转染肿瘤总RNA的DC疫苗诱导抗肝癌特异性免疫

目的：探讨转染人肝癌总RNA的树突状细胞(DC) 疫苗体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用。 方法： 采用原发性肝癌（HCC）病人外周血单核细胞（PBMC），在粒/巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4) 刺激下增殖分化为DC细胞；从人肝癌细胞中体外扩增肝癌RNA。以HCCRNA转染DC细胞，并与PBMC混合培养诱导扩增CTL。MTT法测定CTL的杀瘤活性。 结果： 转染HCCRNA 48 h后， DC表面分子CD83、CD86和HLA-DR表达明显增高。转染HepG-2细胞HCCRNA的DC和病人HCCRNA诱导的CTL对HepG-2细胞和病人HCC细胞的杀瘤活性均明显高于正常肝细胞RNA+DC、脂质体+DC、Opti-MEM+DC以及空白对照组；而对胃癌SGC-7901细胞无杀伤活性。 结论： 以肝癌RNA为肿瘤抗原，DC作为疫苗的抗原提呈细胞，体外冲击致敏DCs，能诱导肝癌特异性CTL。本研究为HCC术后复发和转移的防治提供一种可能有效的疫苗治疗方法。     

PTCS联合钬激光碎石在复杂性肝内外胆管结石中的疗效

目的 探讨经皮肝胆管镜(Percutaneous transhepatic cholangioscopy,PTCS)联合钬激光碎石术在治疗复杂性肝内外胆管结石中的临床治疗效果.方法 采用回顾性研究方法收集自2019年10月至2020年10月在赣南医学院第一附属医院就诊的复杂肝胆管结石病人的临床资料及随访资料.经过严格的筛选后,最终有72例病人纳入研究.根据所采用的手术方式不同,分为观察组和对照组,观察组36例患者采用PTCS联合钬激光碎石取石术治疗,对照组36例患者采用传统的开腹手术治疗,比较两组临床研究的疗效、相关临床治疗效果指标以及术后总并发症的发生率.结果 观察组的治疗总有效率为97.22％显著高于对照组80.55％,差异具有统计学意义(P<0.05).观察组的手术时间131.3±12.1min、住院时间10.8±2.4d、结石残留率(n％)(0.00％)明显短于对照组185.1±10.9min、16.3±4.2d、(13.88％),差异有统计学意义(P<0.05).观察组的手术总并发症发生率为5.55％显著低于对照组33.33％,差异有统计学意义(P<0.05).结论 PTCS联合钬激光碎石取石术在治疗复杂性肝内外胆管结石的临床治疗效果显著,能够有效地清除结石,具有手术创伤小、术口整齐美观、术后恢复快、并发症发生率低等优势,值得在临床推广应用.     

稳定表达乙型肝炎病毒X和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法研究

目的探讨稳定表达乙型肝炎病毒X(HBVX)和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法。方法应用LE培养基对大鼠肝细胞株进行培养,将pcDNA 3.1-HBVX质粒中的HBVX序列作为实验模板,采用PCR法对获得的目的基因HBVX片段进行扩增,构建稳定表达的HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后观察HBVX基因克隆结果,鉴定pcDNA 3.1(+)/HBVX重组质粒和MicroRNA-21质粒。结果 PCR产物HBVX基因片段中存在全部HBVX基因编码序列;RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后可见长度为300 bp的MicroRNA-21前体片段。结论本研究成功构建了稳定表达HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株,为临床进行深入研究提供了实验基础。     

Hassab术后并发症的多元回归分析

Hassab手术是目前治疗门脉高压症合并胃底食道静脉曲张破裂出血较为认可的手术方法之一,但术后仍有较多的并发症[1].笔者回顾分析1996年9月至2006年1月间施行的186例Hassab术,以多元回归方法分析Hassab术后并发症发生的相关因素,并探讨进一步降低术后并发症的方法.     

内镜套扎联合善宁治疗食管静脉曲张破裂出血疗效观察

目的探讨内镜下套扎联合善宁对食管静脉曲张治疗术后再出血的预防作用。方法选择112例食管静脉曲张患者,随机分为套扎组（A组）和套扎＋善宁组（B组）各56例,观察两组患者术后疗效以及并发症情况。结果B组的近期和远期再出血率、静脉曲张复发率、并发症以及门脉高压性胃病的发生率明显低于A组。结论套扎联合善宁治疗食管静脉曲张能有效降低食管静脉曲张术后再出血率。     

肝癌骨转移患者介入手术前中后的焦虑反应与处理

目的探讨肝癌骨转移患者介入手术前中后的焦虑反应与处理方法。资料与方法入院拟行限期介入手术治疗无精神疾病的肝癌骨转移患者32例,采用Zung氏焦虑自评量表进行自我评定,对于存在焦虑者,于介入手术前1天（术前处理后）、术后1天（术中处理后）、术后7天（术后处理后）再予以3次焦虑评分。结果行介入手术肝癌骨转移患者均存在不同程度的各种焦虑,经过给予相应的处理后,患者焦虑的情况整体有明显的改善,焦虑评分显著的降低。结论肝癌骨转移患者介入手术前中后的焦虑反应,可通过医务人员采取针对性的心理支持和干预,调动其主观能动性,改变其错误的认知,树立战胜病魔的信心,达到积极配合介入治疗的目的。     

负载肝癌抗原的树突状细胞疫苗对SCID荷瘤鼠的抑瘤作用观察

采用人外周血淋巴细胞腹腔注射法建立人外周血淋巴细胞—严重联合免疫缺陷（Hu-PBL-SCID）鼠模型。随机分为四组：Ⅰ组尾静脉注射mRNA未致敏的树突状细胞（DC）疫苗,Ⅱ组注射抗CD4＋、CD8＋＋mRNADC,Ⅲ组为DC,Ⅳ组为PBS,每周1次,共2次,然后接种2&#215;106肝癌细胞HepG-2,观察鼠成瘤率、成瘤潜伏期、肿瘤体积以及测定特异性细胞毒淋巴细胞（CTL）活性;流式细胞术检测体内种植瘤的细胞周期;用ELISA法检测鼠血清中是否有人IgG。结果鼠血清中均有人IgG,Hu-PBL-SCID嵌合模型重建成功,各组小鼠间成瘤率无明显差异,但Ⅰ组成瘤潜伏期延长,肿瘤生长缓慢,2周后肿瘤体积明显小于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组（P〈0.05）,Ⅰ组脾淋巴细胞对HepG-2有特异性杀伤效应。Ⅰ组HepG-2有75.82%&#177;4.78%处于G0/G1期,13.54%&#177;2.55%处于S期,10.64%&#177;2.36%处于G2/M期,与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ比较,P〈0.05。认为负载肝癌抗原的DC疫苗体内能诱导产生明显的抑瘤作用。     

腹腔镜胆囊切除术后胆漏10例临床分析

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术(LC)后胆漏的原因及防治措施.方法:回顾性分析1999年1月至2010年12月LC术后10例胆漏病例的临床资料.结果:10例胆漏病例中,即发性胆漏8例,迟发性胆漏2例.即发性胆漏(发生在术后72 h内)8例,其中胆总管损伤2例、胆囊管残端钛夹滑脱1例、原因不明5例(考虑为迷走胆管损伤或胆囊管钛夹夹闭不全),行胆总管修补、“T”管引流术2例,腹腔镜下腹腔引流1例,腹腔穿刺置管引流3例,腹腔穿刺置管引流+鼻胆管引流(ENBD)2例,均治愈;迟发性胆漏(发生在术后1周后)2例,1例发生在术后1周,经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)为胆总管侧壁漏;1例发生要术后10 d,经ERCP证实为迷走胆管漏.迟发性胆漏中,迷走胆管漏1例、胆总管侧壁漏1例,行单纯腹腔穿刺置管引流1例、腹腔穿刺置管引流+ ENBD 1例,均治愈.结论:LC术后胆漏主要原因为胆管变异、胆囊管残端漏和胆管壁损伤;胆漏一旦发生,应早期诊断、及时处理,腹腔穿刺是首选诊断措施,影像学检查能对可疑病例作出早期诊断;当机立断地通畅腹腔和(或)胆汁引流最为重要,微创化措施完成引流和恢复胆道完整性是首选治疗方案.     

肝细胞肝癌化疗栓塞术后二期切除治疗体会

目的:探讨对不能手术切除的中晚期肝癌经肝动脉化疗栓塞术(TACE)后行二期手术切除的可行性及疗效.方法:回顾性分析36例中晚期肝癌临床资料,其中经皮肝动脉穿刺化疗栓塞(TACE)术后切除患者28例,经肝动脉结扎加插管栓塞化疗(HACE)术后再切除8例.平均接受化疗栓塞治疗3.25次,末次化疗距手术时间平均2.78月.结果:化疗栓塞术后肿瘤平均直径从(10.12±1.5) cm缩小为(6.65±1.8) cm;甲胎蛋白(AFP)阳性31例,化疗栓塞后28例降至正常,手术切除后2个月均降至正常.结论:经肝动脉化疗栓塞可使部分不能手术切除的中晚期肝癌缩小,提供二期手术切除的机会,并可获得较满意的疗效.可作为无手术切除机会的中晚期肝癌的有效替代方法之一.     

稳定表达乙型肝炎病毒X基因正常肝细胞株的建立

我们通过脂质体介导转染将乙型肝炎病毒X(HBVx)基因导入正常肝细胞系中,建立稳定表达乙型肝炎病毒X基因正常肝细胞株,为研究HBVx基因的生物学行为提供细胞模型.