木瓜总黄酮抗肿瘤活性研究

目的:研究木瓜总黄酮抗肿瘤活性。方法:通过乙醇-正丁醇萃取方法提取木瓜总黄酮;通过分子药物筛选模型、酶联免疫法检测木瓜总黄酮对免疫共刺激分子程序性死亡因子(PD)-1与其配体(PD-L1)结合的抑制作用。通过H22肿瘤细胞模型小鼠,观察木瓜总黄酮对模型小鼠体内肿瘤体积与存活时间的影响;流式细胞仪测定小鼠腹水中肿瘤细胞及淋巴细胞表面相关分子的表达。结果:正丁醇馏分中木瓜总黄酮占85%。木瓜总黄酮具有抑制PD-1和PD-L1结合的作用,且抑制效率具有剂量依赖性。木瓜总黄酮在复制模型10 d后对模型小鼠体内肿瘤有明显抑制作用;对S180细胞表面PD-L1表达具有明显抑制作用,对体内淋巴细胞侵润有明显增强作用。结论:木瓜总黄酮可以抑制PD-1与PD-L1的结合,同时可降低肿瘤细胞表面PD-L1的表达从而促进机体对肿瘤的免疫应答,最终达到抑制肿瘤生长,提高肿瘤鼠存活率的作用。     

竹节参皂苷不同浓度乙醇洗脱物对肝细胞损伤的保护作用

目的：研究不同浓度竹节参总皂苷对游离脂肪酸诱导的肝细胞（ HepG2）损伤的保护作用。方法制备竹节参总皂苷不同浓度乙醇洗脱（10％、30％、60％及90％）的有效部位，应用棕榈酸（ PA ）诱导肝癌细胞HepG2脂肪变性的细胞模型（模型组），正常组应用DMSO。提取细胞总RNA检测内质网应激标志基因葡萄糖调节蛋白（ GRP－78）、CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（ CHOP）以及肿瘤坏死因子α（ TNF－α）的表达水平，通过噻唑蓝（ MTT）方法反映细胞存活状况，以及油红O染色，观察细胞脂肪变性情况。结果 MTT结果显示模型组与正常组比较，HepG2细胞存活率明显降低，竹节参提取物中，90％乙醇洗脱组的细胞存活率较模型组明显升高，差异有统计学意义；油红O染色其细胞内泡状脂滴数目较模型组明显减少，细胞肿胀减轻，细胞数目增多，而其他萃取部位效果不明显；RT－PCR显示，模型组内质网应激相关基因表达量明显高于正常组，而竹节参90％乙醇萃取部位则较模型组有明显降低，与正常组比较差异无统计学意义。90％乙醇洗脱组经高效液相色谱法（ HPLC）测定，其主要成分为齐墩果烷型皂苷。结论竹节参齐墩果烷型皂苷能明显降低PA诱导的HepG2细胞脂肪变性，其机制与干预内质网应激相关。     

miR-34 a在肿瘤化疗耐药性的研究进展

肿瘤的发生发展是一个多因子、多步骤、极其复杂的生物学过程,易复发、转移、常规化疗差、预后不良是困扰临床的重要难题. 随着药物的使用,肿瘤多耐药性问题随之出现,而肿瘤多耐药性则是肿瘤化疗失败的关键因素,给患者、家庭以及社会造成巨大的精神和经济负担. 以往的研究表明,肿瘤多耐药性主要与DNA修复能力增强、谷胱甘肽S-转移酶、拓扑异构酶Ⅱ在数量和功能上的改变、多耐药相关蛋白增高等相关[1-2].     

竹节参多糖对肝细胞损伤的影响

目的：探讨竹节参多糖对脂肪变性肝细胞的保护作用。方法制备竹节参多糖不同浓度（30%、60%及90%）乙醇洗脱部位,应用棕榈酸（PA）诱导HepG2脂肪变性的细胞模型,筛选药物的干预活性,采用MTT法观察细胞存活状况,油红O染色观察细胞脂肪变性情况,提取细胞总RNA检测相关因子的表达水平。结果 MTT法检测结果显示,30%醇沉组细胞存活率较模型组明显升高;油红 O 染色其细胞内泡状脂滴数目较模型组明显减少;RT-PCR检测结果显示,内质网应激相关基因葡萄糖调节蛋白、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白及炎性因子的表达较模型组明显降低。结论竹节参多糖30%乙醇洗脱部位能明显降低PA诱导的HepG2细胞脂肪变性,其机制可能是通过干预内质网应激反应实现。     

竹节参总皂苷对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的影响

目的探讨竹节参总皂苷对四氯化碳（CCl4）诱导小鼠肝损伤的保护作用。方法体外实验采用HepG2细胞株建立CCl4诱导肝细胞损伤模型。体内实验采用1%CCl4油剂处理Balb/c小鼠造成急性肝损伤模型,随机分为正常组、模型组、药物组,药物组灌胃20 mL/kg竹节参总皂苷,正常组和模型组灌胃等量无菌生理盐水,连续8 d。MTT法观察肝细胞存活状况,HE染色观察肝组织形态,RT-PCR检测转化生长因子-β（TGF-β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和Toll样受体4（TLR4）mRNA表达。结果与正常组比较,模型组存活细胞明显减少（P〈0.01）;与模型组比较,药物组存活细胞明显增多（P〈0.01）。HE染色镜下观察,药物组小鼠肝组织损伤较模型组明显改善。RT-PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组TGF-β、TNF-α和TLR4 mRNA表达水平明显升高;与模型组比较,药物组TGF-β、TLR4、TNF-αmRNA水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论竹节参总皂苷对CCl4诱导小鼠肝损伤具有保护作用。