基于18SrRNA序列的云南大叶千斤拔与细叶千斤拔根内丛枝菌根真菌鉴定

目的:调查云南省大叶千斤拔(Flemingia macrophylla)与细叶千斤拔(Flemingia lineata)根内丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)群落结构多样性。方法:使用巢式-PCR、克隆、限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)分析及测序技术。结果:共获得558个含有丛枝菌根真菌18S rRNA片段的克隆子,经RFLP分析后得到83个RFLP类型,DNA序列分析可将其划分为23个可操作分类单元(Operational Taxonomic Units,OTUs),分属于5个科,Glomeraceae为优势类群。在MaarjAM数据库中进行比对后,23个OTUs可鉴定为18个虚拟分类分子种,分布于13种不同的生境。经统计分析大叶千斤拔与细叶千斤拔根内丛枝菌根真菌群落组成比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:比较大叶千斤拔与细叶千斤拔根内丛枝菌根真菌群落差异,结合丛枝菌根真菌在生态系统中的分布特点,为种植千斤拔属植物的选址提供有力地环境指标数据,并为筛选促生菌株提供依据。     

我国金线兰资源特征及繁育技术研究进展

金线兰(Anoectochilus roxburghii)是兰科开唇兰属药用物种,其全草的鲜品或干品可作为“金线莲”药材使用,具有降血糖、降血脂、抗炎镇痛等功效。在广东、福建等地区的食药用历史悠久,延续至今。随着“药食同源”概念的广泛认同、市场需求激增,野生金线兰资源已远不能满足供应,处于濒危状态,市场价格逐年推高。建立人工繁育体系,是缓解野生资源紧缺的重要手段。明确金线兰资源特征,则是优选种质资源、优化繁育体系、建立有效评价标准的关键依据。因此,本文从本草考证、资源分布、资源鉴定、化学成分特征与药理活性、繁育技术进行综述,旨在为我国金线兰资源可持续利用和后续深入研究提供参考。     

指尖血与静脉血HBsAg检测结果的比较分析

目的 比较指尖血和静脉血HBsAg检测结果的一致性,评价指尖血HBsAg检测结果的可靠性.方法 对40例HBsAg阳性者(HBsAg<10 IU/ml 11例、10～200 IU/ml 12例、>200 IU/ml 17例),同时采集指尖末梢血150μl及静脉血3 ml,用美国雅培i2000SR微粒子免疫发光仪进行HBsAg定量测定.结果 40例HBsAg阳性者静脉血与指尖血检测结果比较,差异无统计学意义(t=1.940,P>0.05);r=0.9993.各HBsAg浓度组,低浓度组r=0.9960、中浓度组r=0.9866和高浓度组r=0.9991.结论 指尖血与静脉血HBsAg在低、中、高浓度组均密切相关.提示末梢血清经过一定比例的稀释,应结合试剂及实验室条件考虑低浓度HBsAg漏检的问题.     

铁皮石斛转录因子基因DoWRKY3的克隆与分子特性分析

目的克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛转录因子基因DoWRKY3,并进行生物信息学和表达模式分析。方法采用RT-PCR和RACE技术获取基因全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性;用软件DNASTAR 6.0和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助定量PCR检测基因表达模式。结果分离到DoWRKY3基因(GenBank注册号KT957549),cDNA全长2 065 bp,编码1条由509个氨基酸组成的多肽,相对分子质量55 580,等电点6.58;推定的DoWRKY3氨基酸序列具有植物WRKY蛋白家族保守的2个WRKY结构域(217~279、381~449)、2个WRKYGQK位点和2个C_2H_2型锌指结构元件(C-X_4-C-X_(22-23)-H-X_1-H);该蛋白预测无信号肽或跨膜域,定位在细胞核;DoWRKY3蛋白与多种植物WRKY蛋白一致性较高(46.3%~57.4%),与拟南芥At WRKY3、At WRKY4和丹参Sm WRKY54蛋白等亲缘关系近,聚在WRKY分子进化树的Group 1分支;DoWRKY3基因具有组织表达特异性,其转录本在石斛根和叶中表达量较高,分别为茎中的2.32倍和1.69倍。结论 DoWRKY3基因全长的分子克隆与特征分析,为深入研究该基因在铁皮石斛生长发育、逆境生理以及次级代谢调控中的生物学功能奠定基础。     

UHPLC-MS/MS同时测定金线兰中7种成分含量及其分布规律研究

基于液质联用(UHPLC-MS/MS)技术,建立快速同时定量金线兰[Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.]中7种不同极性成分(金线莲苷、水仙苷、槲皮素、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷)的方法。采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18 (2.1 mm×100 mm; 1.7μm)色谱柱,以乙腈为流动相A, 0.1%甲酸-水溶液为流动相B, 0.2 mL·min^-1的流速进行梯度洗脱,柱温为30℃,进样量为2μL,分析时间为8 min。质谱以电喷雾电离源(electron spray ionization, ESI),正、负离子模式同时检测,优化各成分最佳质谱条件。结果发现, 7种成分在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均≥0.998 0,稳定性、精密度和重复性良好,平均加样回收率为97.71%～103.33%。经聚类热图和RDA (redundancy analysis)分析,发现金线莲苷主要分布在茎中,叶中次之,根中最少。生长6个月的...