红皮云杉针叶挥发油气相色谱-质谱指纹图谱及多成分定量分析

目的：建立红皮云杉针叶挥发油气相色谱（GC）-质谱（MS）指纹图谱及多指标成分含量测定分析方法。方法：采用GC-MS技术,以HP-5MS色谱柱为分析柱,对黑龙江省的10批红皮云杉针叶挥发油分别进行指纹图谱的测定和樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯3个成分的含量测定。结果：指纹图谱中鉴定了22个共有峰,10批红皮云杉针叶挥发油的指纹图谱相似度大于0.90;红皮云杉针叶挥发油中樟脑、龙脑和乙酸龙脑酯在含量上存在一定差异。结论：系统方法学验证说明该方法可用于红皮云杉针叶的鉴别与品质评价。     

不同品种丁香叶中芦丁及丁香苦苷的含量测定

目的:建立多波长高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同品种丁香叶中芦丁及丁香苦苷的含量。方法:采用AgilentZORBAXEclipseXDB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(20∶80),流速为1.0mL/min,定性检测波长200～400nm,定量检测波长255nm和225nm,柱温为室温;利用化学计量学中的光谱相关色谱法分析确认定量色谱峰。结果:芦丁和丁香苦苷在20min内被很好地分离,经对照品比较及光谱分析得到确认。芦丁、丁香苦苷分别在0.125～2.0μg和0.625～10.0μg范围内与色谱峰面积的线性关系良好(r=0.9999)。平均回收率分别为99.9%、99.4%,RSD分别为1.4%、1.1%。结论:不同品种丁香叶中芦丁和丁香苦苷的含量有较大的差别,建立的含量测定方法可用于丁香叶中芦丁及丁香苦苷的同时定量分析。     

一测多评法测定复方黄白胶囊中四种黄酮成分的含量

目的建立一测多评测定复方黄白胶囊中4种黄酮成分（黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素）的方法。方法采用斜率校正法,以黄芩苷作为内参物,计算汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素与黄芩苷的相对校正因子;分别用一测多评法和外标法测定复方黄白胶囊中4种黄酮成分的含量。结果黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素的色谱保留时间分别为14．80、28．58、37．76及47．52。阴性对照在相应位置处未见色谱峰,样品色谱图中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩索色谱峰的纯度因子分别为998．8、995．2、989．6及988．5。汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素与黄芩苷间的相对校正因子分别为1．396、1．808和2．010。复方黄白胶囊中4种黄酮成分采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无明显差异。黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素的加样回收率平均值分别为99．5％、99．7％、100．5％、99．4％,相对标准偏差分别为1．3％、0．9％、1．6％及1．1％（n=6）。本研究表明一测多评法测定黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素方法专属性、精密度、稳定性、重复性和回收率均良好。结论一测多评法可用于复方黄白胶囊中4种黄酮成分的定量分析。     

Rho GDP解离抑制蛋白β在布鲁杆菌感染中的作用

目的探讨Rho GDP解离抑制蛋白(Rho GDI)β在布鲁杆菌感染中的作用。方法构建pEGFP- Rho GDIβ真核表达质粒,转染到THP-1细胞中(实验组),筛选稳定表达pEGFP-Rho GDIβ的THP-1细胞,加强THP-1细胞中Rho GDIβ的表达后,计算被感染的细胞所占的比例和每个细胞所吞噬的布鲁杆菌数,并和对照组、pEGFP对照组比较,观察转染pEGFP-Rho GDIβ后THP-1细胞吞噬布鲁杆菌的能力。结果在最初3.5 h,随着侵袭时间的延长,吞噬了细菌的细胞所占比例逐渐增多,至4 h时,95%以上的细胞都吞噬了细菌,3组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在侵袭初期2～5 h,加强了Rho GDIβ表达的THP-1细胞中含有的细菌个数略低于正常THP-1细胞内的布鲁杆菌,但差异无统计学意义(P>0.05),这种趋势一直持续到感染后36 h;在48 h时,稳定表达pEGFP-Rho GDIβ质粒的THP-1细胞内的布鲁杆菌数(5.5±0.5)明显低于pEGFP对照组(7.5±1.5,P<0.05)和对照组(8.0±1.5,P<0.05)。结论在感染早期,Rho GDIβ起着非常重要的作用,但布鲁杆菌的内化是一个复杂的过程,除Rho GDIβ参与此过程外,其他调节因素的作用不容忽视。     

一测多评法测定复方黄白胶囊中大黄蒽醌类成分的含量

目的：建立一测多评法测定复方黄白胶囊中大黄蒽醌类成分的方法。方法：以复方黄白胶囊为研究对象,以大黄酚作为内参物,计算大黄酸、大黄素和大黄素甲醚与大黄酚的相对校正因子;分别采用一测多评法和外标法测定复方黄白胶囊中上述4种大黄蒽醌类成分的含量。结果：大黄酸、大黄素及大黄素甲醚与大黄酚间的相对校正因子分别为0．946、1．105和1．097,相对校正因子重现性良好。复方黄白胶囊中大黄成分采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著差异。结论：该方法可用于复方黄白胶囊中大黄蒽醌类成分的定量分析。