左旋肉碱通过调节脂代谢改善恶液质骨骼肌细胞萎缩

目的 探讨左旋肉碱是否能改善肿瘤恶液质的骨骼肌萎缩及可能的分子机制。方法 用100ng/ml 肿瘤坏死因子-α诱导小鼠C2C12成肌细胞萎缩建立肿瘤恶液质的骨骼肌减少的细胞模型,不同剂量左旋肉碱干预C2C12细胞肌纤维成熟过程;结晶紫染色观察各组肌纤维分化成熟状态,并通过Western Blot技术分析C2C12细胞内糖脂代谢相关蛋白的表达水平,探讨左旋肉碱能否改善骨骼肌细胞萎缩及可能的机制。结果 100μg/ml和1000μg/ml左旋肉碱干预能够促进C2C12细胞分化,抑制TNF-α诱导的肌纤维变细（P<0.001）。TNF-α组与对照组比较,肌细胞脂质代谢、糖代谢相关蛋白中 CPT-Ⅰ和PGC-1α表达下降,FOXO1、CD36以及PDK4的表达升高。左旋肉碱干预促进CPT-Ⅰ和PGC-1α的表达增加,抑制了FOXO1、CD36的表达,但对PDK4的表达无影响。结论 左旋肉碱可能通过调节肌细胞脂代谢来改善细胞肿瘤恶液质。     

保健食品中总黄酮的超声波提取条件优化研究

目的研究保健食品总黄酮含量测定的超声提取最佳条件。方法采用单因素分析法和正交试验法,以保健食品总黄酮含量为考察指标,研究不同料液比(1:25～1:5)、超声提取时间(10～40min)和乙醇浓度(50%～100%)对保健食品总黄酮提取量的影响。采用紫外分光光度法进行测定。结果由正交试验数据分析可知,影响因素的主次顺序是料液比乙醇浓度提取时间。在60%乙醇,料液比1:20,超声提取时间为20min条件下从保健食品中提取出的总黄酮含量最高,平均值为5.370mg。总黄酮的线性范围在1.0～40μg/ml之间,所得回归方程为y=0.0033x-0.0109,相关系数为0.9995,检出限为1.0μg/ml。该方法的加标回收率为95%～104%(n=3),RSD为1.717%(n=5)。结论该方法在最佳提取条件下进行,精密度和准确度均较高,空白低且稳定,适用于保健食品和某些食品中总黄酮的检测。     

PAEs对原代培养的大鼠脂肪细胞PPAR-γ2表达的影响

目的：观察邻苯二甲酸酯类化合物（Phthalate acid esters,PAEs）对原代培养的大鼠脂肪细胞过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ 2（Peroxisome prolifcrator activated receptor gamma 2,PPAR-γ 2）mRNA表达的影响。方法：对脂肪细胞进行PAEs染毒培养,观察脂肪细胞多方面的变化,评价PAEs对脂肪细胞的影响。主要实验：①显微镜每天观察脂肪细胞的形态变化;②油红O染色提取法和MTT比色法检查脂肪细胞的生长状况;③提取脂肪细胞的总RNA,通过逆转录PCR实验,分析PPAR-γ 2 mR－NA的表达情况。结果：①PAEs处理过的脂肪细胞由最初的小圆形变化为梭形最后变成椭圆形,大鼠脂肪细胞内出现脂肪颗粒,并逐渐增加,最后部分脂肪颗粒融合为较大的脂肪颗粒,符合脂肪细胞的发育规律。②随着培养液中PAEs浓度的增加,大鼠脂肪细胞产生的脂肪颗粒数量增多。③PPAR-γ 2的表达随着PAEs浓度的增加而增加。结论：可以认为PAEs通过增强PPAR-γ 2表达来促进脂肪细胞的生长发育,研究结果将会为研究PAEs与肥胖的关系提供科学依据,为进一步研究PAEs对健康的影响提供了一个新的思路。     

空腹血糖水平与肝硬化发病关系的前瞻性研究

目的 探讨中国人群中空腹血糖水平与肝硬化发病风险的关系.方法 基于河南省某县食管癌营养干预试验队列完成了一项巢式病例对照研究.利用全自动生物化学分析仪及酶联免疫法检测了310例肝硬化个体与620例对照者的基线空腹血糖以及3项肝炎病毒学标志物(HBsAg、抗-HBc与抗-HCV)水平,并从调查问卷收集了研究对象相关特征信息.使用两独立样本t检验比较了基线特征与研究因素中的连续性变量在病例组和对照组之间的分布差异,而分类变量的比较则使用了x2检验.使用多重线性回归模型对各项研究因素与血糖连续性变量的依存关系进行探索用于筛选潜在的混杂因素.在多重线性回归模型中提示与血糖浓度有关的因素以及考虑可疑的混杂因素均被纳入Logistic回归模型中作为调整以分析血糖水平与及肝硬化的联系,模型中血糖最低浓度组被定义为参考水平,对回归模型统计学意义的评价使用了似然比检验.结果 病例组与对照组血糖浓度分别为(4.5±1.8)mmol/L与(4.2±2.1)mmol/L,两者比较,差异有统计学意义(t=-2.414,P＜0.05);第5组中的研究对象与第1组即参考水平相比肝硬化发病风险升高,OR=1.672;并且血糖水平的升高与疾病发病风险的增加具有线性相关关系(P＜0.05).在对可能的混杂因素包括性别、年龄、HBsAg、抗-HCV以及饮酒情况进行调整之后,高浓度组肝硬化疾病风险的增加仍具有统计学意义(OR=1.96,P＜0.05).结论 提示较高的空腹血糖水平可能作为肝硬化一项独立的危险因素,与肝硬化发病风险升高相关.     

维生素D与肝硬化发病风险关系的前瞻性研究

目的 探讨人体血清25-羟维生素D[25-hydroxy vitamin D,25 (OH)D]与肝硬化发病风险的关系.方法 采用巢式病例对照研究设计,用酶联免疫吸附法检测来自营养干预试验队列中282例肝硬化患者和564例随机对照人群基线血清的25 (OH)D及3项肝炎病毒血清学标志物(HBsAg、抗-HBc、抗-HCV)水平,并从调查问卷中收集研究对象相关基线特征信息.以846例研究对象25 (OH)D浓度四分位数为依据将其分为4个区间,用logistic回归模型评价各区间血清25 (OH)D浓度与肝硬化发病风险的关联程度.结果 病例组和对照组25 (OH)D浓度分别为(15.3,13.8) nmol/L与(20.2,16.6) nmol/L,两组比较,差异有统计学意义(t=5.169,P=0.002);以第1区间(最低浓度组)为参考水平,第2、3、4区间OR值及95％置信区间(95％CI)分别为0.495 (0.333 ～ 0.736)、0.452 (0.303 ～ 0.675)、0.349 (0.231 ～ 0.527),对可能的影响因素进行调整后,第2、3、4区间OR值及95％ CI分别为0.499 (0.328 ～ 0.759)、0.427(0.278 ～ 0.654)、0.344 (0.222 ～ 0.532),25 (OH)D浓度的升高与肝硬化发病风险的下降存在线性关系(x2=25.200,P＜0.01).结论 肝硬化发病风险随血清25 (OH)D浓度的增高而降低,维生素D可能是肝硬化发病的一项保护因素.     

左旋肉碱经Runx2/COL1A1通路抑制老年鼠肿瘤恶 液质的骨骼肌纤维化

目的 探讨左旋肉碱经Runx2/COL1A1通路抑制老年鼠肿瘤恶液质的骨骼肌纤维化。方法 用结肠癌MC38细胞在C57老 年鼠右侧腹股沟皮下植瘤构建肿瘤恶液质模型，实验分为非荷瘤组、荷瘤组和左旋肉碱组，并进行相应干预。实验结束后取一侧腓 肠肌称重，行苏木精⁃伊红染色（HE染色）和Masson染色后，分别测量腓肠肌横截面积和胶原纤维面积占比；对侧腓肠肌提取总蛋白， 蛋白质印迹法检测Runx2和COL1A1蛋白水平。体外实验用转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导NIH/3T3细胞，建立体外纤维化模型， 经左旋肉碱干预后，分别提取总蛋白和mRNA，蛋白质印迹法检测Runx2和COL1A1蛋白水平，并用qRT⁃PCR检测COL1A1 mRNA水 平，转染cDNA⁃Runx2验证左旋肉碱通过Runx2调控COL1A1。结果 三组进行比较，荷瘤组腓肠肌重量明显低于非荷瘤组（[ 98.12± 17.04）mg 比 (122.18±6.91）mg（] P<0.05）；荷瘤组腓肠肌横截面积（207.46±54.55）µm2 显著低于非荷瘤组（488.61±46.72）µm2 和左旋肉 碱组（434.54±113.84）µm（2 P<0.05）；胶原纤维面积占比荷瘤组（9.69±1.55）%明显高于左旋肉碱组（5.48±1.19）%和非荷瘤组（3.88±0.86）% （P<0.05）。蛋白质印迹法结果显示，与其他两组相比，荷瘤组Runx2和COL1A1高表达（P<0.05）。体外研究表明，左旋肉碱可逆转 TGF⁃β1诱导的Runx2蛋白和COL1A1 mRNA高表达。过表达Runx2结果证实左旋肉碱通过抑制Runx2蛋白的表达下调COL1A1 mRNA。 结论 左旋肉碱通过降低Runx2/COL1A1改善老年鼠肿瘤恶液质的骨骼肌纤维化。     

血清钙离子水平与肝硬化发病风险相关性研究

目的探讨成年人血清钙离子水平与肝硬化发病风险间的关系。方法在河南省林县食管癌营养干预试验队列中开展巢式病例对照研究。利用全自动生物化学分析仪和酶联免疫法检测281名肝硬化病例和562名对照个体的基线血清钙浓度以及HBsAg、抗一HBc、抗一HCV,采用调查问卷收集研究对象相关基线特征信息。研究对象血钙水平以三分位分组并使用多因素logistic回归模型计算各组肝硬化发病OR值及其95％C／。结果病例组血清钙离子水平为(1．81±0．84)mmol／L,高于对照组(1．65±0．79)mmol／L,f=一2．640,P=0．008。血清钙的不同取值水平与肝硬化发病率有关(X²=6．888,P=0．0319)。血钙浓度最高组患肝硬化的风险约为最低组的2倍(OR=2．261,95％CI：1．497～3．416,P=0．002),且血钙水平与肝硬化风险呈正相关(X²=6．842,P=0．0089)。结论 中国人群中高血清钙水平可能作为肝硬化发生一项独立的危险因素,其机制尚需进一步研究。     

PAEs对原代培养的大鼠脂肪细胞PPAR-γ2表达的影响

目的:观察邻苯二甲酸酯类化合物(Phthalate acid esters,PAEs)对原代培养的大鼠脂肪细胞过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ2(Peroxisome prolifcrator activated receptor gamma 2,PPAR-γ2)mRNA表达的影响。方法:对脂肪细胞进行PAEs染毒培养,观察脂肪细胞多方面的变化,评价PAEs对脂肪细胞的影响。主要实验:①显微镜每天观察脂肪细胞的形态变化;②油红O染色提取法和MTT比色法检查脂肪细胞的生长状况;③提取脂肪细胞的总RNA,通过逆转录PCR实验,分析PPAR-γ2 mR-NA的表达情况。结果:①PAEs处理过的脂肪细胞由最初的小圆形变化为梭形最后变成椭圆形,大鼠脂肪细胞内出现脂肪颗粒,并逐渐增加,最后部分脂肪颗粒融合为较大的脂肪颗粒,符合脂肪细胞的发育规律。②随着培养液中PAEs浓度的增加,大鼠脂肪细胞产生的脂肪颗粒数量增多。③PPAR-γ2的表达随着PAEs浓度的增加而增加。结论:可以认为PAEs通过增强PPAR-γ2表达来促进脂肪细胞的生长发育,研究结果将会为研究PAEs与肥胖的关系提供科学依据,为进一步研究PAEs对健康的影响提供了一个新的思路。