从积极防御战略浅析我军新型饮用水安全保障体系的构建

随着我军新时期积极防御军事战略的实行,未来战争战场环境将愈发复杂与多样,部队所面临的饮用水水源与水质将更加复杂。我军现有饮用水安全检测、净化技术与装备还存在信息化、一体化程度不高,新型制取饮用水技术研究深度不够,以及对涉及国家安全的重要战略要地水资源现状有待进一步调研等情况。为能在各种特殊和恶劣条件下确保作战人员的饮水用安全,应建立国家战略水资源安全防护体系,加快水安全卫生装备信息化和全天候适应性研究,深入开展特殊环境下饮用水保障新技术研究。     

重组酶聚合酶扩增技术(RPA)快速检测GⅡ型诺如病毒

目的建立基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的GⅡ型诺如病毒快速检测方法。方法设计针对GⅡ型诺如病毒特异性保守序列的RPA引物,利用RPA检测试剂盒建立RPA扩增体系,并通过2%琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行分析鉴定,从而对引物扩增效率、特异性、灵敏度和稳定性进行评价。结果本研究针对GⅡ型诺如病毒特异性保守序列设计了RPA特异性引物RPAf/RPAr,利用RPA检测试剂盒建立了RPA扩增体系。引物筛选实验结果显示,RPA检测方法在扩增反应5min后即可定性检测诺如病毒。将GⅡ.4型诺如病毒、GⅡ.17型诺如病毒、GⅡ.3型诺如病毒、GⅡ.6型诺如病毒、星状病毒、MS2噬菌体、人轮状病毒和人腺病毒基因组作为模板进行特异性检测。结果显示,只有GⅡ.4、GⅡ.17、GⅡ.3和GⅡ.6型诺如病毒有特异性扩增,表明该方法特异性良好,可基本满足对GⅡ型诺如病毒的检测。灵敏度实验结果显示,该方法可检测低至106 copies/μL的诺如病毒。利用10例诺如病毒阳性粪便样品对RPA检测方法稳定性进行评价。结果表明,10例样品均被特异性扩增,表明该方法稳定较好。结论本文建立的RPA检测方法特异性强、灵敏度高、稳定性好以及可操作性强,可用于对诺如病毒的检测。     

苯短期重复染毒对小鼠外周血单个核细胞免疫功能的影响

目的探究苯短期重复染毒对BALB/c小鼠外周血单个核细胞免疫功能的影响。方法选用6～8周雄性BALB/c小鼠,随机分为对照组、低剂量组(50 mg/kg体质量)、中剂量组(150 mg/kg体质量)和高剂量组(500 mg/kg体质量)。采用灌胃的方式进行染毒,每天灌胃1次,每周5 d,连续4周。末次灌胃24 h后采取小鼠外周血进行血细胞计数,用ELISA法测定血浆中Ig G、IL-2和IL-6等免疫分子含量,提取外周血单个核细胞测定其线粒体ROS及ATP含量,分别用TBA法、羟胺法和DTNB法测定血浆中SOD、GSH-Px活力和MDA含量。结果低、中和高剂量组小鼠外周血白细胞、淋巴细胞、红细胞和血红蛋白计数明显低于对照组,中、高剂量组小鼠外周血血小板计数明显低于对照组;低、中和高剂量组小鼠外周血血浆中Ig G、IL-2和IL-6含量明显低于对照组;低、中和高剂量组小鼠外周血单个核细胞线粒体ROS含量明显高于对照组,高剂量组小鼠外周血单个核细胞ATP含量明显低于对照组;中、高剂量组小鼠外周血血浆中SOD、GSH-PX活力明显低于对照组,MDA含量明显高于对照组。结论苯短期重复染毒可以引起小鼠外周血氧化应激,导致小鼠外周血单个核细胞线粒体功能下降,进而抑制外周血单个核细胞免疫功能。     

天津市某地区自来水中抗生素耐药菌及其相关基因的调查

目的研究天津市某地区自来水中抗生素耐药菌及其相关基因的分布。方法于2015年10月—2016年1月采集天津市某地区自来水样,并采用PCR技术检测六大类27种耐药基因,同时分离培养耐药菌并进行种属鉴定。结果该自来水微生物指标合格,但是自来水样中检测出了四环素类、磺胺类、β内酰胺类和氨基糖苷类耐药菌及其耐药基因,其中磺胺类耐药菌及其耐药基因的检出率最高。磺胺类耐药菌检出率达83.33%(10/12),sul1耐药基因检出率达91.67%(345/545)。经鉴定,耐药菌主要分布于肠球菌、葡萄球菌、微杆菌、微球菌、假单胞菌、芽孢杆菌属。结论天津市该地区自来水中存在少量的耐药菌。     

氯和二氧化氯灭活甲型肝炎病毒机理的研究

为探讨氯和二氧化氯灭活HAV机理及用PCR评价消毒效果的可行性,采用细胞培养、ELISA及大片段逐步步移RT-PCR方法对消毒前后HAV感染性、HAAg抗原性及HAV核酸全序列进行检测。结果,以含有效氯10 mg/L消毒液作用30 min,或含二氧化氯7.5 mg/L的消毒液作用10 min,对HAV感染性的灭活率均为100％,均可破坏HAV核酸5’非编码区;但检测两者HAAg抗原性P/N值分别为3.21(阳性)与2.02(阴性)。结果表明,HAV感染性的灭活与HAV核酸5’非编码区破坏是一致的,可用PCR技术检测HAV核酸5’非编码区以判定HAV灭活与否。     

鄱阳湖流域抗生素耐药基因分布特征及其与新型指示菌相关性研究

目的了解鄱阳湖流域抗生素耐药基因的时空分布规律,探究耐药基因与拟杆菌之间的相关性。方法选取鄱阳湖流域具有代表性的6个采样点,采集6个月的水样,通过q PCR方法定量检测五大类8种抗生素耐药基因[tet C,tet Q,erm B,sul1,sul2,bla TEM,aad A,aac(6')-1b]和2种拟杆菌(通用型拟杆菌,人特异性拟杆菌)的绝对浓度。结果 8种耐药基因均被检出,tet C,tet Q,erm B,sul1,sul2,bla TEM,aad A,aac(6')-1b的检出率分别为94.4%、66.7%、61.1%、97.2%、97.2%、97.2%、88.9%、94.4%;8种耐药基因的绝对浓度范围为0~2.9×107copies/ml,磺胺类基因检出浓度最高,是鄱阳湖流域中主要的抗生素耐药基因。tet Q和sul1基因在枯水期的绝对浓度高于丰水期(P0.05),8种耐药基因在上游河流的绝对浓度均明显高于湖泊上段和湖泊下段(P0.05),8种耐药基因与拟杆菌之间均存在较高的相关性(P0.05)。结论鄱阳湖流域磺胺类耐药基因污染较为严重,上游河流的耐药基因污染程度高于湖体,拟杆菌可能对抗生素耐药基因的污染具有一定的指示作用。     

镉对小鼠外周血免疫细胞线粒体功能的影响

目的探究镉体内染毒对昆明小鼠外周血免疫细胞线粒体功能的影响。方法选用20±2 g雄性昆明小鼠,适应性饲养一周,随机分为对照组、镉低剂量实验组和镉高剂量实验组,实验组分别于每周一、三、五灌胃给予不同剂量(7.5 mg/kg,15 mg/kg)的氯化镉溶液,连续6周,对照组给予同等体积的蒸馏水,于第8周提取小鼠外周血,血细胞计数仪计数外周血白细胞、淋巴细胞与红细胞数目,流式细胞仪测定外周血T、B、髄系细胞线粒体膜电位和线粒体活性氧(ROS)水平。结果与对照组相比,实验组小鼠外周血白细胞、淋巴细胞数目均显著下降(P0.05,P0.01);镉低剂量实验组小鼠与对照组相比,仅外周血髓系细胞线粒体ROS显著升高(P0.05),而镉高剂量实验组小鼠外周血髓系细胞、T细胞线粒体ROS均显著升高(P0.05,P0.01);镉高剂量实验组小鼠与对照组小鼠相比,外周血髓系细胞、T细胞线粒体膜电位均显著下降(P0.05)。结论镉体内染毒导致昆明小鼠外周血免疫细胞线粒体功能下降,且与剂量相关。