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血管生成抑制因子METH-1腺病毒载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:利用大肠杆菌同源重组构建重组腺病毒载体并在293细胞制备高滴度的病毒。方法:实验于2004—08/2005-08在中山大学眼科中心国家重点实验室完成。自真核表达载体pMD18-T—METH1中酶切出METH1基因,亚克隆至带有增强型绿色荧光蛋白表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移质粒pAdTrack-CMV-METH1,在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd-METH1。以pAd-METH1为模板,经DNA测序正确后,用PacⅠ酶切线性化pAd-METH1,转染293细胞,包装成重组病毒颗粒,荧光显微镜观察转染细胞增强型绿色荧光蛋白的表达,采用聚合酶链反应方法对重组腺病毒进行鉴定。结果:①构建了携带外源基因人血管生成抑制因子的穿梭载体pAdTrack-CMV-METH1。②制备了METH1重组腺病毒载体pAdEasy—METH1。③METH1重组腺病毒可感染293细胞并在293细胞中进行有效的复制。结论:应用细菌内同源重组能够快速构建腺病毒载体,制备高滴度重组病毒,为METH1基因功能研究奠定了基础。 相似文献
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目的 了解非梗阻性无精子症患者的生育生活质量现状及其影响因素。
方法 选取生殖中心就诊的311例非梗阻性无精子症患者,采用一般情况问卷、简明中文版生育生活质量量表及社会支持评定量表进行横断面问卷调查。
结果 非梗阻性无精子症患者生育生活质量得分为(65.55±13.52)分。回归分析显示,不育年限、家庭年收入、接受辅助生殖技术治疗次数和社会支持为非梗阻性无精子症患者生育生活质量的影响因素,可解释总变异的35.4%。
结论 非梗阻性无精子症患者生育生活质量较低,医护人员应重点关注不育年限长、家庭收入低、接受辅助生殖技术治疗次数多及社会支持水平低者,采取针对性干预措施提高其生活质量。 相似文献
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目的:分析影响供精人工授精成功率的相关因素。方法:回顾性分析2007年4月~2008年4月期间在该院行供精人工授精(artificial insemination with donor semen AID)的840例妇女,共1 478个周期。分析年龄、输卵管通畅情况、子宫内膜类型、AID手术方式与AID成功率的关系。结果:①年龄越大,AID成功率越低,大于35岁的不孕妇女AID成功率明显下降。②输卵管欠畅,AID)成功率明显下降。③子宫内膜A型的病例AID成功率高于其他类型的病例。④宫颈内和宫腔内人工授精的成功率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:不孕妇女的年龄、输卵管治疗史及子宫内摸类型是影响AID治疗成功率的重要因素,在无宫颈因素的妇女中,宫颈内人工授精较宫腔内人工授精操作更简便,成本低,且成功率相似,应该考虑首选宫颈内人工授精。 相似文献
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目的:观察供精体外受精-胚胎移植术(D-IVF)中采用密度梯度离心法联合上游法处理精液后的胚胎情况。方法:回顾本院2013年1月-2014年7月D-IVF 135个周期,观察冷冻精液复苏后经采用密度梯度离心法联合上游法处理后精子总活动率、前向运动精子活动率等精液情况,以及受精以后的受精率、卵裂率、临床妊娠率,对照组为同期46个因丈夫梗阻性无精行ICSI的周期。结果:处理后精子总活动率、前向运动精子活动率均大大提高,但是精子密度却大大下降,处理前后比较差异均有统计学意义(P0.05);受精以后的实验室资料和对照组比较,各项参数差异无统计学意义(P0.05)。结论:密度梯度离心法联合上游法的精液处理方法在D-IVF中是一种稳定可行的方法。 相似文献
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新二氢吡类钙拮抗剂MN9202对实验性小鼠脑缺血的防护作用 总被引:2,自引:1,他引:1
目的:观察新的二氢吡啶类钙拮抗剂MN9202对实验性小鼠脑缺血的防护作用,方法:采用小鼠双侧颈总动脉结扎及断头法引起脑缺血,10μg/kg,100μg/kg不同剂量MN9202及100μg/kg尼莫地平(Niumodipine)对小鼠存活时间,喘息时间以及脑组织Ca^2 ,Mg^2 和水的含量变化。结果:MN9202和尼莫地平均可明显延长颈总动脉结轧引起的脑缺血小鼠存活的时间,增加断头小鼠的喘息时间。MN9202可降低部分扎颈总动脉小鼠脑水肿程度,减少缺血组织内Ca^2 含量并防止Mg^2 含量前失。结论:MN9202对小鼠脑缺血具有防护作用。 相似文献
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目的分析探讨多种因素对供精人工授精(AID)妊娠结局的影响。方法回顾性分析2013年1月-2015年12月期间在本中心治疗的10 690个AID周期,对女方年龄、不孕年限、治疗方案、输卵管通畅程度、子宫内膜厚度、每周期排卵数、每周期A I D授精次数、精子冻融复苏后浓度、精子冻融复苏后活动率、精子冻融复苏后前向运动精子总数与术后妊娠结局进行χ~2和多因素Logistic回归分析。结果年龄≤30岁妇女的妊娠机会是年龄35岁者的1.934倍(OR=1.934,P0.001)、年龄31~35岁妇女的妊娠机会是35岁者的1.511倍(OR=1.511,P0.001),自然周期妇女妊娠机会是促排卵周期者的1.307倍(OR=1.307,P0.001),每周期AID授精2次的妇女妊娠机会是1次组的1.486倍(OR=1.486,P=0.001),每周期AID授精3次的妇女妊娠机会是1次组的1.338倍(OR=1.338,P=0.020),每周期排卵2个的妇女妊娠机会是排1个卵组的1.362倍(OR=1.362,P=0.001),每周期排卵3个的妇女妊娠机会是排卵1个组的1.499倍(OR=1.499,P=0.004),精子冻融复苏后活动率60%的妇女妊娠机会是≤60%组的1.211倍(OR=1.211,P=0.038),精子冻融复苏后前向运动精子总数≥35×10~6的妇女妊娠机会是≤25×10~6组的1.319倍(OR=1.319,P=0.011)。结论女方年龄≤35岁、每周期排卵2~3个、每周期AID授精2~3次、精子冻融复苏后活动率60%和精子冻融复苏后前向运动精子总数≥35×10~6能提高授精妇女的妊娠几率;在患者无明显排卵障碍的情况下,应首选自然周期。 相似文献
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目的:探讨氯米芬诱导排卵的供精人工授精(AID)周期注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)日卵泡直径与妊娠率的关系。方法:回顾性分析氯米芬诱导排卵行AID共212个周期,根据hCG日最大卵泡直径分为:A组(18~19.5 mm)、B组(20~21.5 mm)、C组(22~23.5 mm)、D组(≥24 mm),分析比较4组的周期妊娠率。结果:4组妊娠率分别为24.39%、14.29%、18.18%、7.14%,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:就本研究目前的资料分析,氯米芬周期hCG扳机日卵泡直径与妊娠率无相关性。 相似文献
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目的 探讨神经发育音猬因子(SHH)诱导恒河猴骨髓间质细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的丝裂原活化蛋白激酶信号分子变化. 方法 密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓干细胞,应用Westem-blot方法检测SHH诱导细胞内信号蛋白变化,免疫组化方法观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂对细胞诱导过程的影响. 结果 SHH诱导恒河猴BMSCs分化为神经样细胞分化过程,细胞内激酶p38在加入诱导液5 min后即被激活,随着时间的延长持续升高,1h达到最高峰,诱导前、后p38的总量未见变化;而磷酸化的ERKl/2被抑制,5 min时即开始减少,在2h内逐渐降低,诱导前、后ERKl/2的总量未见变化. 结论 MAPK激酶系统参与SHH诱导恒河猴MSCs分化为神经样细胞分化过程,p38被激活,而ERK被抑制. 相似文献
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目的:探讨夫精人工授精(AIH)活产率的影响因素。方法:选择2011年1月—2021年9月在广东省生殖医院生殖中心治疗的1 232对夫妇,共计2 391个AIH周期,采用卡方检验和广义估计方程分析活产率的影响因素。结果:女性年龄≥40岁[OR=0.270,95%CI(0.084,0.874)]显著降低授精妇女的活产率;而月经第3天促黄体生成素>8.00 IU/L[OR=1.734,95%CI(1.167,2.576)]、促排周期[OR=1.472,95%CI(1.037,2.090)]、每周期排卵3个[OR=1.567,95%CI(1.007,2.437)]和精子处理前前向运动精子总数>2×107个[OR=2.232,95%CI(1.295,3.847)]显著提高授精妇女的活产率。结论:女性年龄、月经第3天促黄体生成素浓度、治疗方案、每周期排卵数以及处理前前向运动精子总数影响夫精人工授精妇女的活产率。 相似文献