Ento-Ⅰ涂膜剂对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究Ento-Ⅰ涂膜剂对大鼠脑缺血再灌注损伤的预防作用,并评价其对小鼠的镇痛效果和抗凝活性。方法采用线栓法建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,雄性大鼠56只,随机分为假手术组、空白基质组、生理盐水组、Ento-Ⅰ涂膜剂预防给药组（6.67、3.33、1.67 mg/kg）、奥扎格雷钠注射液组（8.3 mg/kg,ip）共7组,通过神经病学评分、TTC染色计算脑梗死面积评价Ento-Ⅰ涂膜剂的抗脑缺血作用;通过醋酸扭体实验测定Ento-Ⅰ涂膜剂的镇痛作用：将60只昆明种小鼠随机分成空白基质组,阿司匹林灌胃组（80 mg/kg）、阿司匹林涂膜剂组（80 mg/kg）、Ento-Ⅰ涂膜剂给药组（5、10和20 mg/kg）,末次给药后1 h腹腔注射0.7%醋酸溶液,观察并记录小鼠扭体反应和扭体次数;并采用毛细玻管法测定小鼠体外凝血时间,以评价Ento-Ⅰ涂膜剂的抗凝活性。结果醋酸扭体实验结果显示,与空白基质组小鼠扭体次数相比,Ento-Ⅰ涂膜剂各剂量组（5、10、20 mg/kg）能显著降低醋酸致小鼠扭体次数并提高扭体抑制率（抑制率分别是21.79%、48.89%、56.15%）,且呈剂量效应趋势;毛细玻管法测定小鼠凝血时间,其中Ento-Ⅰ涂膜剂10和5 mg/kg的凝血时间分别为（155.20±54.19）和（155.80±73.84）s,与生理盐水组（92.10±24.61）s比较,能明显延长小鼠体外凝血时间（P＜0.05）;与空白基质组（80.40±48.09）s比较,其差异也有统计学意义（P＜0.01）;线栓法致大鼠脑缺血再灌注损伤实验结果显示,在脑缺血再灌注24 h时,与生理盐水组的大鼠神经病学评分（2.33±0.52）比较,Ento-Ⅰ涂膜剂3.33 mg/kg大鼠的神经病学评分（1.00±0.00）明显改善（P＜0.01）;据TTC染色后脑梗死面积计算结果显示,生理盐水组和空白基质组的脑梗死率分别为（24.89±7.24）%和（27.72±7.89）%,Ento-Ⅰ涂膜剂6.67和3.33 mg/kg的脑梗死率则分别为（14.01±2.65）%和（14.73±4.94）%,与2个模型组比较,Ento-Ⅰ3.33和6.67 mg/kg均能显著降低大鼠脑缺血再灌注损伤后的脑梗死率（P＜0.01）。结论 Ento-Ⅰ涂膜剂有较强的镇痛作用和抗凝活性,并能降低大鼠脑缺血再灌注损伤后神经病学评分、显著降低脑梗死率,可能以此实现其抗脑缺血作用。     

尼莫地平对MCAO/R模型大鼠不同时间点血流灌注量的影响

目的:利用激光散斑血流成像技术观察尼莫地平对大鼠大脑中动脉栓塞模型脑血流灌注量的影响。方法:成年雄性SD大鼠,采用改良线栓法制备大脑中动脉梗塞/再灌注模型。利用激光散斑血流成像技术观测造模前,缺血再灌注0.5、1、2、24h后脑血流灌注量情况,并对选定区域血流进行分析,再灌注24h TTC染色观察脑梗死体积。结果:造模成功后大鼠右侧脑血流明显减少,灌胃给4mg/kg尼莫地平后,大鼠局部脑血流渐渐增加,脑梗死面积减少,脑组织含水量减少。结论:尼莫地平能显著增加MCAO/R模型大鼠血流量。     

HPLC法同时测定利胆解毒胶囊中异土木香内酯和土木香内酯的含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定利胆解毒胶囊中异土木香内酯和土木香内酯含量的方法。方法：采用Diamonsil Plus C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液（50:50），流速1.0 mL·min-1，检测波长210 nm，柱温30.0 ℃。结果：异土木香内酯、土木香内酯线性范围分别为0.044～1.325 μg（r=0.999 98）和0.038～1.149 μg（r=0.999 97）；平均回收率分别为98.55%和98.68%，RSD分别为0.86%和0.89%。测定4批样品，结果每粒含异土木香内酯和土木香内酯的含量分别在0.64～1.08 mg和0.43～0.68 mg之间。结论：该方法操作简便、重复性好、结果准确，可作为利胆解毒胶囊质量的控制方法。     

Ento-Ⅰ涂膜剂的镇痛及其抗凝抗血栓形成作用

目的：研究Ento-Ⅰ涂膜剂对小鼠的镇痛作用和家兔的体外抗凝活性,并观察其对胶原-肾上腺素合剂诱导小鼠体内血栓形成的保护作用。方法采取热板法测定Ento-Ⅰ涂膜剂的镇痛作用;通过胶原-肾上腺素合剂诱导小鼠体内血栓形成模型,观察Ento-Ⅰ涂膜剂对小鼠死亡数、小鼠偏瘫恢复数、小鼠偏瘫开始形成时间、小鼠生存时间及小鼠偏瘫恢复时间的影响;通过家兔预防给药,测定家兔血浆凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）,以研究Ento-Ⅰ涂膜剂的抗凝活性。结果热板镇痛法实验结果显示,与生理盐水组比较,Ento-Ⅰ涂膜剂组能显著延长小鼠给药后30、60和90 min的痛阈值（P＜0.01）;且涂膜剂能有效降低胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠血栓性偏瘫引起的死亡率,提高小鼠偏瘫恢复率（P＜0.05）。与波立维组比较,Ento-Ⅰ涂膜剂2 mg/kg组能明显缩短小鼠偏瘫恢复时间（P＜0.05）。与生理盐水组比较,Ento-Ⅰ涂膜剂4.65 mg/kg组能显著延长家兔血浆TT、PT和APTT（P＜0.05、P＜0.05和P＜0.01）。结论 Ento-Ⅰ涂膜剂具有镇痛、抗凝、抗血栓形成作用,是一种有临床应用前景的治疗血栓性疾病的药物。     

蜜蜂蜂毒对大鼠急性血瘀证的影响

目的:观察蜜蜂蜂毒(Bee venom,BV)对大鼠急性血瘀证的影响。方法:以皮下大剂量注射盐酸肾上腺素(Adrenalin hydrochloride,A)后再施以冰水游泳复制急性血瘀模型。通过测定血液流变学、凝血四项、纤溶活性等各项指标评价BV对大鼠急性血瘀证的影响。结果:与NS模型组比较,BV中剂量组不同切变率的全血粘度均显著降低(P0.05或P0.01);BV高、中、低剂量组血浆粘度、红细胞聚集指数、卡松粘度均有降低趋势;BV高、低剂量组PT、APTT有延长趋势,中、低剂量组TT有延长趋势;BV中剂量组可显著降低FIB含量(P0.01)。结论:BV具有改善大鼠急性血瘀证的作用,其机制与降低血液粘度、FIB含量有关。     

膜翅目昆虫提取物Ento-Ⅱ涂膜剂的镇痛及活血化瘀作用研究

目的研究膜翅目昆虫提取物Ento-Ⅱ涂膜剂的镇痛及活血化瘀作用,为相关药物的开发提供科学依据。方法采用经典热板法和扭体法作为镇痛实验模型,观察Ento-Ⅱ涂膜剂对小鼠的镇痛作用;大鼠sc大剂量盐酸肾上腺素后,施以冰水浸泡制备急性血瘀模型,采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,测定血液流变学相关指标。结果在镇痛实验中,与对照组比较,Ento-Ⅱ涂膜剂20、10、5 mg/kg能显著延长小鼠给药后30、60、90 min的痛阈值,明显减少小鼠15 min内的扭体次数,显著延长小鼠扭体的潜伏期(P0.01)。在血瘀合并脑缺血实验中,与模型组比较,Ento-Ⅱ涂膜剂6.67、3.33、1.67 mg/kg组24 h时大鼠神经功能评分和全血黏度显著降低(P0.01);3.33 mg/kg组大鼠血浆黏度和红细胞聚集指数显著降低(P0.05);6.67、3.33 mg/kg组大鼠卡松黏度显著降低(P0.01)。结论 Ento-Ⅱ涂膜剂具有明显的镇痛作用和活血化瘀作用。