大鼠肋生长板软骨细胞的分离、培养及生物学特性的研究

目的：建立大鼠肋生长板软骨细胞（RGC）分离、培养的方法，探讨其生物学特性，为软骨细胞增殖分化的调控和软骨组织工程修复的研究建立实验基础。 方法： 显微解剖出大鼠肋生长板软骨，酶消化法获得分散的单个RGC。观察单层培养的不同代数RGC的细胞形态变化,并进行细胞生长动力学分析；组织化学和免疫细胞化学方法检测不同代数RGC蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达。 结果： 本实验分离的RGC中活细胞比例大于98%；原代培养细胞呈多角形或圆形，第6代细胞仍保持多角的形态；前4代细胞的每日倍增指数随着传代次数的增加而增加，第5代后显著降低；原代培养的RGC中Ⅱ型胶原阳性染色细胞比例大于95%，阿尔新蓝染色也呈阳性；随着传代次数增加阳性细胞的比例下降。 结论： 本研究所建立的分离培养方法可以获得高纯度、高活性的软骨细胞，前3代RGC保持了在体软骨细胞的表型是研究软骨增殖分化调控的良好材料。     

IL-1α及LPS 刺激Caco-2细胞防御素表达的差异性

目的 比较细胞因子及LPS组对Caco-2细胞防御素表达的差别。方法用LPS和rhIL-1α刺激Caco-2细胞，采用半定量RT-PCR技术观察防御素HD-5、HD-6、hBD-1和hBD-2 mRNA的表达差异。结果经IL-1α刺激后，hBD-1的表达量有所增加，同时hBD-2、HD-5和HD-6也能表达；但LPS刺激后，hBD-1的表达量增加不明显，HD-5、HD-6和hBD-2仍未表达。结论Caco-2细胞对LPS的刺激产生“哑”反应，推测肠上皮对LPS存在一定的适应性，这对维持一定的正常菌群有益。     

Paneth细胞防御素的功能对中医药体内抗菌机理的启示

Paneth细胞防御素是一类具有广谱、高效抗微生物活性的小分子肽，在肠道的先天性免疫中起着重要作用。本文从Paneth细胞防御素的生物学特性、抗菌活性及抗菌机制等方面对其进行了较全面的综述，同时也展望了Paneth细胞防御素在中医药研究中的前途，并提出使用药物诱导机体本身产生内源性的抗菌肽以达到抗感染目的的设想。     

国产和进口法莫替丁在3种配伍注射液中的稳定性比较

目的:研究国产和进口法莫替丁在3种注射液中的稳定性,为临床提供相应资料.方法:在15℃和25℃温度下,于0,0.5,1,2,4 h考察配伍液的外观、pH值以及法莫替丁的含量变化.结果:两种法莫替丁在不同注射液中稳定性差异不大,外观无变化;pH值无明显变化.结论:0.5 h内含量变化极小.临床使用可根据病情予以选择.     

雷公藤甲素对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究雷公藤甲素(TRD)对小鼠T淋巴细胞活化标志CD69、CD25及细胞因子IL-2及IFN-γmRNA表达的影响,为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据.方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的雷公藤甲素预先孵育1 h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆体双染技术,流式细胞仪检测TRD对小鼠T细胞CD69、CD25表达的影响;采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测TRD对细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA的表达的影响.结果:TRD能抑制T细胞早期活化标志CD69和CD25,同时TRD也能抑制IL-2及IFN-γmRNA的表达.结论:TRD对T细胞早期活化分子及细胞因子表达的抑制作用可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一.     

腺病毒介导细胞外信号调节激酶2表达对去分化软骨细胞增殖及胞外基质合成的影响

目的:观察腺病毒介导细胞外信号调节激酶2的过度表达对去分化软骨细胞增殖和细胞外基质合成的影响,以及腺病毒介导细胞外信号调节激酶2用于修饰去分化软骨细胞的可行性。方法:实验于2004-09/2005-05在暨南大学组织移植与免疫研究中心进行。SD大鼠5只,周龄为3～5周,此处请核对体质量为(150±20)g,分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞,利用Adeasy系统构建携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体。流式细胞仪检测不同感染复数的携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染第5代大鼠肋生长板软骨细胞的效率,Westernblot检测携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染大鼠肋生长板软骨细胞中细胞外信号调节激酶1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶2的表达,3H-TdR,3H-proline和35S-sulfate同位素掺入检测携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染对大鼠肋生长板软骨细胞增殖、胶原和蛋白多糖合成的影响。结果:①成功构建携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体重组腺病毒。②100感染复数的携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染第5代大鼠肋生长板软骨细胞的效率大于90%。③携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染的第5代大鼠肋生长板软骨细胞中细胞外信号调节激酶1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶2的表达均显著增加,分别是Ad-CMV组的15.58和1.85倍。④同位素检测结果表明携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体的感染促进3H-TdR、3H-proline和35S-sulfate的掺入,分别是对照组的2.52,1.61和1.53倍(P<0.05)。结论:腺病毒介导细胞外信号调节激酶2基因的过度表达促进去分化大鼠肋生长板软骨细胞的增殖和细胞外基质成分的合成。     

中药内服加熏洗治疗类风湿关节炎的疗效观察与护理

类风湿性关节炎(RA)是一种慢性、全身性、炎症的自身免疫性疾病,最初侵袭滑膜组织,逐渐发展导致进行性关节破坏,功能减退,在起病10年后多数患者有中至重度的功能丧失.RA在人群中的发病率0.5%～1.0%,导致了巨大的医疗费用和沉重的社会负担.目前类风湿关节炎的治疗目的主要为缓解症状、延缓病情进展及促进关节功能的恢复.其中,尽快缓解症状,是解除患者痛苦、恢复和维持关节生理功能的必要条件.     

健康教育对肾综合征出血热多器官衰竭患者预后及应激反应的影响分析

<正>肾综合征出血热(HFRS)是汉坦病毒引发的自然疫源性疾病,主要通过鼠类传播,可导致人体出现全身小血管、毛细血管广泛性损伤,继而引发发热、休克、肾脏功能损害甚至多器官衰竭(MOF)。1对象与方法1.1对象选取本院2012年9月至2014年9月收治的68例HFRS合并MOF患者,按照国际通用随机字母表,将其分为观察组及对照组,各34例。其年龄、性别     

防御素与先天性免疫及获得性免疫

防御素是生物在长期进化过程中保留下来的一种古老的宿主防御机制。研究发现 ,哺乳动物防御素是抵御外来微生物入侵的重要物质 ,是一类由 18～ 4 2个氨基酸组成的酸性阳离子抗菌肽。本文综述了防御素作为效应分子和调节分子参与先天免疫 ,并重点阐述了近年发现防御素在获得性免疫中的重要地位 ,提示防御素在今后控制感染性疾病中可能发挥重要作用。