大鼠肠道传输功能检测方法改进的实验研究

我们用18号穿刺针改制成大鼠专用的固体灌胃针并制作塑料球粒,在动物不禁食情况下,灌胃塑料球粒,收集大鼠粪便中的球粒,将其数量作为检测大鼠肠道传输的量化指标,与小肠炭末推进率进行对比分析,试验获得了满意的结果,现报告如下。1材料与方法1.1大鼠专用固体灌胃针的制作将18号     

慢病毒介导的CYP3A11基因knock-down小鼠的建立

目的构建和筛选小鼠P4503A11基因miR RNAi慢病毒载体,建立CYP3A11基因knock-down小鼠。方法利用Ravi Sachidanandam's Lab的在线软件设计沉默小鼠P4503A11基因的miRNA所对应的shRNA序列,PCR扩增后克隆到PCI-GFP-MiR质粒中,其再与慢病毒载体FUW进行重组。将psPAX2和pMD2.G两个载体和FUW-GFP-MiR-shRNA重组慢病毒载体共转染293FT细胞,包装成病毒。用包装好的病毒液感染293FT细胞后,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定。将上述重组慢病毒载体分别转染FVB/N小鼠肝细胞,转染48h后,检测P4503A11基因mRNA表达水平的变化。选取干扰效果最好的FUW-GFP-MiR-shRNA1重组慢病毒载体进行制备基因knock-down小鼠模型。用显微注射法将浓缩的shRNA1病毒液注射至FVB/N小鼠12细胞期胚胎透明带下。将注射后发育至22细胞期的胚胎移植至假孕受体母鼠,得F0代小鼠。在紫外光照射下利用滤光片观察GFP在小鼠活体内的表达水平。结果DNA测序结果显示3个重组慢病毒载体均与所设计的shRNA序列一致。检...     

苦碟子注射液对乙醇所致大鼠急性肝损伤的影响

目的观察苦碟子注射液对大鼠急性酒精性肝损伤的影响。方法采用50％乙醇给大鼠灌胃5d造成大鼠急性酒精性肝损伤模型，第3天检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST），第5天给药后检测血清ALT，AST，还原型谷胱甘肽（GSH）及肝匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）。结果苦碟子注射液可显著降低大鼠急性酒精性肝损伤模型血清ALT及AST（P〈0．01或P〈0．05），能明显抑制造模大鼠血清中GSH含量降低（P〈0.01），明显提高肝匀浆SOD水平（P〈0．01），降低肝匀浆MDA含量（P〈0．05）。结论苦碟子注射液对大鼠急性酒精性肝损伤具有较好的治疗作用，为其临床用药提供了药效学基础。     

幼龄贵州小型猪体重与各脏器重量之间关系的回归分析

目的:测定幼龄贵州小型猪脏器重量、脏器系数的生物学特性指标,对体重与各脏器重量之间的关系进行了回归分析,并计算出相应的直线回归方程。方法:选用初生和一月龄贵州小型猪各20只,雌雄各半,分别测定体重和10个脏器重量,计算脏器系数,对脏体比与体重作相关性分析。结果:雌雄贵州小型猪初生组体重、肝重量、肾重量、胃系数差异均有极显著性(P<0.01),胃重量、心重量有显著性差异(P<0.05),而一月龄组雌雄体重和脏器重量差异均无显著性(P>0.05),肺系数差异有极显著性(P<0.01);雄性贵州小型猪体重与肝、胆囊、胃、心、肺、肾、脾、肾、脾、肾上腺、睾丸(P<0.01),两样本间有线性关系。雌性贵州小型猪体重与肝、胆囊、胃、心、肺、肾、脾、肾、脾、肾上腺(P<0.01),两样本间有线性关系。卵巢(P>0.05),两样本间无线性关系。结论:本研究填补了国内有关贵州小型猪脏器重量、脏器系数测定的空白,为相关研究打下基础。     

苦碟子对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的防治作用

目的:观察苦碟子注射液对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的防治作用.方法:建立CCl4所致大鼠急性肝损伤模型,设空白对照组、模型对照1组、苦碟子预防组、模型对照2组、苦碟子治疗组,并分别用药.通过测定各组动物血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)和观察肝脏组织病理学变化,以评价肝脏损伤程度和药物的防治作用.结果:该药能显著降低CCl4所致急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST含量,病理切片示肝组织变性、坏死明显减轻.结论:苦碟子注射液对此模型大鼠的肝损伤具有显著的防治作用,其可能的机制还有待研究.     

苦碟子注射液治疗贵州小型猪肝纤维化的实验研究

目的 观察苦碟子注射液对复合因素所致的贵州小型猪肝纤维化治疗作用.方法 贵州小型猪15头,随机分为空白组、模型组、治疗组3组,分成造模和治疗两个阶段.除空白组外的其他2组前8周为造模阶段,用40%CCl_4橄榄油(0.5 ml/kg)和兔血清(0.5 ml/kg)分别腹腔注射,空白组用橄榄油和生理盐水(NS)各0.5 ml/kg分别腹腔注射,1周两次,共8周;治疗阶段:实验的第9周开始,治疗组给予苦碟子注射液0.8 ml/kg(相当苦碟子生药16g),其余2组给予NS 0.8 ml/kg,均为每天腹腔注射1次,共28 d.各组分别于实验末处死动物取血和肝组织块,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白蛋白/球蛋白比值(A/G);行HE、Masson染色在光镜下及透射电镜观察肝脏组织病理学变化,以评价肝脏损伤程度和药物的治疗作用.结果 ①苦碟子注射液能显著降低复合因素所致贵州小型猪肝纤维化动物模型的血清ALT、AST含量(P<0.01),减轻肝损伤引起的ALB降低及A/G比例倒置(P<0.05或P<0.01);②光镜切片示苦碟子注射液能减轻贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞变性、坏死,使增生的纤维成分减少,甚至消失.③电镜照片显示:苦碟子注射液能减轻贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞损伤,稳定质膜,使细胞间质中胶原纤维沉积减少.结论 苦碟子注射液对贵州小型猪肝纤维化模型具有显著的治疗作用,其可能的机制还有待进一步研究.     

不同剂量苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的:探讨不同剂量苦碟子注射液对复合因素致大鼠肝纤维化的治疗作用及各剂量间疗效的比较。方法:采用CCL4和酒精复合诱导大鼠肝纤维化模型,同时采用大、中、小剂量苦碟子注射液治疗,测定谷-丙转氨酶(ALT)、谷-草转氨酶(AST)、羟脯氨酸(HYp)含量及脂质过氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,并以光镜观察组织学改变,综合分析不同剂量苦碟子注射液对CCL4和酒精复合诱导大鼠肝纤维化模型的作用。结果:苦碟子注射液有显著降低ALT,AST、Hyp作用,并能使肝组织MDA降低,SOD升高,均有极显著性意义(P<0.01)。经治疗后的肝细胞损伤、肝脏脂肪变性与纤维组织形成较少。其中大、中剂量组的疗效比小剂量组为好,而高、中剂量组两者之间的差异无显著意义。结论:本实验提示苦碟子注射液大、中剂量组抗肝纤维化的作用优于低剂量组,且苦碟子注射液保护肝细胞、减少肝纤维化的刺激因素的作用机制可能就在于抗脂质过氧化反应。     

护肾Ⅰ号对顺铂致贵州小型猪肾损伤的预防作用及机制探讨

将12只贵州小型猪随机分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,各4只.3组均行膀胱造瘘后,Ⅲ组给予护肾Ⅰ号灌服5d,其余两组给予等量生理盐水.然后Ⅱ和Ⅲ组给以4 mg/kg顺铂一次性腹腔注射建立贵州小型猪肾损伤模型,Ⅰ组注射等量生理盐水.测定注射顺铂前1 h,注射后24、48、96 h时三组血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及尿β2-微球蛋白(β2-MG).结果 :与Ⅰ组比较,Ⅱ组血清BUN、Cr、MDA含量明显升高,血清SOD活力降低,尿β2-MG浓度升高(P均＜0.05).Ⅲ组的各项指标较Ⅱ组明显改善.认为护肾Ⅰ号可预防顺铂所致的肾损伤,其机制可能与抑制顺铂致血液脂质过氧化反应增强有关.     

苦碟子注射液用于肝纤维化大鼠疗效观察及其作用机制探讨

对10只肝纤维化大鼠模型(苦蝶子组),采用苦碟子注射液腹腔注射(0.4 mL/100 g,1次/d),连用2周后检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(AJb)含量,肝组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,并观察其肝脏内α-平滑肌蛋白(α-sMA)表达.结果与模型组比较,观察组显著降低肝血清ALT、AsT含量及肝组织中MDA水平明显降低,使血清Alb含量及肝组织中SOD活性显著升高(P＜0.01);肝脏内α-SMA阳性细胞数明显减少(P＜0.01),认为苦碟子注射液具有抗肝纤维化的作用,其机制可能为抗脂质过氧化及降低HSC活化.