PCR-ELISA检测弓形虫实验研究

目的建立快速、敏感、特异、稳定的PCR—ELISA方法，并用其检测感染动物体内的弓形虫。方法将生物素标记的PCR产物与地高辛标记的特异性探针杂交，再通过酶免显色反应测出OD值。以判断弓形虫感染情况。测定该方法的敏感性、特异性及稳定性。再分别以10^4、10^3弓形虫RH株速殖子腹腔接种小鼠。取全血、肝组织用PCR—ELISA检测小鼠感染情况。结果本实验中，PCR-ELISA方法的检测闻值为20fg弓形虫DNA，其灵敏度是电泳法的10倍，并且与人、小鼠、疟原虫、旋毛虫等DNA均无交叉反应。同一样本重复测试5次，结果经统计学检验，一致性良好（Alpha=0．72）。检测感染动物肝组织及全血标本，10^4、10^3组分别在感染后第二d、第三d即可测出阳性，两种标本的阳性检出效率无统计学差异（P〉0．05）。结论PCR—ELISA是一种快速、敏感、特异、稳定的检测方法，可试用于临床弓形虫病的诊断及流行病学调查。     

设计性实验在人体寄生虫学实验教学中的应用

在2届卫生系(预防医学专业)和2届七年制(临床医学专业)人体寄生虫学实验课教学中开展了三种形式的设计性实验。实践证明,设计性实验能够使理论联系实际;教学与科研密切结合;对学生巩固所学专业知识,提高独立思考能力,提高查阅文献、书写开题报告,分析问题、解决问题及撰写论文的能力;培养和锻炼动脑、动手实际操作的能力,激发学生的创造潜力,培养创造性人才大有好处。     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原免疫小鼠CD11c~+CD8_α~-DC对过敏性哮喘的抑制作用

目的研究日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)免疫小鼠CD11c+CD8α-树突状细胞(DC)亚群对卵清白蛋白(OVA)诱发的过敏性哮喘的抑制作用。方法 BALB/c小鼠经腹腔及足垫注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。用抗体包被的免疫磁珠分离小鼠脾CD11c+CD8α+DC与CD11c+CD8α-DC亚群。另取18只BALB/c小鼠,随机分为4组,A组为健康对照组,B组为OVA致敏单纯哮喘组,C组为过继转移SEA免疫CD11c+CD8α+DC组,D组为过继转移SEA免疫CD11c+CD8α-DC组。C、D组小鼠分别经尾静脉过继转移5×105个CD11c+CD8α+DC和5×105个CD11c+CD8α-DC,1h后B、C、D组小鼠同时用OVA诱发哮喘,4周后剖杀,取肺组织,做病理切片,经苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺部炎症变化。结果 A组小鼠肺组织无炎症反应;B组小鼠肺组织炎症反应广泛且严重,在支气管及肺泡周围有大量炎性细胞浸润;C组小鼠肺组织炎症反应仍较明显;D组小鼠肺组织炎症反应较B、C组显著减轻,仅有少量炎细胞浸润。4组小鼠按照Underwood标准进行病理评分,总分分别为0、14.00±1.00、12.33±0.58和7.20±1.30,差异有统计学意义(P<0.05)。结论日本血吸虫SEA免疫小鼠CD11c+CD8α-DC亚群对过敏性哮喘有抑制作用。     

大蒜素与复方磺胺甲噁唑联用对弓形虫感染小鼠的保护作用

目的 :研究大蒜素与SMZCo对小鼠弓形虫感染的保护作用。方法 :36只小鼠腹腔接种 1×10 5个RH株弓形虫速殖子 ,4h后分 4组 (每组 9只 )灌胃给药 ,每日 1次。A组为空白对照组 ,B组给SMZCo ,C组给大蒜素 ,D组给大蒜素和SMZCo。大蒜素 30mg·kg- 1,给药 18d ;SMZCo 4 0 0mg·kg- 1,给药 8d。结果 :A组小鼠感染后 6d内全部死亡。B组死亡 7只 ,死亡率、复发率均为10 0 %。C组死亡率为 63% ,复发率为 0。D组复发率为 33% ,与B组比较 ,P <0 .0 5 ,与C组比较 ,P>0 .0 5 ,D组死亡率为 5 6%。结论 :大蒜素与SMZCo联合使用能有效的控制急性弓形虫病 ,降低弓形虫病的复发率     

犬弓蛔虫多聚蛋白变应原TBA-1的识别、鉴定及表达

线虫多聚蛋白变应原(NPA)是一种15kDa抗原,富含于虫体及虫体分泌物、排泄物中。NPA前体cDNA由重复单位组成,每个重复单位编码一个15kDa蛋白。多数情况下其氨基酸序列很少改变。TBA-1是犬弓蛔虫     

医学生综合能力考核方法的改革实践与思考

文章从医学生综合能力考核改革的背景、考核的内容和与一阶段考试的差别以及综合能力考核反馈和效果等方面介绍了自2005年来天津医科大学基础医学院医学生综合能力考核方法的改革实践,提出考核方法要符合教学目标,才能促进学生学习、促进教师教学,起到引导督促的作用。     

血吸虫可溶性虫卵抗原对哮喘的抑制作用及机制研究

目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对哮喘发生的抑制作用及免疫调节机制。方法BALB/C小鼠腹腔及足垫注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠产生过敏性哮喘,剖杀小鼠,取肺组织进行病理学检查;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片、染色后进行细胞分类计数;分离脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)占CD4+T细胞的比例。结果 SEA免疫并OVA致哮喘组小鼠肺组织炎症明显轻于OVA单纯哮喘对照组,只有少量炎性细胞浸润。BALF涂片染色后发现SEA免疫组BALF中的细胞密度低于对照组,其中嗜酸性粒细胞占总细胞数的比例(2.2±1.5)%明显低于对照组(19.9±4.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果发现SEA免疫组小鼠脾细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞总数的(32.2±2.2)%,明显高于对照组(27.4±2.9)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SEA对哮喘的发生有一定的抑制作用,其机制可能是通过CD4+CD25+调节性T细胞影响机体的免疫调节机制。     

小鼠免疫清除马来丝虫微丝蚴不需要IFN-γ和NO产物

以往的研究显示马来丝虫微丝蚴主要诱导Th1型细胞因子的产生 ,体外一氧化氮(NO)能够介导微丝蚴的死亡。本研究提出了快速清除 (CBA/Ca)和缓慢清除 (C57BL/6 )小鼠产生的γ干扰素 (IFN γ)对清除微丝蚴的作用。给 6 - 8周雄性鼠 (CBA/Ca鼠和C57BL/6鼠 )尾静脉注射 2× 1 0 5微丝蚴后第1 0天 ,CBA/Ca鼠血内微丝蚴数量 ( 6± 5/ml)较C57BL/6鼠 ( 1 2 85± 31 1 /ml)显著地减少(P <0 .0 5) ,感染后第 4 ,7和 1 0天 ,用夹心ELISA法检测两组鼠脾细胞在体外经微丝蚴可溶性Ag刺激后产生细胞因子的能力 ,结果CBA/Ca小鼠产生的IFN γ…     

用于免疫诊断的粪类圆线虫幼虫抗原的特性

鉴于人体粪类圆线虫幼虫在粪便中密度低,经粪检难以确诊以及经间接ELISA检测血清中IgG的特异性差,研究粪类圆线虫特异性抗原以提高免疫学诊断效果显得很重要。现已证明感染者血清中IgG能特异地识别丝状蚴41,31和28kDa蛋白。本文对这些蛋白的特性、免疫显性表位、抗体活性进行了实验研究。