

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对人胃癌细胞株SGC7901肠三叶因子3(Trefoil Factor3,TFF3)的表达及其细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的调控机制。方法:参照血清药理学方法制备加味七方胃痛颗粒含药血清,分别用不同剂量的含药血清、5-氟尿嘧啶(5-FU)和生理盐水对SGC 7901进行培养。分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及流式细胞术检测细胞增殖及凋亡;采用western blot、RT-PCR检测细胞TFF3、NF-κB、ERK mRNA及蛋白表达水平。结果:与空白对照组相比,加味七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901的增殖、促进其凋亡(P0.05),并呈浓度、时间依赖性;中药血清干预后人胃癌细胞株TFF3、ERK、NF-κB蛋白和mRNA表达降低,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P0.05)。结论:在体外试验中,加味七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901的增殖并促进其凋亡,可能通过下调胃癌细胞TFF3、ERK/NF-κB蛋白的表达水平,从而到达抗癌作用。     

NF-κB基因沉默对人胃癌SGC7901细胞增殖影响及机制探讨

目的:研究NF-κB基因沉默对人胃癌细胞SGC7901增殖及TFF3、ERK表达的影响。方法:应用脂质体法将靶向NF-κB的干扰RNA(si RNA)转染入胃癌细胞株SGC7901中。采用MTT法和流式细胞术法检测NF-κB基因沉默对SGC7901细胞的增殖抑制率和细胞凋亡情况,运用Real time PCR和Western blot免疫蛋白印迹法检测SGC7901细胞内TFF3、ERK的表达。结果:MTT法显示NF-κB基因沉默组癌细胞抑制率大于空白载体组和对照组(P0.01);流式细胞术法表明NF-κB基因沉默组细胞凋亡比例达12.60%,明显高于空白载体组和对照组(P0.01);RT-PCR和Western Blot检测示,经NF-κB基因沉默后,细胞内NF-κB、TFF3、ERK m RNA及蛋白表达量下降明显。结论:NF-κB基因沉默可抑制胃癌细胞的增殖并促进其凋亡。NF-κB基因作为胃癌治疗的分子靶点可能具有重要意义。     

陈国忠治疗胃食管反流病经验

介绍陈国忠教授治疗胃食管反流病的临床经验。阐述胃食管反流病的主要病因病机为脾胃枢机不利。在临证辨治中紧扣病机,提出以疏调枢,疏调气机、化湿升降,遂其本性的治疗方法。在张锡纯《医学衷中参西录》升降汤基础上创化湿升降汤加减治疗,取得较好疗效。     

加味七方胃痛颗粒对裸鼠原位移植胃癌中TFF3表达及ERK/NF-кB信号通路影响

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对裸鼠原位移植胃癌三叶因子3(trefoil factor family3,TFF3)的表达及其细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/核因子кB(nuclear factor-кB,NF-кB)信号通路的调控机制。方法:复制裸鼠胃癌原位移植模型,随机分成正常组(即空白对照组),氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组,5-FU+加味七方胃痛颗粒组,加味七方胃痛颗粒组,每组15只。采用Western blot、RT-PCR检测加味七方胃痛颗粒对裸鼠原位移植胃癌中TFF3、NF-кB、ERK基因及蛋白表达的影响。结果:加味七方胃痛颗粒组TFF3、NF-кB、ERK m RAN及蛋白表达量较正常组降低(P0.05),5-FU+加味七方胃痛颗粒组TFF3、NF-кB、ERK m RAN及蛋白表达量较5-FU组降低(P0.05)。结论:加味七方胃痛颗粒可能通过抑制ERK/NF-кB信号通路参与下调裸鼠原位移植胃癌TFF3、NF-кB、ERK表达水平,从而达到抗癌作用。     

基于ZEB2、14-3-3ζ/TGF-β/smad通路探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS细胞EMT的影响

目的探讨七方胃痛颗粒对ZEB2、14-3-3ζ/TGF-β/smad通路介导胃癌EMT和获得浸润侵袭转移能力过程中的作用和机制及对EMT细胞的ZEB2、14-3-3ζ表达的影响,为七方胃痛颗粒防治胃癌提供理论依据。方法参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒含药血清,观察七方胃痛颗粒中药对AGS细胞、TGF-β1诱导AGS细胞形成EMT细胞的干预情况,分别采用细胞划痕试验、Transwell细胞侵袭试验和MTT法检测细胞侵袭迁移穿透能力;采用Western Blot、RT-PCR法检测细胞ZEB2、14-3-3ζ的转录及表达情况。结果与TGF-β1/Smad组和空白对照组相比,七方胃痛颗粒能抑制人胃腺癌AGS细胞及EMT细胞的增殖、侵袭和穿透能力(P<0.05),且EMT细胞中ZEB2、14-3-3ζ蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),并呈时间依赖性。结论在体外试验中,七方胃痛颗粒能抑制人胃腺癌AGS细胞及其EMT细胞的增殖、侵袭和穿透能力,其机制可能与抑制其ZEB2、14-3-3ζ及TGF-β/smad通路相关,从而达到抗癌作用。     

基于TGF - β/smad信号通路探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS细胞上皮间质转化的影响

目的:基于TGF-β/smad信号通路探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS-EMT细胞ZEB2、E-cad及Vimentin的影响及可能的机制。方法:用TGF-β1处理AGS细胞建立上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)模型,将细胞分为空白组、七方胃痛颗粒(含药血清+EMT模型)组、LY2109761(TGF-β/Smad抑制剂+EMT模型)组,用RT-PCR、Western Blot法检测ZEB2、E-cad及Vimentin的表达。结果:与空白组比较,七方胃痛颗粒及LY2109761干预后能上调E-cad蛋白及其mRNA的表达,下调ZEB2蛋白及其mRNA和Vimentin蛋白及其mRNA的表达(P<0.05),并呈时间依赖性。与七方胃痛颗粒组相比,LY2109761组ZEB2蛋白及其mRNA的表达明显下调(P<0.05)。结论:七方胃痛颗粒与LY2109761作用相似,其可能是通过抑制TGF-β1/Smad信号通路,上调E-cad表达,下调ZEB2及Vimentin表达,抑制EMT形成,从而抑制人胃腺癌AGS细胞的上皮-间质转化。     

健脾散精汤治疗脾虚水停证肝硬化腹水临床研究

目的:观察健脾散精汤治疗肝硬化腹水脾虚水停证的临床疗效,并初步探索其中医病因病机及所蕴涵的现代科学性。方法:选取120例肝硬化腹水脾虚水停证患者,随机分为治疗组(60例)和对照组(60例),治疗组采用健脾散精汤+常规西医方案,对照组采用安慰剂+常规西医方案。对比两组患者治疗前后中医证侯疗效,西医临床综合疗效(水肿、腹围、尿量、体质量),Child-Pugh评分,彩超腹水深度,生活质量调查表(SF-36)的变化。结果:①两组患者治疗后中医证侯疗效评定,西医综合疗效评定,Child-Pugh评分,彩超腹水深度,SF-36评分均较治疗前显著改善(P0.05);②治疗后治疗组对改善中医证侯,Child-Pugh评分,彩超腹水深度,SF-36评分均优于对照组(P0.05);③治疗后治疗组与对照组对改善西医综合疗效总有效率分别为96.55%和84.74%,治疗组优于对照组(P0.05)。结论:健脾散精汤治疗肝硬化腹水脾虚水停证疗效确切,值得临床推广。