移植胎肝细胞在体内分布和存活的示踪观察

我们观察了胎肝细胞的在体同位素标记及其影响因素;同时应用同位索标记的胎肝细胞,观察了胎肝细胞移植后在受体体内的分布格局和存活情况及其一些影响因素。实验发现,经胎鼠腹腔注射,~(125)I-UdR时,胎肝摄取~(125)I-UdR最多。标记胎肝细胞经外周静脉注射给成年小鼠后,主要分布在肺和肝中,这种分布格局受注射胎肝细胞数量和速度的影响。结果提示:在体法同位素标记的胎肝可用于胎肝细胞移植研究。     

静脉输注鼠胎肝细胞在体内分布及存活的示踪观察

本文建立了胎肝细胞体内直接标记方法,并应用这种标记细胞研究其经静脉输注后在体内的分布和存活情况,从而为进一步研究移植胎肝细胞发挥造血和改善免疫机能打下基础。现将典型实验结果简报如下:     

移植胎肝细胞对环磷酰胺处理小鼠存活率的影响

本文复制了小鼠免疫/造血功能抑制(IHS)模型,观察了移植胎肝细胞对IHS小鼠存活率的影响。结果发现,经静脉或脾内移植胎肝细胞(FLC)可延长IHS小鼠存活率,其效果以后一种移植途径为佳;同种FLC移植(C_(57)→ICR)和同系FLC移植(ICR→ICR)对IHS小鼠生存率延长效果类似。实验提示,移植FLC可能会改善IHS小鼠免疫和造血功能。     

天然杀伤活性的测定——(1)体外8h(125)I-UdR释放试验

用~(125)I—UdR标记靶YAC—1细胞建立8h~(125)I-UdR释放试验(8IRA),体外测定小鼠脾脏细胞NK活性。靶细胞标记的理想条件是:YAC—1细胞2×10~5/ml;加~(1250I-UdR74～111kBq/L;FUdR3×10~(-5)mol/L;在37℃、5%CO_2湿环境中培养5～7h,其~(125)I-UdR掺入量(标记率)为0.5cpm/细胞以上。影响~(125)I-UdR释放因素的研究表明,采用8IRA时,自发释放率在20%以下,而且NK活性的测定结果也稳定。     

放线菌素D对肿瘤转移性能的调节作用

本文初步研究了肿瘤细胞NK敏感性与转移之间的关系。实验发现,用放线菌素D(2.5μg/ml)预处理B16-黑色素可显著增高NK敏感性;且在体内易被清除;在肺中形成血源转移瘤灶数也显著减少。结果提示,肿瘤细胞NK敏感性的改变可能影响其血源转移能力。     

经小鼠眼球后静脉丛注射瘤细胞诱发肺转移的初步研究

经小鼠眼球后静脉丛注射瘤细胞定量诱发实验性肺转移瘤是一个新的偿试。本文将我室近五年来实验的典型结果报道如下。材料和方法将体外原代培养的B16—黑色素瘤(引自上海药物研究所)制成单细胞悬液(台盼蓝检测其活性在95%以上),经小鼠眼球后静脉丛注射入c57BL/6小鼠(♀,18±1克,购自     

B16—黑色素瘤实验性肝转移方法的建立

经C_(57)BL/6小鼠脾内注射同系B_(16)—黑色素瘤细胞,建立实验性肝转移模型。经脾脏(腹外法)直接注射0.1ml瘤细胞悬液(含2×10~6个瘤细胞),肿瘤细胞经脾静脉进入门静脉而停驻于肝脏,18d后肝转移瘤发生率为70%。与经典的大容积脾内注射法(注射量为1ml瘤细胞悬液,1min后切脾)相比,本法保留了脾脏,有更好的临床相关性,从而提供了一种良好的实验性肝转移模型。     

体内自然杀伤活性调变对肿瘤血源转移的影响——(一)环磷酰胺促进肿瘤转移的机理

本文采用实验性肺转移模型定量分析了环磷酰胺对肿瘤血源转移的影响及其作用机理。实验发现,(1)环磷酰胺预处理动物后以剂量依赖性方式促进肿瘤转移;(2)环磷酰胺预处理对血源瘤细胞在体内的分布无明显影响,但显著抑制器官中停驻瘤细胞的清除;(3)给环磷酰胺处理动物过继富含自然杀伤(NK)活性的脾细胞后可以恢复对血源瘤细胞的清除以及抑制肿瘤转移;(4)环磷酰胺预处理显著抑制小鼠体内NK活性。结果表明,环磷酰胺预处理小鼠可以抑制其体内NK活性,阻滞停驻于靶器官中瘤细胞的清除,从而促进肿瘤转移。     

天然杀伤细胞活性的测定(二)体内YAC-1细胞清除试验

经眼球后静脉丛注射至小鼠体内的YAC-1细胞绝大部分分布于肺和肝中,且被迅速清除,无明显重分布现象。YAC-1细胞的清除速率直接受体内NK活性水平的影响,当用环磷酰胺预处理小鼠抑制其NK活性时,体内YAC-1细胞的清除受到抑制;相反,用Poly I:C增强NK活性时,则促进YAC-1细胞的清除。初步研究提示,通过观察体内YAC-1细胞的清除情况(体内YAC-工细胞清除试验),可以直接了解小鼠体内NK活性水平。