探讨从外周血获取DNA标本的影响因素

随着分子生物学技术的发展,使得早期对疾病基因水平的诊断成为可能。这些技术广泛地应用于流行病学研究,逐步形成分子流行病学这门学科。 分子流行病学研究常常需要用经济、快速、安全的方式获取DNA标本,并要使所获得的DNA达到相对较高的质量和产量。外周血是最易获取DNA分子的生物标本,本研究模拟大规模流行病学研究时血液标本采集、处理、检测的实际情况,旨在发现不同DNA提取方法、血液标本类型以及保存对DNA标本产量、质量的影响。     

北京市海淀区食源性疾病沙门菌血清型分布和耐药性分析

目的 分析2015年-2020年北京市海淀区食源性疾病中沙门菌的感染状况、血清型分布和耐药情况,为研究沙门菌的流行情况和临床合理用药提供科学依据.方法 对海淀区食源性疾病监测哨点医院送检的腹泻患者粪便标本进行沙门菌的分离鉴定、血清分型和药敏检测.结果 在1971份腹泻便标本中检出107株沙门菌.共有18个血清型,优势血...     

2013-2020年北京市海淀区成年人致泻大肠埃希菌流行特征和分型研究

目的 掌握北京市海淀区成年人致泻大肠埃希菌(DEC)流行特征和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型特点.方法 对2013-2020年在3家哨点医院就诊的1961例成年人腹泻患者粪便或肛拭子标本进行DEC检测,对其中66株DEC菌株进行PFGE分型试验.结果 成年人DEC检出率为9.54％(187/1961),产肠毒素大肠埃希...     

海淀区2002～2006年食源性致病菌监测分析

[目的]了解我区2002～2006年(2004年除外)食品中食源性致病菌的污染状况,分析其动态变化,为预防食源性疾病及食品卫生监督监测提供科学依据.[方法]从我区农贸批发市场、超市及餐饮饭店共随机采集619件食品样品,依据"北京市食品污染物监测2005年食源性致病菌监测实验室技术手册"及GB/T4789-94 2003.进行食源性致病菌检测.[结果]共抽检食品样品619件,检出3种食源性致病菌共115株,总检出率18.58%;其中检出单核细胞增生李斯特氏茵58株、沙门氏菌26株,金黄色葡萄球菌31株,副溶血性弧菌、肠出血性大肠杆菌0157:H7、空肠弯曲菌均未检出.[结论]海淀区近年食品中存在食源性致病菌污染,总检出率高于国内近年食品污染水平,其中2005年总检出率为38.00%.检出的致病菌为单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌,主要污染的是生肉类.6种食源性致病菌中,单核细胞增生李斯特氏菌检出率最高.     

一起肠炎沙门菌引起的食源性疾患分析

细菌性食源性疾患多发生于夏秋节季，常造成群发性腹泻、呕吐等伤害，给人们的身体健康及生命财产造成了一定的危害。自1986年英国首先报道由肠炎沙门菌引起的食源性疾患以来，世界范围由该菌引起的感染越来越多见。因此，我们认为餐饮业及食品加工部门应尽快引入危害分析与关键控制点（HACCP）这个体系，控制潜在危害（如各种食源性疾病）的发生。     

高度嗜盐的副溶血性弧菌的检出

副溶血性弧菌一般在氯化钠较浓的培养基中可生长 ( 3 %-10 % ) ,在小于 0 5 %或大于 10 %氯化钠中不生长 ,又称为嗜盐性弧菌[1] 。而我们在一起集体用餐后腹泻的病患者便中检出 4株在 11%氯化钠中亦可生长的高度嗜盐的副溶血性弧菌 ;并且用 0 85 %氯化钠的菌悬液进行API试剂条的生化反应 ,无任何阳性反应出现 (而在以往从未出现过这种情况 ) ,用3 5 %氯化钠的菌悬液重复试验时 ,试剂条出现阳性反应 ,经ATBExpression自动细菌鉴定仪鉴定为副溶血性弧菌 ,符合率为 99 9%。1　材料与方法1 1　材料　氯化钠结晶紫增菌液 ,0 %、3 %、7%、9%…     

从外周血获取DNA样本的方法学研究--分子流行病学研究方法探讨

目的研究从外周血获取DNA样本的主要影响因素,提供适合于分子流行病学调查时血液标本的处理方法、血液标本类型、DNA提取方法.方法采集40名健康志愿者静脉血,各自分成三种不同的类型(全血、血凝块、白细胞),并随机将其分为四种方法进行保存,用四种常用方法提取DNA.用方差分析比较DNA产量、纯度.分析比较各种条件下所提取DNA的质量.使用模糊综合评价方法评价血液标本类型、DNA提取方法的优劣.结果①DNA产量全血DNA产量最高,血凝块产量其次,白细胞产量最低;提取方法所获DNA产量高低依次为盐析法、酚/氯仿法、KI法、TKM法;样品在低温保存产量大于室温保存产量;3个月低温保存时,白细胞样品的DNA产量下降明显,血凝块DNA产量无明显变化.②DNA质量DNA提取方法中酚/氯仿法最优,盐析法与KI法相近,TKM法略差;从全血、白细胞中提取的DNA纯度略好于血凝块;室温保存样品对纯度有不良影响,特别是对白细胞和血凝快样品影响明显.结论各类样品应以低温运输与低温保存.如果开展较大规模的分子流行病学研究,综合各种因素,建议选取全血或血凝块样品,采用盐析法提取DNA.如特别要考虑DNA纯度可使用酚/氯仿法或KI方法提取.     

一株白色表观金黄色葡萄球菌检出分析

典型金黄色葡萄球菌通常在血平板上呈金黄色或灰白色。在一起投诉样品———虎皮蛋糕的检测中,检出的一株金黄色葡萄球菌在血平板上呈白色,难于与其他葡萄球菌鉴别,易造成漏检。患者食此蛋糕4小时后,出现呕吐、腹痛、腹泻等症状,并伴有甲床发绀现象。材料与方法1.材料:7.5%氯化     

用模糊综合评价法研究从外周血获取DNA标本的影响因素

目的：用模糊综合评价法研究从外周血获取DNA标本的主要影响因素，提供适合于分子流行病学调查时血液标本运输保存方式、血液标本类型、DNA提取方法。方法：采集40位健康志愿者静脉血，各自分成三种不同的类型(全血、血凝块、白细咆)，并随机将其分为四种方法进行保存，用四种常用方法提取DNA。使用模糊综合评价方法评价血液标本类型、DNA提取方法的优劣。结果：评价三种血液标本类型，血凝块提取DNA的综合评分最高，其次为全血和WBC；评价四种DNA提取方法，综合评分排列顺序为盐析法、TKM法、KI法、酚氯仿法。结论：各类样品应以低温运输与低温保存。如果开展较大规模的分子流行病学研究．综合各种因素，建议选取血凝块或全血样品，采用盐析法提取DNA。如特别要考虑DNA纯度可使用酚／氯仿法提取。