探索细胞免疫组化染色抗原修复方法的合理选择

病理诊断中活体组织免疫组化技术已经相当完善,但是细胞免疫组化技术还不是特别成熟.主要存在两个问题:①如何充分暴露抗原决定簇,提高细胞膜的通透性,使抗体大分子物质易于进入细胞,以便于抗体与抗原更好的结合;②恰当地固定,尽可能保持细胞的形态结构完整,防止脱片.我们针对现在常用的细胞免疫组化修复方法并结合活体组织免疫组化的修复方法做了比较深入的染色实验与研究,希望能找到对细胞免疫组化更为合理的抗原修复方法.     

大麻素受体2在尖锐湿疣和子宫颈癌中的表达及意义

目的观察与分析大麻素受体2(CB2)在尖锐湿疣和子宫颈癌中的表达及意义。方法采集尖锐湿疣、宫颈上皮内瘤变及子宫颈癌患者标本,以免疫组织化学法及实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测CB2在组织中的表达情况。结果免疫组织化学法检测显示,CB2在尖锐湿疣、子宫颈上皮内瘤变、子宫颈癌组织中均有表达;累积光密度值分析显示,CB2在尖锐湿疣全子宫切除术后阴道残端出血组织中表达量最低(25 361.33±15 462.71),在子宫颈癌组织中表达量最高(69 863.66±14 203.88),子宫颈上皮内瘤变组织中则居中,但随子宫颈上皮内瘤变分级程度不断增高而表达量增加,子宫颈上皮内瘤变低分级为63 571.98±13 417.21,高分级为65 719.27±13 651.09,差异有统计学意义(P<0.05);CB2 mRNA在尖锐湿疣组织中表达量最低,与内参β-actin mRNA比值为1.35±0.31,在子宫颈癌组织中表达量最高,与β-actin mRNA比值为7.49±0.98,子宫颈上皮内瘤变组织中表达居中,呈现随子宫颈上皮内瘤变分级程度增高而增加的趋势,其在低分级组织中为3.54±0.42,高分级组织中为5.56±0.38,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 CB2可能参与了子宫颈癌的发生发展过程。     

P16及Ki67在恶性潜能未定子宫平滑肌肿瘤中的表达及临床意义

目的检测P16及Ki67等抗体在恶性潜能未定的子宫平滑肌肿瘤(smooth muscle tumor of uncertain malignant potential,STUMP)中的表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测子宫11例STUMP、29例平滑肌瘤(leiomyoma,LM)及16例平滑肌肉瘤(leiomyosarcom,LMS)中P16及Ki67表达情况。结果 P16在STUMP、LM和LMS的阳性率分别为63.6%(7/11)、13.8%(4/29)及93.8%(15/16),差异有统计学意义(P<0.05)。STUMP中有2例P16呈弥漫强阳性表达,该2例均复发。Ki67阳性指数在STUMP、LM和LMS的平均数分别为8.9%、7.4%及41.6%,差异有统计学意义(P<0.05)。11例STUMP及29例LM中Ki67阳性指数均不超过20%;16例LMS中Ki67阳性指数均>20%,其中9例(56.3%)超过30%。结论 P16及Ki67有可能成为STUMP诊断、鉴别诊断与判断预后的有用指标。     

宫颈癌前病变中人乳头状瘤病毒16/18DNA整合状态的研究

目的探讨宫颈癌及癌前病变中人乳头状瘤病毒(HPV)16/18DNA整合入宿主基因组的发生情况。方法选取128例HPV16/18阳性患者的液基细胞学剩余标本,其中炎症18例,CINⅠ35例,CINⅡ29例,CINⅢ24例,SCC22例。采用荧光定量PCR检测HPV16/18的E2和E6基因,根据E2/E6比值判定HPV16/18DNA的存在状态。结果①确定0.8和0.83分别为荧光定量PCR区分游离型和混合型HPV16/18的界值。②HPV16/18整合发生率与不同程度的宫颈病变有关,并且随着宫颈病变级别的升高,整合发生率呈上升趋势。③混合型在CINⅡ和CINⅢ中所占比例最高。结论HPV16/18整合是宫颈癌变的早期事件,与宫颈癌前病变的进展有关;荧光定量PCR可以作为细胞学筛查的一种有效方法,以发现向宫颈高度鳞状上皮病变、宫颈癌发展的高危患者。     

液基薄层细胞学(TCT)检查在宫颈病变筛查中的应用

子宫颈癌是严重威胁妇女健康的主要疾病之一,在女性中的发生率仅次于乳腺癌,位居第二.由于宫颈癌存在着一个较长的、可逆转的癌前病变期,早期宫颈癌患者5年治愈率高达90%.因此宫颈癌的筛查一直受到人们的关注,如能在癌前病变阶段得到早期诊断及治疗,则可明显降低宫颈癌的发生率和病死率.目前,作为新一代的细胞采集技术-液基薄层细胞学(TCT)检查改变了传统操作方法,标本取出后立即洗入细胞保存液中,保留了取材器上所得到的全部标本,经全自动制片过程达到高质量、超薄层细胞于载玻片上,明显提高了宫颈阴道细胞学疾病诊断的准确性,降低了以往宫颈巴氏涂片检查的假阴性率,在宫颈阴道细胞学疾病的诊断、治疗、监测及随访等方面为临床医生提供了可靠的依据.现将本院2008年10月至2010年10月妇科门诊行宫颈液基细胞学检查1244例患者结果作回顾性分析.报道如下.     

子宫颈液基细胞学诊断细菌性阴道病的标准初探

目的 探讨液基涂片中细菌性阴道病的诊断标准.方法 以液基涂片中出现线索细胞的168例患者为研究对象,以Amsel法为诊断细菌性阴道病的金标准,对液基涂片中的两种诊断标准进行评价.结果 与Amsel法相比,以线索细胞≥20%、无中性粒细胞背景、乳酸杆菌缺乏为诊断标准的敏感度、特异度、阳性预告值、阴性预告值、准确度分别为90.11%、97.40%、97.62%、89.28%、93.45%,两者间差异无统计学意义(P＞0.05).以线索细胞≥20%、乳酸杆菌缺乏为诊断标准的敏感度、特异度、阳性预告值、阴性预告值、准确度分别为93.41%、59.74%、74.56%、85.18%、77.98%;与Amsel法相比,差异有显著性(P＜0.05).结论 以子宫颈液基涂片中线索细胞≥20%、无中性粒细胞背景、乳酸杆菌缺乏为细菌性阴道病的诊断标准具有较好敏感度,特异度及准确度.     

FISH 与 IHC 在乳腺癌 HER–2 基因扩增检测中的应用价值

〔摘 要〕 目的：分析荧光原位杂交技术（FISH）与免疫组织化学法（IHC）在乳腺癌人表皮生长因子受体 –2（HER–2） 基因扩增检测中的应用价值。方法：选取惠州市第一人民医院 2018 年 1 月至 2020 年 12 月收治的首发乳腺癌患者 103 例作 为研究对象，收集患者组织穿刺标本以及手术切除组织标本，分别应用 IHC 以及 FISH 对患者 HER–2 进行检测，对两种方 法的检测结果进行统计和分析。结果：103 例乳腺癌组织标本检测结果显示：HER–2 蛋白（–）或（+）者 9 例，（++）者 42 例，（+++）者 52 例；基因扩增情况为：阳性（扩增）72 例，阴性（未扩增）31 例。两种方法的检查结果一致性较高 （Kappa = 0.779，P ＜ 0.05）。结论：IHC 以及 FISH 均可作为对乳腺癌患者 HER–2 基因