肌醇对结肠癌HT-29细胞体外生长的抑制作用

目的 观察肌醇对人结肠癌HT-29细胞体外生长的影响,探讨肌醇对结肠癌细胞增殖及凋亡方面的作用。方法 采用MTT实验,检测不同浓度肌醇对结肠癌HT-29细胞的抑制率;免疫细胞化学实验测定增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况;流式细胞仪检测细胞周期变化及凋亡发生率。结果 MTT实验结果显示,随着肌醇剂量的增加,肌醇对结肠癌HT-29细胞的抑制率明显增高(F=682.048,q=8.293~44.146,P<0.05);免疫细胞化学实验显示,与对照组比较,肌醇干预组对PCNA的表达有显著抑制的作用(F=149.973,q=4.450~20.826,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,随着肌醇剂量的增加,HT-29细胞停留在G0/G1期比例增加,S期、G2/M期的比例减少(F=31.109~59.178,q=2.660~12.783,P<0.05);与对照组相比,各肌醇干预组HT-29细胞凋亡率均有明显升高(F=1 214.826,q=16.587~56.885,P<0.05),并且随着肌醇剂量的增大,各肌醇干预组细胞凋亡率逐渐升高。结论 肌醇通过阻滞HT-29细胞周期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,从而发挥抑制结肠癌HT-29细胞生长的作用。     

HPLC测定独一味软胶囊中8-epideoxyloganic acid的含量

目的 : 建立独一味软胶囊中8-epideoxyloganic acid的含量测定方法。 方法 :采用高效液相色谱法。色谱柱:迪马C₁₈(4.6 mm×250 mm, 5 μm),柱温40 ℃,流动相甲醇-0.025 mol ·L^-1磷酸水(50 ∶50),流速1.0 mL · min^-1,检测波长238 nm。 结果 : 8-epideoxyloganic acid进样量在1.979 2~9.896 μg线性关系良好,回收率均在95.20%~100.00%,RSD均小于5%。 结论 :此方法准确可靠,重复性好,结果稳定,可作为独一味软胶囊及其他独一味制剂中环烯醚萜成分含量测定的方法。     

刺参酸性黏多糖对人肝癌HepG2细胞线粒体膜电位及钙离子浓度的影响

目的观察刺参酸性黏多糖(SJAMP)体外诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的情况,探讨SJAMP对HepG2细胞线粒体凋亡途径相关膜电位作用机制。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,用不同浓度的SJAMP(0.25、1.00、4.00mg/L)对其进行干预,应用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位改变,Fura-2荧光显微镜检测细胞钙离子浓度改变。在相同条件下干预人正常肝细胞(张氏细胞)以观察其对正常细胞的影响。结果随着SJAMP剂量的增加,HepG2细胞内钙离子浓度及线粒体膜电位均降低,各干预组与空白对照组比较、各干预组间比较差异均有显著性(F=183.36、264.24,q=3.26～35.67,P<0.05);而张氏细胞各干预组钙离子浓度及线粒体膜电位(除0.25mg/L SJAMP作用组线粒体膜电位高于其他组外)差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SJAMP可能通过降低细胞内钙离子浓度和细胞线粒体膜电位,诱导线粒体通透性的改变,启动细胞凋亡途径。     

独一味化学成分及其活性的研究

目的:研究独一味的化学成分及其活性.方法:采用聚酰胺、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱分离纯化化合物,运用理化鉴别及波谱分析技术鉴定化合物结构.采用醋酸扭体法、小鼠断尾止血时间和二甲苯致耳肿胀抗炎试验,测定化合物活性.结果:从独一味乙醇渗漉提取物中分得5个化合物,其中化合物8-epideoxyloganic acid为从该属植物中首次分得.与中成药独一味片组比较,8-epideoxyloganic acid的低、高剂量组均有明显的镇痛、止血作用,高剂量组有明显的抗炎作用.结论:8-epideoxyloganic acid为独一味中镇痛、止血、抗炎的有效成分之一.     

刺参酸性黏多糖对人肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的了解刺参酸性黏多糖(SJAMP)对体外培养的人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法体外培养HepG2细胞,MTT法检测SJAMP对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学法检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达,以正常肝细胞(张氏细胞)作为对照。结果 SJAMP能抑制HepG2细胞增殖,且随着干预剂量(0、0.5、2.0、8.0mg/L)和干预时间(12、24、48h)延长其抑制作用增强(F=68.430～596.680,q=3.714～55.029,P<0.05);不同浓度SJAMP作用对张氏细胞增殖无明显的抑制作用(P<0.05)。随着SJAMP剂量的增加,HepG2细胞停留在G1期比例增加,S期、G2期的细胞减少(F=4.483～18.791,q=1.921～9.876,P<0.05);对于张氏细胞,SJAMP作用后其细胞周期未发生显著改变(P>0.05)。SJAMP作用后HepG2细胞的PCNA表达降低,且随着SJAMP作用剂量的增加而降低(F=2 688.640,q=55.365～156.296,P<0.05);张氏细胞PC-NA表达未发生显著变化(P>0.05)。结论 SJAMP通过诱导HepG2细胞发生细胞周期G1期阻滞并抑制其PCNA表达,从而抑制HepG2细胞增殖,发挥抗肿瘤作用。     

独一味镇痛止血有效部位的研究

目的 筛选独一味镇痛止血有效部位.方法 采用醋酸扭体法和小鼠断尾法,对独一味茎叶70%乙醇渗漉提取物,经聚酰胺和AB-8大孔吸附树脂分离得到各个部分进行了镇痛、止血活性筛选.结果 经聚酰胺分离的水洗脱部分有明显的镇痛、止血作用,再经大孔吸附树脂分离,30%醇洗脱部分镇痛、止血作用明显.结论 70%乙醇渗漉提取物经聚酰胺后的水洗脱部分,再经大孔吸附树脂富集,30%乙醇洗脱部分是独一味镇痛、止血的主要活性部位.