ELISA检测小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的优化

目的针对ELISA法检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),对小麦粉样品中DON提取和DON标准工作液制备进行优化。方法以超声提取法提取小麦粉样品中的DON,以含10%甲醇的DON阴性样品提取液作DON的ELISA标准工作液溶解相,对检测方法进行优化,并以优化的方法对50份小麦粉样品进行检测。结果检测方法经优化后,样品经超声提取仅需10 min,2 500.00 ng/g、500.00 ng/g、100.00 ng/g 3个浓度水平的平均回收率为94.69%~102.71%,平均CV%为6.50%,50份小麦粉样品DON检出率为30.00%,DON污染水平在57.26~112.37μg/kg,中位数为84.12μg/kg,所有样品中DON含量均未超过国家规定的限量标准。结论优化后的检测方法,大大缩短了样品提取时间,提高了样品提取率,降低了样品基质的干扰,方法重复性良好。     

2010年济南铁路辖区餐饮单位食(饮)具消毒效果调查

[目的]了解济南铁路辖区餐饮单位食(饮)具消毒效果,进一步加强消毒管理工作。[方法]2010年1～12月采集济南铁路辖区不同餐饮单位食(饮)具1 158份,按GB 14934-94大肠菌群快速检验纸片法检验大肠菌群。[结果]检测食(饮)具样品1 158份,合格的1 092份,合格率为94.30%。氯制剂浸泡法消毒合格率最高为98.28%,不同消毒方法消毒的食(饮)具合格率的差异有统计学意义(P<0.01);托幼机构合格率最高为100.00%,不同单位食(饮)具合格率的差异有统计学意义(P<0.01);茶杯合格率最高为100.00%,不同种类食(饮)具间合格率的差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]济南铁路辖区餐饮单位食(饮)具消毒合格率较高。     

济南铁路辖区2006～2010年食(饮)具消毒效果分析

目的了解2006～2010年济南铁路辖区餐饮业食(饮)具卫生状况和消毒效果,减少传染病的发生和流行。方法根据GB 14934-94食(饮)具消毒卫生标准,随机抽取了消毒后准备使用的各类食(饮)具检测感官指标、理化指标、大肠菌群和致病菌,所得数据以SPSS 13.0统计软件卡方检验。结果 2006～2010年,济南铁路辖区10 623份食(饮)具合格率为96.55%,各年度食(饮)具合格率总体呈逐年上升趋势;第一季度、第4季度合格率高于第2季度、第3季度(χ2=38.60,P<0.01);幼儿园和餐车合格率高于宾馆、饭店和食堂(χ2=163.78,P<0.01);杯子、一次性餐具、其他小件食(饮)具的合格率高于盘、碗、菜盆(χ2=42.70,P<0.01)。结论 2006～2010年济南铁路辖区食(饮)具合格率较高,卫生监督、疾控部门以及食(饮)具所属单位在巩固已有成效的同时,要继续加强食(饮)具的卫生管理,重点加强对第2季度、第3季度尤其是使用频率较高、体积较大的食(饮)具的卫生监督、技术指导和管理,不断提高合格率。     

抗脱氧雪腐镰刀茵烯醇单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备抗脱氧雪腐镰刀茵烯醇(DoN)单克隆抗体(McAb)并对其进行初步鉴定.方法 采用小剂量长周期的免疫方案,以DON-牛血清白蛋白(BSA)偶联物免疫雌性BALB/c小鼠,采用细胞融合的方法制备杂交瘤细胞株,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中McAb,对抗体分泌阳性的细胞株进行克隆化,直至抗体阳性率100%,用竞争抑制ELISA法进一步检测McAb的特异性,腹水诱生法制备大量McAb,并用饱和硫酸铵对其进行纯化,用抗体亚类鉴定试剂盒对该McAb亚类进行鉴定,BCA蛋白测定试剂盒测定蛋白含量,ELISA检测McAb的滴度、参考工作稀释度和亲和常数.结果 DON-BSA免疫的BALB/c小鼠血清效价为1∶256000,与BSA有强烈的交叉反应.细胞融合后,ELISA筛选抗体分泌阳性的杂交瘤细胞株,经3轮克隆化,建立了1株能稳定分泌抗DON-BSA McAb的杂交瘤细胞株3G5,腹水诱生法制备了大量的McAb.该McAb属IgG1,IgG含量为6.06 g/L,抗体滴度为1∶500000,参考工作稀释度为1∶64 000,抗体亲和常数为1.62×109.用间接竞争抑制ELISA测得校正曲线线性范围9.8～10 000 ng/mL,线性方程Y=-0.272 6X+0.225 9(r=0.930 9).结论 获得了分泌抗DON-McAb的杂交瘤细胞株,该单克隆抗体灵敏度高,特异性强,可用于制备高质量国产DON-ELISA检测试剂盒.     

由溶藻弧菌引起的一起食物中毒

2004年8月，一旅游团在某海滨城市就餐5h后乘火车离开。上车1h后，部分成员出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状。接报后疾控中心遂派人进行了调查处理。现将调查结果报告如下：     

抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立

目的制备抗赭曲霉毒素A（OA）的单克隆抗体（McAb）并对其进行初步鉴定,在此基础上建立竞争抑制酶联免疫吸附试验（ELISA）用于OA的检测。方法采用小剂量长周期的免疫方案,以OA 牛血清白蛋白（BSA）偶联物免疫雌性BALB/c小鼠,采用细胞融合法获得分泌抗OA的McAb的杂交瘤细胞株,用竞争抑制ELISA法进一步检测McAb的特异性,腹水诱生法大量制备McAb,以OA为竞争抗原,建立检测OA的竞争抑制ELISA。结果OA BSA免疫的BALB/c小鼠血清效价为1:512?000,与BSA有强烈的交叉反应。细胞融合后,ELISA筛选抗体分泌阳性的杂交瘤细胞株,抗OA BSA的McAb与BSA的交叉反应率仅为3.5%,对分泌抗OA BSA特异的McAb的细胞株经3轮克隆化,抗体分泌阳性率达到100%,建立了1株能稳定分泌抗OA BSA McAb的杂交瘤细胞株,竞争抑制法进一步证明了该抗体是特异针对OA的,腹水诱生法制备了大量的McAb。竞争抑制ELISA线性范围为0.24～125?ng/mL,线性方程y=-0.113?2logx+0.901?6,相关系数r=0.98,最低检出浓度为0.24?ng/mL。样品的加标回收率为97.07%～107.83%。结论获得了分泌抗OA的McAb的杂交瘤细胞株,建立了OA检测的简单、灵敏、高效的ELISA检测方法。