熊去氧胆酸对α-萘异硫氰酸酯诱导大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 探讨熊去氧胆酸(UDCA)对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导大鼠胆汁淤积性肝损伤的保护作用及作用机制.方法 取SD大鼠48只,其中42只以ANIT 100 mg/kg灌胃造成急性肝损伤,在肝损伤后24 h处死6只,其余均分为对照组和UDCA组各18只.对照组予0.9％NaCl溶液灌胃,UDCA组予20 mg/kg UDCA灌胃,分别在造模后48、72、96 h各处死6只,另6只不予处理为空白对照组.所有大鼠处死留取血清和肝组织,检测血清ALT、AST、Tbil、总胆汁酸(TBA),ELISA法检测血清IL-10、IL-6、TNF-α,实时荧光定量PCR检测肝组织多药耐药相关蛋白2(Mrp2) mRNA,HE染色观察肝组织炎性反应活动度.结果 肝损伤造模后48 h,UDCA组和对照组血清Tbil[(143.80±12.08) μmol/L比(178.50±15.19)μmol/L]、TBA[( 13.15±3.81) μmol/L比(21.68±7.93)μmol/L]、IL-10[(44.13±3.68)ng/L比(37.15±6.25)ng/L]、IL-6[(50.80±2.09) ng/L比(57.32±4.63)ng/L]、TNF-α[(17.53±0.84)ng/L比(19.10±1.64) ng/L]比较,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);肝损伤造模后72 h,UDCA组和对照组血清ALT[(721.67±97.54)U/L比(929.50±148.29)U/L]、IL-10[(54.68±6.79)ng/L比(43.85±4.08)ng/L]比较,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);肝损伤造模后96 h,UDCA组和对照组血清ALT[(156.83±14.99)U/L比(250.67±42.29)U/L]、AST[(143.67±27.45) U/L比(206.00±63.94)U/L]、Tbil[(23.53±5.08)μmol/L比(34.02±9.98)μmol/L]比较,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).肝损伤造模后UDCA组和对照组肝组织Mrp2 mRNA表达在48 h(0.77±0.21、0.46±0.25)、72 h(2.27±0.84、1.10±0.38)、96 h(3.64±0.54、2.75±0.69)各时间点差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论 UDCA对ANIT诱导的胆汁淤积性肝损伤保护作用机制可能和调控血清细胞因子及肝脏Mrp2表达有关.     

中医辨证治疗对NAFLD大鼠血脂等影响的实验研究

目的:探讨中医辨证治疗对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠各时期血脂等指标影响的作用机制,为临床防治NAFLD提供理论依据。方法:取SPF级Wistar大鼠72只,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、对照药物治疗组、药物A方治疗组、药物B方治疗组、先A方后B方治疗组、先B方后A方治疗组、先空白后A方治疗组、先空白后B方治疗组,共9组。除正常组给予普通饲料外,其余各组均饲以高脂饲料。造模第4周后,模型组加用生理盐水灌胃;对照组加用对照药物灌胃;药物A方组加用治疗药物A方灌胃;药物B方组加用治疗药物B方灌胃;先A方后B方治疗组即4～8周用A方,8～12周用B方灌胃;先B方后A方治疗组即4～8周用B方,8～12周用A方灌胃;先空白后A方治疗组即先空白,第8～12周用A方灌胃;先空白后B方治疗组即先空白,第8～12周用B方灌胃。实验第12周时,测定大鼠血清TCH、TG、HDL、LDL、FFA、GSH-ST、TNF-α的值。结果:实验第12周时,先A方后B方治疗组(编号为6组)降低NAFLD后期大鼠血清TG、TCH、LDL、FFA、TNF-α及升高血清GSH-ST水平的疗效与其他治疗组相比尤为显著(P<0.01或P<0.05)。结论:在NAFLD的整个病程中,采取早期阶段运用疏肝健脾、活血化瘀、化痰利湿功效的治法,后期阶段运用化痰消瘀、清热利湿、补益肝肾功效的治法的治疗方案,对于降低大鼠血脂等指标及提高大鼠抗氧自由基的疗效显著优于其他治疗措施。     

慢性肝病患者血清总胆汁酸水平与肝组织炎症分级的量化关系研究

目的 研究血清总胆汁酸(tba)水平与慢性肝病患者肝组织炎症分级间的量化关系.方法 用循环酶法检测172例各类慢性肝病患者血清tba水平,并进行肝组织病理活检,以确定炎症分级.采用spss12.0软件包分析tba与肝组织炎症分级之间的量化对应关系.结果 血清tba水平与肝组织炎症分级呈正相关(r=0.275,p＜0.01);当tba达到20 μmol/l时,肝组织炎症分级达到g2水平.结论 血清tba水平在评估慢性肝病患者肝组织炎症分级方面具有重要意义. abstract： objective to investigate the correlation of serum total bile acid (tba) levels with the inflammation grades of liver tissue in chronic liver diseases.methods cyclophorase assay was used to detect the serum tba levels in 172 patients with various chronic liver diseases,and the inflammation grades of liver tissue were determined by liver biopsy.the correlation between serum tba levels and the inflammation grades of liver tissue was evaluated using spss 12.0 software.results serum tba level was positively correlated with the inflammation grade of liver tissue ( r =0.275,p ＜ 0.01 ).the inflammation grade reached g2 when serum tba was 20 μmol/l.conclusion serum tba level may be useful for evaluating the inflammation grade of liver tissue in chronic liver diseases.     

复方溃疡灵治疗胃溃疡的实验研究

目的　探讨复方溃疡灵治疗胃溃疡的疗效。方法　采用大鼠醋酸型胃溃疡模型和幽门结扎法造模,观察大鼠胃液量及总酸度、1h总酸排除量,采用Mett法测定胃蛋白酶含量,以溃疡最长径和最短径的均值表示胃溃疡指数,采用放免法测定胃泌素及肿瘤坏死因子含量。结果　复方溃疡灵能降低胃液总酸度,抑制胃液的分泌,降低溃疡指数,抑制胃蛋白酶的活性,升高血中肿瘤坏死因子的作用。但对胃液pH值、血清胃泌素升高的作用与空白组相比较无显著差异;结论　复方溃疡灵能增强胃粘膜分泌胃液的功能,降低胃酸度并抑制胃蛋白酶活性。     

自然病程下HBV-DNA阳性慢性乙型肝炎孕妇不同孕期HBV载量的变化及临床意义

目的分析自然病程下HBV-DNA呈阳性的慢性乙型肝炎(CHB)孕妇在孕早期、中期及晚期时乙型肝炎病毒(HBV)载量的变化情况及其与肝功能检测指标间的关系。方法分析在医院门诊部接受诊治的31例CHB合并HBV-DNA阳性孕妇的临床资料,比较T1期(孕早期)、T2期(孕中期)及T3期(孕晚期)的CHB孕妇的乙肝表面抗原(HBsAg)、HBV-DNA病毒载量及血清肝功能指标(包括直接胆红素DBIL、总胆红素TBIL、白蛋白ALB、总蛋白TP、胆碱酯酶ChE、谷氨酰转移酶GGT、谷草转氨酶AST、碱性磷酸酶ALP及谷丙转氨酶ALT)的表达水平。相关性分析T1、T2、T3期CHB孕妇的HBV-DNA病毒载量与血清肝功能指标间的关系。结果自然病程下CHB孕妇的HBV-DNA病毒载量在T1、T2、T3期呈显著上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。T1、T2、T3期CHB孕妇的血清肝功能指标GGT、ALP、ALT等水平均随着孕周的不断增加而逐渐上升,并伴随了整个妊娠过程,差异有统计学意义(P<0.05)。不同孕期CHB孕妇的HBV-DNA病毒载量与血清肝功能检测指标无显著相关性(P>0.05)。结论在自然病程下CHB孕妇不同孕期的HBV-DNA病毒载量呈上升趋势,未接受相关抗病毒治疗则可能存在肝功能损害现象,但HBV-DNA载量的多少不能用于肝功能损伤程度的判断依据。     

山楂叶总黄酮对非酒精性脂肪性肝病细胞病理及血脂影响的实验研究

目的:探讨山楂叶总黄酮(HLF)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞病理及血脂影响的干预机制。方法:采用肝L-02细胞诱导建立NAFLD模型,分为正常组、模型组、水飞蓟素组和山楂叶总黄酮(HLF)组共4组,运用HLF进行干预,检测肝细胞的抑制率、甘油三酯(TG)及超微量Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性,并观察肝细胞超微病理改变。结果:模型组细胞生长明显受抑制,HLF药物组细胞生长的抑制率显著低于模型组,组间比较有极显著差异(P0.01或P0.05)。HLF药物组降低TG,提高超微量Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力与模型组相比较有极显著差异(P0.01)。模型组肝细胞线粒体水肿,外膜破裂,细胞核形状改变,呈凋亡特征性改变;HLF药物组肝细胞病理损伤较模型组明显改善。结论:HLF能显著降低NAFLD肝细胞的生长抑制率,减轻NAFLD对肝细胞的病理损伤,能降低TG并提高超微量Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力,干预脂肪性肝病的进展。     

山楂叶总黄酮对NAFLD肝细胞凋亡影响的研究

目的探讨山楂叶总黄酮（HLF）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）肝细胞凋亡的影响。方法采用肝L-02细胞诱导NAFLD模型,分为正常组、低剂量组、高剂量组、模型组4组,采用不同浓度HLF进行干预,低剂量组HLF100滋g/ml,高剂量组HLF400滋g/ml。观察细胞的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,Westernblot检测凋亡蛋白表达的变化。结果模型组细胞形态学发生改变,HLF药物干预后,高剂量组细胞形态学改变明显好于低剂量组及模型组;模型组与HLF高剂量组早期凋亡率[（14.63±1.82）%、（6.75±1.83）%]比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;模型组与HLF高剂量组中晚期凋亡率[（11.36±2.94）%、（3.49±1.03）%]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;HLF高、低剂量组中晚期凋亡率[（3.49±1.03）%、（8.79±1.05）%]比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;模型组与HLF高、低剂量组总凋亡率比较,差异有统计学意义（P＜0.05或0.01）。Bax、Cyt-C和Caspase-9促凋亡蛋白在模型组中表达明显增高,Bcl-2、MitochondriaCytochromeC抗凋亡蛋白在高剂量组及正常组中高表达;模型组与高、低剂量组凋亡蛋白Bax/Bcl-2的比值[（1.999±0.376）、（0.144±0.023）、（0.399±0.045）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;模型组与高、低剂量组凋亡蛋白Cytosolic/MitochondriaCytochromeC的比值[（0.287±0.037）、（0.041±0.006）、（0.097±0.024）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;模型组与高、低剂量组凋亡蛋白CleavedCaspase-9的表达[（0.060±0.005）、（0.030±0.003）、（0.030±0.003）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论NAFLD细胞模型存在凋亡现象,HLF药物可能通过调节Bcl-2、Bax、CytochromeC、Caspase-9等相关凋亡蛋白的表达,干预肝细胞的凋亡。     

辨证治疗对非酒精性脂肪性肝病大鼠脂质过氧化及病理的影响

目的：探讨中医辨证治疗对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝脏脂质过氧化及病理影响。方法：取SPF级Wistar。大鼠72只，雌雄各半，随机分为正常组、模型组、对照药物治疗组、药物A方治疗组、药物B方治疗组，先A方后B方治疗组、先B方后A方治疗组、先空白后A方治疗组、先空白后B方治疗组，共9组。除正常组给予普通饲料外，其余各组大鼠饲以高脂饲料。造模第4周后，模型组加用等体积生理盐水灌胃；对照组加用对照药物灌胃；药物A方组加用治疗药物A方灌胃；药物B方组加用治疗药物B方灌胃；先A方后B方治疗组即4～8周用A方，8～12周用B方灌胃；先B方后A方治疗组即4～8周用B方，8～12周用A方灌胃；先空白后A方治疗组即先空白，第8～12周用A方灌胃；先空白后B方治疗组即先空白，第8～12周用B方灌胃。实验第12周时，测定大鼠肝组织SOD、MDA、GSH—ST的含量及评定大鼠肝组织脂肪变性程度及病理炎症活动度。结果：实验第12周时，先A方后B方治疗组提高NAFLD后期大鼠的肝组织SOD、GSH—ST含量的疗效与其他治疗组相比尤为显著（P〈0．01），降低脂质过氧化产物MDA含量的疗效显著（P〈0．01或尸〈0．05）；在对肝脏病理影响方面，先A方后B方治疗组减轻NAFLD后期大鼠肝细胞脂肪变，降低炎症活动度的疗效明显（P〈0．05或P〈0．01）。结论：在NAFLD的整个病程中，采取早期阶段运用疏肝健脾、活血化瘀、化痰利湿的治法，后期阶段运用化痰消瘀、清热利湿、补益肝肾治法的治疗方案，对于提高大鼠脂肪肝细胞抗氧化能力，降低脂质过氧化产物，减轻大鼠肝细胞脂肪变、降低炎症活动度的疗效显著优于其他治疗措施。     

肝炎肝硬化失代偿期患者中医证型临床特点分析

目的：探讨肝炎肝硬化失代偿期患者（以下简称失代偿期患者）中医证型临床特点。方法：根据失代偿期患者的临床表现及中医临床四诊信息采集的要求，采用临床流行病学调查方法，提取112例失代偿期患者中医症状、体征、舌、脉等四诊信息，结合临床专业知识及中医临床信息分析的思维特点，对112例患者进行系统聚类分析，探讨失代偿期患者中医证型临床特点。结果：显示为4类证型：第1类的特点为气滞湿阻、水湿困脾共57例：第2类为湿热蕴结、气滞、血瘀、水停共22例；第3类为脾肾阳虚、湿阻、气滞、血瘀、水停共13例：第4类为肝脾肾亏损、阴虚水停共20例。结论：4类证型符合肝硬化失代偿期中医证型临床特点及规律性，肝炎肝硬化失代偿期基本病机为肝脾肾三脏同病，气血水相互交结。     

尼古丁抑制穿孔素/颗粒酶B诱导的A549肺癌细胞凋亡

目的: 首次探讨尼古丁对穿孔素/颗粒酶B(perforin/granzyme B)诱导的A549肺癌细胞凋亡的抑制作用及其机制。 方法: 以人肺癌细胞株A549为研究对象,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染荧光显微镜下观察细胞凋亡形态学变化,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色后流式细胞术定量检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及存活素(survivin)mRNA的表达量。结果: (1)不同浓度尼古丁单独作用A549细胞时未见明显诱导凋亡现象,可显著抑制细胞生长(P< 0.01),其抑制率与作用时间和剂量呈正相关。(2)0.125 mg/L perforin作用于A549细胞(1×10⁶个)时,PI染核率可达到90%以上。而当加入1 μL granzyme B(1 mg/L)孵育6 h时,perforin/granzyme B组细胞可呈现90%以上的凋亡现象。(3)6 μmol/L尼古丁作用于perforin/granzyme B预处理的细胞6 h时可见明显凋亡抑制现象,当检测其凋亡抑制蛋白XIAP和survivin mRNA的含量时,发现尼古丁组表达量较高,perforin/granzyme B组表达量明显降低,而当尼古丁联合perforin/granzyme B时表达量最高。结论: 尼古丁可明显抑制perforin/granzyme B诱导的A549肺癌细胞凋亡现象,这种作用可能与凋亡抑制蛋白XIAP和survivin的表达上调有关。