HepG2细胞中性红染色法测定化合物急性毒性的研究

目的探索Hep G2细胞中性红染色法检测化合物毒性的可行性,为建立化合物急性毒性快速筛选方法提供依据。方法采用人肝癌Hep G2细胞中性红染色法检测秋水仙碱、环磷酰胺、吡蚜酮等30种化合物的细胞毒性IC50、IC45、IC40、IC35和IC30值。采用线性回归模型拟合ICx值对大鼠经口半数致死剂量(LD50)的回归方程,利用回归方程预测LD50值。采用LD50实际值和预测值对化合物毒性进行分级,比较两种方法的一致性。结果 lg(IC50)、lg(IC45)、lg(IC40)、lg(IC35)、lg(IC30)与lg(LD50)均有相关性(P0.01),相关系数(r)为0.779~0.815;lg(IC50)与lg(LD50)的相关性最高,lg(LD50)=0.887×lg(IC50)+0.414。LD50实际值将30种化合物划分为高毒、中等毒和低毒各10种,LD50预测值划分出高毒12种、中等毒10种、低毒8种;两种方法的划分结果差异无统计学意义(P0.05),一致率为86.7%。结论人肝癌Hep G2细胞中性红染色法可作为快速检测化合物急性毒性的方法。     

流式细胞术在小鼠局部淋巴结试验中的应用研究

摘要：目的　将流式细胞术应用到小鼠局部淋巴结实验（ｌｏｃａｌｌｙｍｐｈｎｏｄｅａｓｓａｙ,ＬＬＮＡ）中,期望建立既
可检测化学物致敏性也可同时检测刺激性的方法。方法　受试物分为溶剂对照［ＡＯＯ （丙酮∶ 橄榄油＝
４∶１）］、阴性对照（ＮａＣｌ）、致敏阳性物［己基肉桂醛（ＨＣＡ）、２,４ 二硝基氯苯（ＤＮＣＢ）、２ 氨基酚（２
ＡＰＣ）］、刺激阳性物［ＫＯＨ、十二烷基硫酸钠（ＳＬＳ）］。采用８～１０周龄１６～２２ｇ的雌性Ｂａｌｂ／ｃ小鼠７６
只,随机分为１９个受试物剂量组,每剂量组４只小鼠。每种受试物分别设低、中、高３个剂量组,检测浓
度分别为ＮａＣｌ （１００ｇ／Ｌ、２００ｇ／Ｌ、３００ｇ／Ｌ）、ＨＣＡ （犞／犞：３．３％、１０．０％、３０．０％）、ＤＮＣＢ（２．５ｇ／Ｌ、
５．０ｇ／Ｌ、１０．０ｇ／Ｌ）、２ ＡＰＣ （１２．５ｇ／Ｌ、２５．０ｇ／Ｌ、５０．０ｇ／Ｌ）、ＫＯＨ （２５ｇ／Ｌ、５０ｇ／Ｌ、１００ｇ／Ｌ）、ＳＬＳ
（５０ｇ／Ｌ、１００ｇ／Ｌ、２００ｇ／Ｌ）。于试验第１、２、３ 天将配制后不同浓度受试物稀释液以每耳２５μｌ／ｄ均匀涂
布于小鼠双侧耳后。检测小鼠耳缘厚度、耳引流淋巴结重量、Ｂ２２０＋ （ＣＤ４５Ｒ） 亚群淋巴细胞百分数等指
标。采用ＳＰＳＳ１１．５分析软件,对数据型指标进行方差分析,并对有差异的个体再行ＬＳＤ 两两比较,并根
据刺激指数对受试物致敏性大小进行分级。结果　与溶剂对照比较中高剂量的ＳＬＳ和ＫＯＨ 均可引起小鼠
耳缘厚度增加（犘＜０．０１）。可判定ＳＬＳ、ＫＯＨ 对皮肤有刺激性。ＤＮＣＢ、ＨＣＡ 各剂量组和２ ＡＰＣ 高剂量
组刺激指数均大于３,可以判断该３种化学物为皮肤致敏物。根据ＳＩ计算ＥＣ３的值,对致敏物进行分类：
ＤＮＣＢ （０．１９６）为强致敏物,ＨＣＡ （１．５５６） 和２ ＡＰＣ （３．１５６） 为中等致敏物。结论　应用流式细胞术
（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）检测Ｂ２２０＋ （ＣＤ４５Ｒ）亚群淋巴细胞百分数作为致敏性观察指标的改良小鼠淋巴
结实验,结合耳缘厚度检测可实现同时评价化学物的皮肤致敏性和刺激性。
关键词：局部淋巴结试验;小鼠;致敏性;刺激性;流式细胞术
中图分类号：Ｒ１１４;Ｒ９９４．６　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０５ ０４７７ ０５     

伊维菌素原药对大鼠的亚急性（28天）吸入毒性研究

目的 研究伊维菌素原药对大鼠亚急性吸入毒性,求出最大无作用剂量。方法 采用SPF级Sprague-Dawley(SD)大鼠,共72只,随机分成6组,每组12只,雌雄各半。设 190、380、750 mg/m³等3个剂量组和1个溶剂对照组(0.03%吐温-80溶液),另设1个空白对照和1个附加组(750 mg/m³)。采用动式(口鼻式)吸入染毒,每天染毒1次,持续4 h,每周染毒5 d,直至28 d,附加组动物停止染毒后继续观察14 d。试验结束后,分别对动物作血液常规、生化、体重及脏器系数等测定,并进行组织病理学检查。结果 750 mg/m³剂量组雌雄大鼠在染毒后期出现被毛蓬松、呆滞、流涎、震颤等中毒反应。750 mg/m³剂量组雌鼠食物利用率下降,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平升高(P < 0.01),肝脏器系数(脏体比)升高(P < 0.05),且病理组织学检查发现部分大鼠肝细胞混浊肿胀现象;750 mg/m³剂量组雄鼠染毒第4周的体重下降,血清尿素氮(BUN)和ALT水平升高(P < 0.01),总胆固醇(CHOL)水平下降(P < 0.05)。结论 伊维菌素原药对大鼠亚急性吸入毒性试验的最大无作用剂量雌、雄性均为380 mg/m³ (4 h/d)。     

大鼠孕期甲氧滴滴涕暴露对子代成年雄鼠代谢综合征的影响

[目的]研究母鼠在孕中晚期暴露于甲氧滴滴涕(methoxychlor,MXC)后,对其子代成年雄鼠发生代谢综合征的影响。[方法]孕鼠分为2组:对照组和甲氧滴滴涕处理组。于孕期第11天(gestational period 11,GD11)开始,灌胃给药。将雄性仔鼠(每只母鼠保留2只雄性仔鼠)正常饲养至成年(3个月),进行口服糖耐量实验(oral glucose tolerancetest,OGTT),1周后处死,采集血清,全自动生化分析仪检测血糖、总胆固醇及三酰甘油,检测C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein,HDL)及低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL);ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子(tumor necrocisfactor-α,TNF-α)和脂联素。[结果]与对照组相比,MXC处理组仔鼠出生体重较低,宫内生长迟缓(intrauterine growthretardation,IUGR)发生率增高(P<0.05,P<0.01)。其仔鼠在自然出生并正常饲料喂养下,各时间段体重增长率与对照组比较,差异无统计学意义。与对照组相比,MXC处理组血糖曲线下面积(AUC)及各时间点血糖含量与正常对照组相比,差异均无统计学意义。MXC处理组的基础血糖、总胆固醇及三酰甘油与正常对照组相比,差异均无统计学意义,而高密度脂蛋白降低(P<0.01),低密度脂蛋白升高(P<0.05),C-反应蛋白含量(CRP)升高(P<0.01),TNF-α和MDA有升高趋势,脂联素与SOD有降低的趋势。[结论]大鼠孕期甲氧滴滴涕暴露所致宫内发育迟缓的雄性仔鼠出生后,在正常饲喂的情况下未出现"追赶性肥胖",成年后表现出代谢紊乱,部分指标显示有代谢综合征的趋势。     

儿童少年营养状况评价中人体测量三种方法的比较

目的：评价离差法制订生长发育标准及ＢＭＩ法、ＢＭＩ校正法评价中国儿童少年现时营养状况的合理性。方法：以身高标准体重法为标准，用单因素卡方分析判别离差法的评价效果；以Ｒｉｄｉｔ分析比较ＢＭＩ法、ＢＭＩ样下法的评价效果。结果：离差法与身高标准体重法相比，评价结果差异有显著性意义；ＢＭＩ法与ＢＭＩ校正法与身高标准体重法相比，评价结果差异也不显著性。结论：离差法评价生长发育已不符合客观实际；ＢＭＩ法对儿童     

克草霉原药小鼠急性致病性实验研究

目的:了解克草霉原药致病性强弱。方法:按《微生物农药急性致病性试验方法》(试行)1998执行。结果:小鼠经腹腔注射染毒后主要中毒症状:被毛蓬松,活动减少,体重减轻。不同时间段处死小鼠镜检可见脾脏肿大,病理组织学镜检脾脏边缘带细胞增生明显,以淋巴细胞及单核细胞为主,并见有中性白细胞浸润,可见多核巨细胞。结论:克草霉原药对小鼠具有弱致病性。