激动M_3受体对间隙连接蛋白43表达的影响

目的探索激动心肌M3受体后间隙连接蛋白43的变化情况,进一步发现M3受体作为抗心律失常药物作用新靶点的作用机制。方法通过免疫组化、划痕标记荧光传输技术结合激光共聚焦显微镜和RT-PCR的方法,研究激动M3受体对间隙连接蛋白43表达的影响。结果证实激动M3受体可以改善细胞和细胞之间的通讯,改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构,且其磷酸化水平在间隙连接蛋白的重构过程中发挥了重要作用,并且还发现激动M3受体可以恢复病理条件下下降的间隙连接蛋白43的mRNA水平。结论激动M3受体可以改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构,并且其磷酸化形式在闰盘重构中发挥重要的作用。     

积分法:一种药理学中分析电压依赖性瞬时外向钾电流的方法(英文)

目的　评价一种药理学中分析电压依赖性瞬时外向钾电流 (Ito)的积分方法。方法　Ito的失活相可被 2指数或 3指数方程拟合。原始电流曲线下面积 (AUC)可通过指数方程积分获得。以细胞膜电容标准化后的曲线下面积表示除极化时程中钾离子的净通量 ,作为比较指标。钙调磷酸酶过表达转基因鼠心肌细胞表现Ito下调 ,此数据用于验证Ito的积分分析方法的可靠性。结果　AUC可通过 3指数或2指数方程的积分公式获得 :AUC =A1τ1+A2 τ2 +A3τ3+A0 t -A1τ1e-t/τ1-A2 τ2 e-t/τ2 -A3τ3e-t/τ3或AUC =A1τ1+A2 τ2 +A0 t-A1τ1e-t/τ1-A2 τ2 e-t/τ2 。小鼠心室肌 5 0 %和 90 %动作电位时程分别约为 10ms和 30ms。将Ito0～ 10ms (AUC50 )和 0～ 30ms(AUC90 )的曲线下面积以细胞膜电容进行标准化。野生型鼠心肌细胞的AUC50 和AUC90 明显高于钙调磷酸酶过表达转基因鼠 ,此结果与转基因鼠心室肌细胞动作电位时程延长相一致 ,与前期发表结果一致 (钙调磷酸酶过表达转基因鼠心肌细胞Ito各成分下调 )。结论　积分法是药理学中一种简便准确的分析Ito的方法。     

大鼠心室肌M3受体与间隙连接蛋白43作为抗心律失常药物靶点的综合研究

目的在蛋白质分子水平研究心律失常相关蛋白质M₃受体与间隙连接蛋白43之间的结构相互作用，并为其作为筛选药物靶点提供依据。方法通过免疫组化结合激光共聚焦显微镜，及免疫沉淀与免疫印迹技术，研究M受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位关系。结果证实了大鼠心室肌细胞膜蛋白中M₁～M₅等5个亚型的存在；观察到大鼠单个心肌细胞膜上M₃受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位；发现M受体各亚型与间隙连接蛋白43均存在结构整合，且一定浓度离子型去垢剂可破坏M₃受体与间隙连接蛋白43的结构整合关系，并进一步发现参与M₃受体结构整合的是间隙连接蛋白43的磷酸化形式。结论大鼠心室肌M受体亚型与间隙连接蛋白43的磷酸化形式存在结构性共定位关系，且可被一定浓度离子型去垢剂破坏。     

大明胶囊对高脂血症大鼠心肌M受体各亚型mRNA表达的影响

目的通过检测M受体各亚型在心肌上的mRNA表达量,研究大明胶囊对高脂血症大鼠降血脂作用的分子机制。方法制备高脂血症大鼠模型,尾静脉取血测血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)等血脂指标;Trizol法提取心肌总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定M2、M3、M4、M54种M受体亚型mRNA的表达,观察其在高脂、正常和给药3种条件下的差异。结果高脂血症时血清中的TC、TG、LDL、FFA及MDA水平升高(P<0.05),HDL与SOD降低(P<0.05),经大明胶囊治疗后TC、TG、LDL、FFA及MDA水平降低(P<0.05),HDL与SOD水平上调(P<0.05)至近正常水平;比较高脂模型组与正常组M受体各亚型mRNA表达,结果M2、M4、M5受体亚型表达减弱,M3受体亚型表达增强,差别有统计学意义(P<0.05)。给大明胶囊后与高脂模型组比较M3受体亚型mRNA表达增强,M2受体亚型表达减弱,且具有显著差异(P<0.05),M4、M5受体亚型mRNA表达无显著差异(P>0.05)。结论高脂血症大鼠模型建立成功,大明胶囊具有降血脂作用,并且M3受体的水平上调是大明胶囊降血脂作用的分子机制之一。     

氯通道阻滞剂NPPB对人肾小球系膜细胞增殖的抑制作用氯通道阻滞剂NPPB对人肾小球系膜细胞增殖的抑制作用

目的研究氯通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸［5-nitro-2-(3-phenylpropylamino)- benzoic acid，NPPB］对肾小球系膜细胞增殖的作用及可能的机制。方法细胞计数和³H-TdR参入量测定确定细胞增殖，应用流式细胞术检测细胞周期时相。结果与对照组相比，氯通道阻滞剂NPPB和细胞外高渗透压力使人肾小球系膜细胞数和³H-TdR参入量明显减少，并呈剂量依赖关系,但不增加系膜细胞乳酸脱氢酶释放量。NPPB使细胞周期停滞在G0/G₁期。结论氯通道阻滞剂NPPB对人肾小球系膜细胞增殖有抑制作用,其机制与细胞容量改变有关。     

大明胶囊对高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43表达水平的影响

目的：通过观察大明胶囊治疗前后的高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43的表达,阐述大明胶囊降血脂作用的分子机制。方法：Wistar大鼠40只分组,建立实验性大鼠高脂血症模型,分别是正常组、高脂模型组、大明胶囊高、中、低(200,100,50 mg·kg^-1·d^-1)剂量组,每组8只。尾静脉取血测血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(NEFA)等血脂指标；Trizol法提取心肌总RNA,利用RT-PCR技术和免疫组织化学方法结合激光共聚焦技术,测定间隙连接蛋白43在正常、高脂、给药3种情况下的差异。结果：高脂血症时血清中的TC,TG,LDL及NEFA含量升高(P<0.05),HDL含量降低(P<0.05),经大明胶囊治疗后TC,TG,LDL及NEFA含量降低(P<0.05),HDL含量上调(P<0.05)至接近正常水平；与正常组比较高脂组和给药组心电图无明显改变,心率无显著性差异；高脂组与正常组比较间隙连接蛋白43mRNA表达显著减弱(P<0.05),给药组与高脂组比较间隙连接蛋白43 mRNA表达显著增强(P<0.05)；免疫组织化学结果高脂组与正常组比较间隙连接蛋白43表达显著减弱(P<0.05),给药组与高脂组比较间隙连接蛋白43表达显著增强(P<0.05)。结论：大明胶囊具有降血脂作用,其降血脂的药效机制与间隙连接蛋白43的表达改变有一定联系。     

白藜芦醇能够修复离体缺血再灌注损伤大鼠心脏M3受体与间隙连接蛋白43间结构及功能性整合

为了探讨白藜芦醇是否能通过影响M₃受体和间隙连接蛋白43(Cx43)间结构及功能性整合发挥其抗心肌缺血再灌注损伤作用，应用免疫共沉淀、免疫印迹及免疫荧光技术研究白藜芦醇对M₃受体与Cx43间结构及功能性整合的影响。结合大鼠离体II导联心电图及心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测观察白藜芦醇是否能恢复心肌缺血再灌注损伤。白藜芦醇能修复心肌缺血再灌注损伤所致的M₃受体与Cx43间结构及功能性整合的破坏及纠正Cx43表达异常。同时QRS波时限﹑SOD及MDA的改变也得到相应恢复。白藜芦醇能修复M₃受体与Cx43间结构及功能性整合而发挥抗缺血再灌注损伤作用。     

冠心病监护病房噪声对患者的危害及对策

冠心病监护病房噪声会对心血管病急重症患者产生多方面的危害,影响患者病情的恢复及预后,预防和控制噪声是非常重要的.     

大明胶囊对高脂血症大鼠心肌M受体各亚型mRNA表达的影响

目的通过检测M受体各亚型在心肌上的mRNA表达量,研究大明胶囊对高脂血症大鼠降血脂作用的分子机制。方法制备高脂血症大鼠模型,尾静脉取血测血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)等血脂指标;Trizol法提取心肌总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定M2、M3、M4、M54种M受体亚型mRNA的表达,观察其在高脂、正常和给药3种条件下的差异。结果高脂血症时血清中的TC、TG、LDL、FFA及MDA水平升高(P<0.05),HDL与SOD降低(P<0.05),经大明胶囊治疗后TC、TG、LDL、FFA及MDA水平降低(P<0.05),HDL与SOD水平上调(P<0.05)至近正常水平;比较高脂模型组与正常组M受体各亚型mRNA表达,结果M2、M4、M5受体亚型表达减弱,M3受体亚型表达增强,差别有统计学意义(P<0.05)。给大明胶囊后与高脂模型组比较M3受体亚型mRNA表达增强,M2受体亚型表达减弱,且具有显著差异(P<0.05),M4、M5受体亚型mRNA表达无显著差异(P>0.05)。结论高脂血症大鼠模型建立成功,大明胶囊具有降血脂作用,并且M3受体的水平上调是大明胶囊降血脂作用的分子机制之一。     

心脏M3受体作为抗心律失常药物新靶点研究的进展

心脏在交感神经和副交感神经的精细控制下完成正常的生理功能，心脏迷走神经通过刺激M型乙酰胆碱受体（muscarinic acetylcholine receptor．mAchR）调节心脏收缩力、兴奋性和传导。目前，通过分子生物学技术已经克隆出哺乳动物M受体的5个亚型，即m1，m2，m3，m4和m5。由于尚无m5受体相对特异性阻滞剂和激动剂，通过药理学的方法，将M受体分为M1，M2，M3及M4等4个亚型。