大鼠血栓调节蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达

目的研究大鼠血栓调节蛋白基因的扩增、克隆及在原核细胞中的表达。方法以大鼠基因组DNA为模板,进行PCR扩增,用pMD18-Tsimple vector进行T克隆并测序。经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,将目的基因克隆到pET-28a(+)表达载体质粒中,转化E.coliBL21(DE3)表达重组蛋白,通过SDS-PAGE分析表达产物。结果含有大鼠血栓调节蛋白基因的PCR产物约为1850bp。重组pMD18-Tsimple vector质粒和重组pET-28a(+)质粒经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后,有相应大小的目的片段,测序结果正确。经IPTG诱导,重组pET-28a(+)质粒在E.coliBL21(DE3)中有相对分子质量约为72000的融合蛋白表达。结论成功克隆了大鼠血栓调节蛋白基因,并成功表达了该基因编码的蛋白。     

HPLC法同时测定四逆汤中3 种有效成分的含量

 目的建立同时测定四逆汤中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱含量的HPLC 法。方法采用HPLC 色谱法,Eclipse XDB-
C18 色谱柱（4.6 mm*150 mm,5 μm）,流动相甲醇-0.1%三乙胺（65:35）,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30益,检测波长为240 nm。
结果乌头碱、新乌头碱、次乌头碱分别在0.120 4～6.02 μg（ =0.9997）、0.041 2～2.06 μg（ =0.999 5）、0.080 8～4.04 μg（ =
0.999 9）范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.74%（RSD=1.88%）、99.9%（RSD=2.98%）、102.9%（RSD=
1.32%）。结论该方法简便可行、重现性好、可作为四逆汤的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定马来酸伊索拉啶及片剂的含量及有关物质

目的建立测定马来酸伊索拉啶及其片剂的含量和有关物质的高效液相色谱法。方法采用Spherisorb C8色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm,),以甲醇-水-冰醋酸(体积比60∶40∶0.6,pH=3.5)为流动相,流速为1.0 mL.m in-1,萘普生为内标,紫外检测波长为250nm。结果在25~250μg.mL-1范围内,色谱峰面积之比与质量浓度之比呈良好的线性关系,r=0.9997;平均回收率为100.3%(RSD=0.96%,n=9)。最低检测量为10 ng。结论该法准确、简便、灵敏,可用于马来酸伊索拉啶及其片剂的含量测定和有关物质检查。     

用QSTR模型预测苯酚类化合物大鼠经口的急性毒性△

对39种苯酚类化合物大鼠经口急性毒性(LD50)的定量结构-毒性效应关系(Quantitative Structure-Toxicity Relation-ships,QSTR)进行了研究。采用HyperChem7.5中MOPAC-AMI量子化学法计算了39种苯酚类化合物的13种量子化学结构参数。其中取22个化合物作为样本集对LD50进行多元逐步回归分析,得到最佳方程,该方程的相关系数R2=0.9749。应用所建立的QSTR模型验证了苯酚类化合物的LD50值。经过17个预测样本对该模型进行验证,结果表明该模型具有很好的预测能力。同时分析了苯酚类化合物的毒性机理。     

高效液相色谱法测定卡维地洛片含量

目的运用高效液相色谱法测定卡维地洛片的含量.方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(C18色谱柱),甲醇-0.01 mol·L-1磷酸盐缓冲液(6535,用醋酸调至pH 3.5)为流动相,检测波长为245 nm,苯巴比妥钠为内标.结果卡维地洛在20～120mg·L-1的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.2%,RSD为1.01%(n=6).结论本法测定卡维地洛片的含量快速、简便、准确.     

奥洛他定的合成

目的：合成新型H1受体阻滞剂奥洛他定。方法：以对羟基苯乙酸和苯酞为原料，经取代、环合、维蒂希反应等9步反应合成目标产物。结果与结论：合成了目标产物，其结构经MS和^1H—NMR确定。     

高效液相色谱法测定一点红中槲皮素的含量

目的建立高效液相色谱法测定一点红中槲皮素含量的方法。方法用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(55∶45∶0.4),检测波长为370 nm。结果槲皮素在0.041 6~0.416μg的范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为102.3%,RSD为1.18%(n=6)。结论此法用于测定一点红中槲皮素的含量快速、简便、准确,为评价一点红的内在质量提供了科学依据。     

RP-HPLC法测定骨疏丹中淫羊藿苷和蛇床子素的含量

目的建立测定骨疏丹中淫羊藿苷和蛇床子素含量的RPHPLC方法。方法采用HypersilODS2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),测定淫羊藿苷的流动相为乙腈0.4%(φ)醋酸水溶液(体积比25∶75),流速为1.0mL·min-1,检测波长为270nm;测定蛇床子素流动相为甲醇0.4(φ)%醋酸水溶液(体积比65∶35);流速为1.0mL·min-1;检测波长为322nm。结果淫羊藿苷质量浓度在29.6～473.6mg·L-1内呈良好的线性关系,平均回收率为98.4%,RSD为1.7%。蛇床子素质量浓度在38.5～462.0mg·L-1内呈良好的线性关系,平均回收率为99.2%,RSD为1.6%。结论方法简便、准确、重现性好,可作为骨疏丹质量控制的手段之一。     

HPLC法同时测定蛇床子中蛇床子素和欧前胡素含量

目的用高效液相色谱法同时测定中药蛇床子中蛇床子素和欧前胡素的含量。方法采用KromasilC8(2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm)为色谱柱 ,以甲醇 水 (体积比 6 5∶35 )为流动相的HPLC法 ,检测波长为 310nm ,流速为 0 8mL·min-1,柱温为室温。结果以醋酸氟轻松为内标 ,蛇床子素和欧前胡素分别在 13～ 2 0 8mg·L-1和 8～ 12 8mg·L-1内 ,线性关系良好 (r≥ 0 9998) ;平均回收率分别为 98 2 %和 97 5 % ;RSD分别为 1 7%和 2 0 % (n =9)。结论本法简便快速 ,回收率及重现性良好 ,适用于中药蛇床子中蛇床子素和欧前胡素的定量分析     

钩吻的化学成分研究

目的研究马钱科胡蔓藤属植物钩吻Gelsemium elegans的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC等色谱方法进行分离纯化,通过理化性质及核磁共振谱学数据对分得的化合物进行结构鉴定。结果从钩吻的95%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为钩吻素子(1)、钩吻素甲(2)、钩吻绿碱(3)、钩吻素己(4)、花椒毒素(5)、香柑内酯(6)、异茴芹内酯(7)、欧前胡素(8)、蛇床子素(9)、对羟基苯甲酸(10)、香草酸(11)、β-谷甾醇(12)、β-胡萝卜苷(13)、钩吻内酰胺(14)、16-表伏康树卡平碱(15)。结论化合物5～9为首次从该种植物中分离得到。