增生瘢痕皮肤中转化生长因子基因表达

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1和转录因子Smad 2,Smad 3三种基因影响增生性瘢痕形成和胎儿皮肤伤口无瘢痕愈合的调节机制.方法 32份被检测标本中包括增生性瘢痕8份,其对应的正常皮肤组织8份,胎儿和成人皮肤组织各8份.用逆转录-多聚酶链反应方法(RT-PCR)检测这3种基因在不同的组织细胞内的表达变化规律.结果 TGF-β1、Smad 2 和Smad 3三种基因在增生性瘢痕、胎儿和出生后机体皮肤组织细胞内都有表达.在所检测8对增生性瘢痕和其对应正常皮肤细胞中,这3种不同基因在增生性瘢痕细胞中的表达量高于正常皮肤细胞的组数分别为TGF-β1基因有5对,Smad 2基因有8对,而Smad 3基因有5对.在胎儿皮肤细胞内,TGF-β1的mRNA含量明显低于成人皮肤细胞(t=2.204,P<0.05),差异有显著意义;Smad 3基因表达也呈相似的变化规律,mRNA含量显著低于成人皮肤细胞(t=4.269,P<0.01),差异有非常显著意义;而Smad 2基因的mRNA含量却明显高于成人皮肤细胞(t=6.685,P<0.01),差异亦有非常显著意义.结论 TGF-β1和它的下游信号分子Smad 2,Smad 3可能与增生性瘢痕形成密切相关.在增生性瘢痕细胞内,这3种基因高表达可诱导胞外基质大量沉积,加速成纤维细胞增殖,促进组织纤维化.TGF-β1和Smad 3基因在胎儿皮肤组织细胞内低表达可能是皮肤伤口无瘢痕愈合的机制之一.     

重组人血小板源性生长因子增加细胞外信号调节激酶磷酸化促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合

目的 在体观察重组人血小板源性生长因子（recombinant human platelet—derived growth factor，rhPDGF）促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的细胞和分子机制，研究其可能涉及的信号通路。方法 26只糖尿病大鼠，每只动物背部制备4个全层皮肤缺损创面，选取其中52个创面，随机分成3组，即对照组，创面自然愈合；rhPDGF治疗组，创面rhPDGF用量为7．0μg／cm^2；赋形剂组，创面用等量赋形剂凝胶。观察治疗后3、7和14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎性细胞浸润情况，并采用免疫荧光和免疫组织化学技术观察创面周围和创面修复细胞内细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal—regulated kinase1／2，ERK1／2）磷酸化和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen，PCNA）的表达。结果 组织学观察，rhPDGF治疗组创面可见大量炎性细胞浸润，毛细血管胚芽及成纤维细胞明显多于另两组（P〈0．05）；胶原沉积明显，肉芽组织生长活跃，创面收缩显著，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫学研究显示，应用rhPDGF7～14d后，rhPDGF治疗组ERK1／2明显强于对照组和赋形剂组（P〈0．05）；且损伤后3～7d rhPDGF治疗组修复细胞PCNA的表达明显高于对照组和赋形剂组（P〈0．05）。结论 rhPDGF促糖尿病大鼠刨面愈合的作用部分是通过ERK1／2信号通路的磷酸化来完成的。     

进一步重视脂肪新功能对创面愈合作用的研究

创面愈合的研究范围正随着相关领域的研究进展而不断拓展和完善。以皮下脂肪组织为例 ,以往多数的研究认为 ,脂肪组织来源于间充质细胞 (mesenchymalcell,MC) ,其功能仅是一个能量贮存仓库。但近年来的研究表明 ,脂肪组织还可能是一个重要的内分泌器官 ,在发育学、信号转导 ,以及干细胞作用等多方面与组织修复存在着密切联系。有专家认为 ,加强对脂肪细胞新功能的研究和开发 ,有可能对创面修复和组织再生机制产生新的认识 ,并寻找出新的促愈合手段。脂肪细胞参与创面愈合首先表现在它可能作为一个内分泌器官。迄今为止 ,已经发现人的脂肪细…     

选择性脱细胞猪皮研制及早期临床应用

目的介绍选择性脱细胞猪皮覆盖大面积烧伤早期创面的研制方法及临床应用效果. 方法 2001年1月～2002年5月,对1例深Ⅱ度15%、Ⅲ度25%烧伤患者的右前臂和右小腿,行选择性脱细胞中厚猪皮早期覆盖.戊二醛交联后表皮面黏贴于容器,边缘包埋.在含0.25%胰酶的PBS液中37℃消化2小时,去污剂处理24小时后,漂洗备用.将处理后猪皮应用于1例切削痂自体微粒植皮创面覆盖约2%,大体和光镜观察其功能和外观恢复情况. 结果组织学观察见表皮层基本完整,真皮内无细胞.初步临床观察显示,选择性脱细胞猪皮的真皮可在创基成活,失活表皮可被宿主自体表皮替代. 结论选择性脱细胞猪皮有望替代现有材料用于大面积烧伤切削痂创面的早期覆盖.     

瘢痕组织愈合中成纤维细胞凋亡抗性及其临床意义

瘢痕疙瘩（keloid，Ke）是皮肤损伤后组织异常修复的结果。Ke组织中成纤维细胞（fibroblast，FB）过度增生、大量细胞外基质沉积和向正常皮肤侵袭生长，是其区别于肥厚性瘢痕（hypertrophicscar，HS）的重要特征。大量研究证实，细胞的凋亡状态将影响创面愈合、瘢痕形成和预后模式。本研究就细胞凋亡相关基因、调节信号、生长因子及其受体表达对Ke成纤维细胞（keloid．derivedfibroblast，KF）凋亡抗性的影响和临床意义进行综述。     

氯喹改善烫伤休克大鼠的器官功能和存活率

磷脂酶A_2(PLA_2)是血小板激活因子、白三烯和前列腺素类合成的关键酶,并间接与氧自由基介导的脂质过氧化反应有关。因此,PLA_2可能作为炎症反应的核心酶而参与创伤或烧伤后多器官功能衰竭的病理过程。从这一假设出发,作者观察了严重烫伤早期大鼠各主要器官功能和形态的改变及其与PLA_2活性增高的关系,并使用PLA_2拮抗剂氯喹进行预防性治疗,观察其对器官功能和存活率的影响。 实验用Wistar大鼠,随机分为4组。单纯烫伤组(42只,S组),用100℃沸水12s造成大鼠背部皮肤Ⅲ度烫伤,面积约40％。烫伤+氯     

烧伤刺激大鼠骨骼肌组织泛素活化酶的转录表达

严重烧伤不仅导致显著病理生理和免疫功能的改变 ,而且严重影响机体的物质和能量代谢。目前公认 ,出现机体能量消耗明显增加、体重减轻、骨骼肌萎缩等是严重烧伤后显著的代谢特征。然而严重烧伤后骨骼肌蛋白降解率的变化规律及其分子机制仍不清楚。一、材料和方法1.动物模型和标本采集 :雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 60只 (中国医学科学院动物中心提供 ) ,体重 5 0～ 60ｇ ,随机分为正常组、烧伤后 2、6、12及 2 4ｈ组 ,每组 12只 ,活杀取材。试验前 12ｈ禁食 ,自由饮水。复方氯胺酮 ( 0 1ｍｇ/ｋｇ)腹腔注射麻醉 ,脱毛器背部体侧脱毛。麻醉满意后…     

人β-防御素3基因在COS-7细胞中的表达

目的：构建人β—防御素3(hBD3)的真核表达载体，建立稳定表达hBD3的细胞株。方法：用EcoR Ⅰ酶切合有hBD3全长基因的pGEM-hBD3重组质粒，获得其编码区全长序列，将其连接入EcoR Ⅰ预处理过的pcDNA3中。转化大肠杆菌，酶切鉴定筛选出插入方向正确的转化子。采用脂质体转染法将重组pcDNA3-hBD3真核表达载体导入COS-7细胞，用G418进行抗性筛选，用RT-PCR和Western印迹检测目的基因hBD3的mRNA和蛋白表达水平。结果与结论：构建的pcDNA3-hBD3真核表达载体转染COS-7细胞后可稳定表达hBD3的mRNA和蛋白，且蛋白主要以分泌形式存在于培养上清中。     

脓毒症内分泌调节机制的研究进展

内分泌系统是机体应激时十分重要的调控系统之一,创伤、感染等外部打击以及体内免疫、炎症甚至心理等内在因素改变都可以引起神经内分泌系统的变化。内分泌系统可进一步广泛的参与机体代谢、免疫、炎症、凝血等众多方面的调节过程,在脓毒症的发生发展中具有重要作用。一、脓毒症时内分泌激素水平发生改变内分泌系统是机体重要的防御系统之一。机体可通过激活下丘脑 垂体 肾上腺(HPA)轴,加速能量供给,保护心、脑、肺等重要器官,降低过度炎症反应以及抑制生殖等非必要的能量消耗,以确保机体承受打击所造成的损害。首先,HPA轴在脓毒症早期活…     

烧伤患者吸入性损伤和肺部感染的发生特点及其对死亡的影响

为了评价吸入性损伤和肺部感染的发生特点及其对死亡的影响，总结了我科近１４年住院治疗的热力烧伤患者９４０例，其中吸入性损伤７５例，轻度１５例，全部治愈，中度２５例，死亡１３例，死亡率为５２．０％，重度３５例，死亡３１例，死亡率为８８．６％。统计分析表明，合并吸入性损伤者６９．３％在密闭空间发生，同时伴有面部烧伤者达９６．０％。随着烧伤面积的增加，吸入性损伤发生率和肺部感染的发生率相应增加。有吸入性损伤肺部感染较无吸入性损伤肺部感染率为高（Ｐ＜０．０１），发生时间早。两组同等烧伤面积、深度、年龄患者，有吸入性损伤组发生死亡的危险比无吸入性损伤组大１７．２倍（Ｐ＜０．００１）。烧伤面积、深度和年龄相近，合并肺部感染者明显增加了死亡的机会（Ｐ＜０．００１）。